КАРТОЧКА ПРОЕКТА ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ И ПОИСКОВЫХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ,
ПОДДЕРЖАННОГО РОССИЙСКИМ НАУЧНЫМ ФОНДОМ

Информация подготовлена на основании данных из Информационно-аналитической системы РНФ, содержательная часть представлена в авторской редакции. Все права принадлежат авторам, использование или перепечатка материалов допустима только с предварительного согласия авторов.

 

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ


Номер 17-19-01637

НазваниеРазработка диэлектрических и гибридных наноструктур как многофункциональных элементов биофотоники

РуководительКившар Юрий Семенович, Доктор физико-математических наук

Организация финансирования, регион федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский университет ИТМО", г Санкт-Петербург

Период выполнения при поддержке РНФ 2017 г. - 2019 г. 

Конкурс№18 - Конкурс 2017 года «Проведение фундаментальных научных исследований и поисковых научных исследований отдельными научными группами».

Область знания, основной код классификатора 09 - Инженерные науки, 09-206 - Нано- и мембранные технологии

Ключевые словаНанофотоника, наночастицы, биофотоника, резонансы Ми, плазмонный резонанс, фононы, визуализация, сенсинг, фотокатализ

Код ГРНТИ29.19.22


СтатусУспешно завершен


 

ИНФОРМАЦИЯ ИЗ ЗАЯВКИ


Аннотация
Данный проект направлен на решение одной из важнейших задач современной биофотоники – создание «умных» (т.е. способных интерактивно сообщать о своем состоянии) фотонных наноструктур для комплексной визуализации клеточных структур, сенсинга органических соединений и фотокатализа. Действительно, визуализация внутриклеточного пространства с высоким разрешением, детектирование малых концентраций, анализ химического состава низко и высокомолекулярных соединений, а также нанотермометрия, совмещенная с оптическим стимулированием/управлением химическими реакциями и физическими процессами в органических соединениях являются крайне важными и, отчасти, основополагающими в фундаментальных и прикладных работах клеточной биологии, вирусологии, медицине, фармацевтике и терапевтике. Совмещение же подходов к визуализации, сенсингу и фотокатализу в одном, универсальном, оптическом методе открывает огромные возможности для комплексного анализа органических соединений и деталей строения клеточных структур с высокой эффективностью, точностью и, главное, простотой. Для визуализации клеточных структур обычно используют методы иммуноцитохимии. Однако нестабильность флуоресцентных красителей, токсичность и мерцание квантовых точек, используемых в этих методах, – непреодолимые проблемы, снижающие четкость получаемых изображений. Для детектирования же орагнических молекул, размеры которых меньше 10 нм, обычно применяются фотонные кристаллы с высоким фактором Парселла и низкими оптическими потерями, а также металлические наноструктуры, локализующие и усиливающие свет в наномасштабе, что приводит к SERS (усиленное поверхностью комбинационное рассеяние) эффекту для адсорбированных молекул. Однако фотонные кристаллы для задач детектирования предъявляют повышенные требования к качеству их изготовления и часто непрактичны в использовании (большие размеры, сложность доставки одиночных молекул в объем фотонного кристалла и т.д.). В свою очередь, металлические наноструктуры обладают высокими омическими потерями, искажают детектируемый спектральный SERS отклик молекул, цитотоксичны и неудобны для оптимизации диаграммы направленности излучаемого полезного сигнала. Также, металлические частицы, используемые в фотокатализе, помимо перечисленных выше недостатков, не предоставляют никакой дополнительной информации о локальной температуре на ее поверхности. Для устранения перечисленных недостатков существующих методов, в ходе данного проекта будет разработана элементная база биофотоники нового типа: диэлектрические и металл-диэлектрические (гибридные) наночастицы и наноструктуры, обладающие как резонансными колебаниями кристаллической решетки (оптическими фононами), так и оптическими резонансами Ми типа и локализованными плазмонами. Согласно классической теории Ми, диэлектрические наноструктуры (например, кремниевые или германиевые) могут демонстрировать индуцированные магнитный и электрический резонансы в оптическом диапазоне. Наличие резонансов двух типов открывает широкие возможности для управления светом на наномасштабе и позволяет перестраивать диаграммы направленности излучаемого и поглощаемого сигналов. В свою очередь, комбинирование диэлектрических и металлических наночастиц позволяет сочетать магнитный оптический отклик с высокой степенью ближнепольной локализации, так необходимой как для SERS эффекта, так и для фотокатализа. Такая гибридизация в последние несколько лет притягивает внимание исследователей в области нанофотоники своими исключительными перспективами. Помимо прочего, колебания кристаллической решетки диэлектрических и гибридных наночастиц позволят использовать их в высокоточной нанотермометрии, что, в купе с оптическими резонансами, открывает огромные перспективы для их универсального использования во многих задачах нано и биофотоники и делают их многофункциональными. Такие наночастицы и наноструктуры, применительно к проблемам визуализации, сенсинга и фотокатализа будут создаваться и изучаться впервые. Стоит также отметить, что многофункциональные наночастицы будут создаваться как при помощи уникального в России метода лазерной печати однослойных и многослойных наночастиц с различной степенью кристалличности, так и при помощи отработанных высокотехнологичных методов нанолитографии. Таким образом, новизна и актуальность данного проекта не вызывает сомнений. Действительно, использование «умных» фотонных наноструктур в биофотонике сделает подходы к визуализации, сенсингу и оптическому стимулированию процессов в органических соединениях по настоящему простыми, многоканальными, универсальными и быстрыми в исполнении, а сочетание большого опыта в области нанофотоники и биофизики у членов коллектива (http://metalab.ifmo.ru/, см. сведения об основных исполнителях) позволит решить важнейшие задачи в современной биофотонике. Более того, представленный междисциплинарный проект является уникальным даже на международном уровне, имеет глубокую историю развития и основательный научный задел (см. пункт 4.8 и файл с дополнительной информацией 2), что позволит успешно реализовать его и, в дальнейшем, развивать как самостоятельное научное направление.

