КАРТОЧКА ПРОЕКТА,
ПОДДЕРЖАННОГО РОССИЙСКИМ НАУЧНЫМ ФОНДОМ

Информация подготовлена на основании данных из Информационно-аналитической системы РНФ, содержательная часть представлена в авторской редакции. Все права принадлежат авторам, использование или перепечатка материалов допустима только с предварительного согласия авторов.

 

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ


Номер 17-75-20054

НазваниеКонструирование поливалентной вакцины против ОРВИ различной этиологии

РуководительИсакова-Сивак Ирина Николаевна, Доктор биологических наук

Организация финансирования, регионфедеральное государственное бюджетное научное учреждение "Институт экспериментальной медицины", г Санкт-Петербург

Срок выполнения при поддержке РНФ 07.2017 - 06.2020 

КонкурсКонкурс 2017 года по мероприятию «Проведение исследований научными группами под руководством молодых ученых» Президентской программы исследовательских проектов, реализуемых ведущими учеными, в том числе молодыми учеными

Область знания, основной код классификатора 05 - Фундаментальные исследования для медицины, 05-403 - Медицинская микробиология и вирусология

Ключевые словаВекторные вакцины, острые респираторные вирусные инфекции, вирус гриппа, генная инженерия, живая гриппозная вакцина, иммунный ответ

Код ГРНТИ62.37.35


СтатусУспешно завершен


 

ИНФОРМАЦИЯ ИЗ ЗАЯВКИ


Аннотация
Острые респираторные вирусные инфекции (ОРВИ) являются наиболее распространенной группой острых инфекционных заболеваний, возбудители которых проникают в организм через дыхательные пути и репродуцируются преимущественно в клетках слизистых оболочек респираторной системы. Ежегодно (по данным ВОЗ) инфекционными болезнями в мире заболевают 40 млн человек, из них 90% приходится на грипп и ОРВИ. К наиболее важным возбудителям ОРВИ относятся респираторно-синцитиальный вирус (RSV), грипп A и B, вирусы парагриппа 1-4 типов, аденовирусы, метапневмовирус человека (hMPV) риновирусы и коронавирусы. Ежегодные вспышки ОРВИ среди детей и пожилых лиц, а также людей с иммунодефицитами, наносят ощутимый социально-экономический ущерб всем странам мира, как развитым, так и развивающимся. На сегодняшний день против большинства возбудителей ОРВИ (кроме вирусов гриппа) не существует доступных и эффективных специфических лечебных и профилактических препаратов, способных существенно снизить заболеваемость и тяжелые последствия инфекций. Мировое научное сообщество сходится во мнении, что существенно снизить ущерб от ежегодных вспышек ОРВИ можно посредством своевременной вакцинации детей раннего возраста, а также лиц из групп риска. В настоящее время существует большое разнообразие вакцин против вирусов гриппа А и В, однако по различным причинам до сих пор не лицензированы вакцины против других респираторных инфекций, главным образом из-за неудачных попыток использования классических подходов конструирования вакцин (создание цельновирионных инактивированных или живых аттенуированных вакцин). С бурным развитием генно-инженерных технологий, а также с появлением новых знаний об особенностях иммунного ответа организма на введение инфекционного агента, акцент стал смещаться в сторону использования ключевых белков патогенов для целенаправленной иммунизации, при этом наиболее оптимальным способом презентации нужного антигена клеткам иммунной системы является использование вирусных векторов. Для вирусов-возбудителей ОРВИ наиболее адекватной векторной системой доставки антигенов в клетки-мишени являются аттенуированные вирусы гриппа, широко применяемые в качестве живых гриппозных вакцин (ЖГВ), поскольку основной механизм защиты, формируемый ЖГВ – образование мукозального иммунного ответа в верхних дыхательных путях, т.е. во входных воротах всех респираторных инфекций. Таким образом, основной целью настоящего проекта является конструирование поливалентных векторных, способных обеспечить комбинированную защиту против широкого круга возбудителей ОРВИ, используя в качестве вирусного вектора вакцинные штаммы ЖГВ. Научная новизна заявляемого проекта состоит в использовании новой векторной системы доставки чужеродных вирусных антигенов в клетки-мишени посредством хорошо изученных аттенуированных холодоадаптированных вирусов гриппа, успешно применяемых в качестве живой гриппозной вакцины уже более 30 лет. Использование вирусов гриппа как векторов имеет ряд преимуществ перед другими вирусами. Во-первых, вирус гриппа имеет РНК-геном, и в процессе его репликации не происходит стадии синтеза ДНК (у вируса есть своя РНК-зависимая РНК полимераза), соответственно, исключен риск встраивания вирусных генов в геном клетки-хозяина. Во-вторых, РНК-геном вируса гриппа является мощным индуктором врожденного иммунитета, способен стимулировать RIG-I и вызывать продукцию IFN-β. В-третьих, вирус гриппа, использованный как вирусный вектор, может способствовать развитию мощного гуморального и клеточного иммунитета после вакцинации. Несомненным преимуществом векторных вакцин на основе аттенуированных вирусов гриппа является легкий и безболезненный интраназальный путь введения – распылением в нос. Кроме того, антигенными свойствами вируса гриппа достаточно легко манипулировать, тем самым решая проблему предсуществующего иммунитета у ранее привитых людей. Благодаря уникальной высокой антигенной изменчивости и особенностям эпидемиологии вируса гриппа А, существует возможность создавать высокоиммуногенные векторные конструкции на основе ЖГВ, которые будут стимулировать как иммунитет к целевому антигену, так и поддерживать иммунологическую память к высококонсервативным антигенам вируса гриппа А. В настоящее время существует налаженное производство ЖГВ как в России, так и в зарубежных странах, а также очень хорошо отработаны ежегодные кампании по вакцинации населения. Включение в состав такой вакцины иммуногенных компонентов других возбудителей ОРВИ позволит проводить сочетанную иммунизацию против ОРВИ различной этиологии, при этом не требуя дополнительных затрат на производство вакцины, а также, не внося изменений в загруженный прививочный календарь.