Ожидаемые результаты
Настоящий проект направлен на проведение фундаментальных теоретических и экспериментальных исследований резонансов двух типов (оптических резонансов Ми типа и фононных резонансов) в диэлектрических и гибридных наночастицах с целью создания «умных» фотонных наноструктур как многофункциональных элементов для визуализации, сенсинга и стимулирования процессов в высокомолекулярных соединениях и клетках. В результате выполнения проекта будут разработаны, изготовлены и изучены диэлектрические и гибридные наночастицы и наноструктуры (метаповерхности). Созданные элементы будут, во-первых, уникальными для биофотонных приложений, во-вторых многофункциональными и универсальными при работе с широким спектром органических объектов, а также будут отличаться удобством в использовании по сравнению с существующими аналогами на основе металлических наночастиц или чистых красителей. В частности будут разработаны: 1. Наноразмерные люминесцентные маркеры для четкой визуализации отдельных органелл с суб дифракционным разрешением (менее 100 нм) и параллельного анализа температуры окружения на основе диэлектрических наночастиц, поверхность которых функционализирована органическими красителями. Эффект будет достигнут за счет ближних полей на магнитных и электрических резонансах Ми около поверхности наночастицы без паразитного гашения полезного сигнала люминесценции. 2. Нанотермометры для высокоточного измерения температуры (0.4 С) и параллельного анализа химического состава биологического окружения в суб дифракционных областях на основе диэлектрических и гибридных наночастиц. Эффект будет достигнут за счет теплового равновесия между окружающей средой и самой диэлектрической наночастицей, а также термочувствительных и активных в комбинационном рассеянии оптических фононов кремния и германия. 3. Наноразмерные фотокатализаторы с обратной связью в широком диапазоне температур (от криогенных до 1000 С) на основе диэлектрических и гибридных наночастиц для контролируемого запуска конформаций высокомолекулярных соединений в наномасштабе, разрушения полимерных капсул, которые активно используются для доставки различных веществ внутрь клетки, и параллельным измерением температуры. Эффект будет достигнут за счет контролируемых поглощения излучения металлической частью наночастицы и конверсии ее в тепловую энергию. 4. Визуализаторы на основе диэлектрических и гибридных метаповерхностей для одновременного построения интерактивных карт температуры с высокой точностью (0.4 С), топографии с суб дифракционным разрешением (менее 100 нм) и химического состава макромолекул и внутриклеточного пространства. Комплексный эффект будет достигнут за счет SERS эффекта металлической и диэлектрической частей наночастицы, фононных свойств диэлектрической ее части, а также процессов усиления люминесценции и собственной генерации высших гармоник. Успешное выполнение данного проекта откроет новую область в прикладных нано и биофотонике – совместное использование магнитного оптического, плазмонного резонансов и резонансных колебаний кристаллической решетки для создания универсальных и многофункциональных визуализаторов, сенсоров и фотокатализаторов. Результаты проекта будут иметь широкую область применений: от получения стандартных конфокальных изображений биологических объектов с высоким разрешением до контролируемой точной доставки лекарственных препаратов внутрь клеток. Среди огромного круга потребителей созданных элементов можно указать как научные группы (см. письма поддержки от иностранных ученых в файле с дополнительной информацией 1), занимающиеся фундаментальными исследованиями в области биофизики белков, клеточной биологии, термометрии, катализа, так и коммерческие медицинские учреждения, предприятия с оптическими и кремниевыми технологиями, производителей биохимических тестов и систем био-мониторинга. Важность запланированных в проекте работ также следует из того факта, что исследования в области создания новых элементов биофотоники активно ведутся не только в частных и государственных (иностранных) институтах, но и таких международных компаниях, как Biotest, Biosensor, Remedios Ltd. и др, а реализация настоящего проекта именно в России сможет вывести государство на принципиально новый уровень междисциплинарных идей и исследований за счет применения диэлектрических и гибридных наноструктур и метаматериалов в новой, уникальной для, них области - биофотонике.


 

ОТЧЁТНЫЕ МАТЕРИАЛЫ


Аннотация результатов, полученных в 2017 году
Проделанная работа и полученные результаты за первый год реализации проекта представляет собой целостное научное исследование, которое можно разделить на следующие пункты. 1. Изготовлены диэлектрические кристаллические наночастицы кремния, германия и кремний-золота методами фемтосекундной и наносекундной лазерной печати на твердых поверхностях и в растворах. Выполнен комплексный анализ формы, размера и структуры наночастиц методами электронной микроскопии, оптической спектроскопии и численного моделирования оптического и теплового отклика. 2. Методами литографии изготовлены метаповерхности на основе кремния, золота и кремний-золотых элементов на стекле. Выполнен комплексный анализ топологии и оптических свойств метаповерхностей методами электронной микроскопии и оптической спектроскопии. Оптические свойства и геометрия ряда гибридных метаповерхностей были прецизионно перестроены лазерной пост-обработкой. 3. Построена теория взаимодействия кристаллических диэлектрических наночастиц, обладающих резонансами Ми типа в оптическом диапазоне, с оптическим излучением, обеспечивающим резонансный нагрев наночастиц. Результаты были отмечены в средствах массовой информации как значимые результаты в биофотонике (http://meddaily.ru/article/26may2017/itmo и https://ria.ru/science/20170531/1495494668.html). 4. Синтезированы полимерные капсулы с внедренными в них кремниевыми наночастицами, а также проведена функционализация наночастиц органическим красителями Dy505 и высокомолекулярными соединениями (белок альбумин), которые частично были инкубированы с клеточными культурами HeLa и C2C12. 5. Теоретически показано и экспериментально продемонстрировано (http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/lpor.201700227/abstract и http://aip.scitation.org/doi/abs/10.1063/1.4998072), что гибридная нанополость в виде кристаллической кремниевой наночастицы с нанометровым слоем оксида, расположенной на 60-нм золотой пленке, выступает в качестве многофункционально элемента биофотоники, обеспечивающего одновременно наномасштабную (100 нм) термометрию с высокой точностью (0.4 К) и скоростью (0.1 с), контролируемый локальный нагрев светом до 1200 К, усиленный сигнал с молекул-аналитов (более 10^4) и мониторинг молекулярных событий (на примере тепловой денатурации альбумина). 6. Экспериментально продемонстрирован эффект тепловой стабильности протеиновой короны диэлектрических наночастиц. Показано, что наночастицы германия обеспечивают конформационную устойчивость белков на своей поверхности к высоким температурам (до 400 К). Результаты характеризуются большим вкладом в биофотонику, где разнообразные наночастицы на примере металлических и оксидных используются для переноса и доставки биомолекул. 7. Экспериментально и теоретически показано, что усиление люминесценции органических красителей в клеточных культурах может быть достигнуто за счет использования новых наночастиц – кристаллических кремниевых, демонстрирующих резонансы Ми типа. Показано, что металлические и оксидные наночастицы демонстрируют сравнительно меньшие коэффициенты усиления люминесценции. 8. Научные результаты по проекту представлены на локальных семинарах в Каролинском институте (Швеция), Марбургском университете (Германия), а также международных конференциях Metamaterials2017 (http://congress2017.metamorphose-vi.org/), Metanano2017 (https://metanano.ifmo.ru/2017/), PIERS 2017 (www.piers.org/piers2017StPetersburg/) и российской междисциплинарной конференции «Всероссийская молодежная школа-конференция по актуальным проблемам химии и биологии» (http://www.piboc.dvo.ru/conf/mes2017.php). Все доклады содержат благодарность настоящему проекту.

 

Публикации

1. Валентин А. Миличко, Дмитрий А. Зуев, Денис Г. Баранов, Георгий П. Зограф, Катерина Володина, Андрей А. Красилин, Иван С. Мухин, Павел А. Дмитриев, Владимир В. Виноградов, Сергей В. Макаров и Павел А. Белов Metal-Dielectric Nanocavity for Real-Time Tracing MolecularEvents with Temperature Feedback Laser & Photonics Reviews, - (год публикации - 2017) https://doi.org/10.1002/lpor.201700227

2. Георгий П. Зограф, Дмитрий А. Зуев, Валентин А. Миличко и Сергей В. Макаров Gap size impact on metal-dielectric nanocavity heater properties AIP Conference Proceedings, 1874, 030043 (год публикации - 2017) https://doi.org/10.1063/1.4998072


Аннотация результатов, полученных в 2018 году
1. Экспериментально реализован подход к динамической и обратимой перестройки оптических резонансов Ми-типа для единичных кремниевых наночастиц (до 60 нм) и метаповерхностей (до 2 нм), покрытых термочувствительными полимерами PSS, Hep, pNIPAM и PDADMAC, в режиме реального времени. 2. Обнаружено и исследовано уникальное поведение структур глобулярных белков на поверхности диэлектрических наночастиц и метаповерхностях: светоиндуцированные манипуляции конформацей белка альбумин на поверхности единичных наночастиц германия, кремния и метаповерхностей, реализуемые за счет взаимодействия света с комплексом наночастица/метаповерхность-белок. Выявлена конформационная устойчивость белков на специфических поверхностях к высоким температурам. https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/jbio.201700322 https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/lpor.201700227 http://news.ifmo.ru/ru/science/new_materials/news/7436/ 3. Обнаружено, что культивация клеточных культур на метаповерхностях провоцирует апоптоз для культур HeLa, мезенхимальные стволовые клетки, клетки светлоклеточной почечно-клеточной карциномы и C2C12. 4. Развит и экспериментально реализован метод оптического просветления тел животных и их тканей для модернизации процесса визуализации внутриклеточного пространства тканей, размещенных на оптически резонансных кремниевых метаповерхностях. http://iopscience.iop.org/issue/1742-6596/1092/1 5. Экспериментально реализован уникальный подход к суб-дифракционной визуализации за счет нелинейного теплового эффекта на фононный спектр наночастиц кремния и германия, обеспечивающий пространственное и структурное разрешение субстрата на примере клеточных культур, содержащих наночастицы, до 100 нм в дальнем поле в режиме реального времени. 6. Экспериментальная демонстрация фото-термо стимулированного разрушения оболочек полимерных капсул в клеточных культурах (мезенхимальные стволовые клетки, клетки светлоклеточной почечно-клеточной карциномы) за счет резонансного нагрева диэлектрических наночастиц в оболочке капсул с точными оценками температур распадов (150 С) и высвобождения загруженных в капсулу лекарственных препаратов – винкрицин. https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/chem.201706135 http://news.ifmo.ru/ru/science/new_materials/news/7347/ http://news.ifmo.ru/ru/science/photonics/news/7559/

 

Публикации

1. K. Kantner, J. Rejman, K. V. L. Kraft, M. G. Soliman, М.В. Зюзин, A. Escudero, P. del Pino, W. J. Parak Laterally and Temporally Controlled Intracellular Staining by Light‐Triggered Release of Encapsulated Fluorescent Markers CHEMISTRY-A EUROPEAN JOURNAL, Том: 24 Выпуск: 9 Стр.: 2098-2102 (год публикации - 2018) https://doi.org/10.1002/chem.201706135

2. Алексей Трофимов, Анна Иванова, Михаил Зюзин, Александр Тимин Porous Inorganic Carriers Based on Silica, Calcium Carbonate and Calcium Pharmaceutics, vol. 10 (4), pp. 167, 2018 (год публикации - 2018) https://doi.org/10.3390/pharmaceutics10040167

3. Андрей Красилин, Катерина Вологина, Арина Сухова, Михаил Петров, Дмитрий Зуев, Вячеслав Дячук, Валентин Миличко The conformation of bovine serum albumin adsorbed to the surface of single all-dielectric nanoparticles following light-induced heating JOURNAL OF BIOPHOTONICS, Том: 11 Выпуск: 7 Номер статьи: UNSP e201700322 (год публикации - 2018) https://doi.org/10.1002/jbio.201700322

4. Михаил Зюзин, Денис Баранов,Alberto Escudero, Indranath Chakraborty, Антон Цыпкин, Елена Ушакова,Florain Kraus, Wolfgang J. Parak, Сергей Макаров Photoluminescence quenching of dye molecules near a resonant silicon nanoparticle SCIENTIFIC REPORTS, Том: 8 Номер статьи: 6107 (год публикации - 2018) https://doi.org/10.1038/s41598-018-24492-y

5. А.А. Красилин, Д.А. Зуев, В.А. Дячук, В.А. Миличко Light induced heating of Ge nanoparticlecovered by BSA Journal of Physics: Conference Series, vol. 1092, p. 012089 (год публикации - 2018) https://doi.org/10.1088/1742-6596/1092/1/012089

6. А.Д. Трофимов, А.А. Гончаренко, А.Р. Муслимов, А.С. Тимин, М.В. Зюзин и А.А. Евстрапов Silica microcarriers produced from a microfluidics-generated emulsion Journal of Physics: Conference Series, vol. 1092, p. 012155 (год публикации - 2018) https://doi.org/10.1088/1742-6596/1092/1/012155

7. В.А. Миличко, В.А. Дячук A new tool for imaging and reconstruction of optically cleared invertebrate animals Journal of Physics: Conference Series, vol. 1092, p. 0012088 (год публикации - 2018) https://doi.org/10.1088/1742-6596/1092/1/012088

8. М.В. Зюзин, А.С. Тимин Hybrid capsules as efficient non-viral vector for gene deliveryinto cells Journal of Physics: Conference Series, vol. 1092, p. 012182 (год публикации - 2018) https://doi.org/10.1088/1742-6596/1092/1/012182

9. - Наночастицы помогают разглядеть белки при экстремально высоких температурах ITMO NEWS, - (год публикации - )

10. - Ученые исследовали кремниевые наночастицы для биоимиждинга и доставки лекарств ITMO NEWS, - (год публикации - )

11. - Ученые физтеха Университета ИТМО участвуют в разработке методов доставки лекарств прямо в клетки ITMO NEWS, - (год публикации - )


Аннотация результатов, полученных в 2019 году
1) Экспериментально реализован подход к осаждению диэлектрических и гибридных наночастиц, функционализированных высокомолекулярными органическими соединениями на подложки в воздухе методом высушивания из раствора или прямой печати частиц лазером. 2) Установлена морфология и химический состав органической оболочки (PSS (Poly-(sodium 4-styrenesulfonate), Hep (Heparin), PNIPAM (Poly(N-isopropylacrylamide)), PDADMAC (Poly-(diallyldimethylammonium chloride), 4,4′-stilbenedicraboxylate, 1,4-di(1H-imidazol-1-yl)butane, и 1,6-di(1H-imidazol-1-yl)hexane) таких наночастиц с помощью высокоразрешающей просвечивающей электронной микроскопии и элементного анализа. 3) Экспериментально реализован полностью оптический контроль нагрева и анализа конформации комплекса наночастица кремния – полимерная оболочка PSS-Hep и PDADMAC-Hep-PSS, реализованный в поле лазерного излучения за счет возбуждения высших электрических и магнитных моментов с последующим превращением энергии излучения в тепло, приводящее к трансформации оболочки в аморфный углерод при температурах 115 и 100 градусов Цельсия, соответственно. 4) Продемонстрировано усиление оптического сигнала на примере генерации второй оптической гармоники с органических материалов, расположенных вблизи оптически резонансных кремниевых наноструктур, имеющее место в ограниченной пространственной области менее 5 нм. 5) Выполнена визуализация полимерных капсул, содержащих высокомолекулярные соединения на примере BSA, а также диэлектрических наночастиц, покрытых полимерными слоями PSS-Hep, PDADMAC-Hep-PSS, и sdc2-, L4, L6, в органическом окружении методом конфокальной оптической микроскопии, нелинейной оптической спектроскопии и рамановской спектроскопии. 6) Экспериментально продемонстрирован контролируемый нагрев магнитным полем магнитных полимерных капсул, содержащих наночастицы оксида железа в стенках и в полости, в буферном растворе, с сопутствующим стимулированным разрушением оболочки капсул, контролируемый методом МРТ-спектроскопии.

 

Публикации

1. Безопасная и эффективная доставка противоопухолевых препаратов с использованием мезенхимальных стволовых клеток, пропитанных субмикронными носителями Safe and Effective Delivery of Antitumor Drug Using Mesenchymal Stem Cells Impregnated with Submicron Carriers ACS Appl. Mater. Interfaces, 11, 13091−13104 (год публикации - 2019) https://doi.org/10.1021/acsami.8b22685

2. Сверх быстрое плавление металлорганических каркасов для задач нанофотоники Ultrafast Melting of Metal– Organic Frameworks for Advanced Nanophotonics Advanced Functional Materials, 1908292 (год публикации - 2019) https://doi.org/10.1002/adfm.201908292

3. Мультислойные капсулы внутри органических систем: Состояние исследований и проблематика Multilayer Capsules Inside Biological Systems: State-of-the-Art and Open Challenges Langmuir, 35, 4747−4762 (год публикации - 2019) https://doi.org/10.1021/acs.langmuir.8b04280

4. Глиа-нейрональные переходы в развитии: значение в медицинских исследованиях и лечении патологий Glia-neuronal transitions in development: significance in medical research and treatment of pathologies IOP Journal of Physics: Conference Series, - (год публикации - 2019)

5. Усиление генерации второй оптической гармоники в слоистых металлорганический кристаллах за счет наночастиц кремния Second harmonic generation enhancement of 2D metalorganic framework using silicon nanoparticles IOP Journal of Physics: Conference Series, - (год публикации - 2019)

6. - New entrant in phototherapy: Nanoparticles for stimulating and monitoring the heating processes in living cells Biophotonics.World, - (год публикации - )

7. - Научно-образовательная школа-конференция Сириус. Образовательный центр, - (год публикации - )

8. - Лекции, круглые столы и собственный хакатон: какой была вторая школа-конференция по фотонике, радиофизике и нанотехнологиям ITMO News, - (год публикации - )


Возможность практического использования результатов
Результаты проекта, особенно «концепт гибридной нанополости как универсально оптического визуализатора и модулятора конформационных изменений высокомолекулярных соединений» и «фото/термо стимулированное разрушение оболочек капсул в клеточных культурах и высвобождение загруженных в капсулу лекарственных препаратов», объективно имеют патентную силу и демонстрируют потенциал для прямого использования в сенсорных устройствах нового поколения, а также элементах таргетной доставки лекарств с удаленным контролем.