Ожидаемые результаты
По результатам проекта планируется создание ряда уникальных поливалентных векторных вакцин против ОРВИ различной этиологии, не имеющих аналогов ни в России, ни за рубежом. Научное значение разработки заключается в простом факте объединения в едином вакцинном препарате факторов профилактики инфекционной патологии, вызываемой различными респираторными вирусами. Поскольку в качестве вирусного вектора будут использованные штаммы живой гриппозной вакцины, ожидается, что сконструированные поливалентные вакцины будут формировать комплексный защитный иммунитет на слизистых верхних дыхательных путей, т.е. во входных воротах инфекции. При выполнении проекта будут использоваться самые современные вирусологические, генно-инженерные, иммунологические, биохимические и биоинформационные методы, соответствующие самому высокому международному уровню. Вакцинные препараты, полученные и изученные в ходе выполнения проекта, могут быть широко применены на практике при сочетанной иммунизации против широкого круга возбудителей острых респираторных вирусных инфекций, которым наиболее подвержены дети и пожилые люди. Вакцинация детей поливалентными вакцинными препаратами позволит облегчить прививочный календарь и позволит упростить вакцинацию детей, поскольку вакцина вводится интраназально. Кроме того, создание вакцинных препаратов, сочетающих в себе профилактику гриппа и других респираторных вирусных инфекций, позволит значительно снизить расходы на производство вакцины и на проведение кампаний по вакцинации. Успешное завершение заявляемого проекта откроет практически безграничные перспективы для использования новой векторной системы при конструировании вакцин нового поколения против широкого спектра заболеваний как инфекционной, так и неинфекционной природы (различные вирусные, бактериальные, хламидийные инфекции, а также разные типы опухолей), для которых уже определены и изучены наиболее эффективные иммунодоминантные эпитопы для В- и Т-клеток. Последующее изучение безопасности и иммуногенности таких конструкций на животных позволит дать оценку перспективности их дальнейших доклинических и клинических испытаний в сотрудничестве с профильными научными центрами.


 

ОТЧЁТНЫЕ МАТЕРИАЛЫ


Аннотация результатов, полученных в 2017 году
Настоящий проект направлен на конструирование рекомбинантных векторных вакцин против широкого круга возбудителей острых респираторных заболеваний человека, используя в качестве векторной системы доставки вакцинные штаммы для живой гриппозной вакцины (ЖГВ). Отечественная ЖГВ применяется в практике здравоохранения более 30 лет и хорошо зарекомендовала себя как эффективный безвредный препарат для специфической профилактики сезонного гриппа среди различных возрастных групп. Включение в состав такой вакцины иммуногенных компонентов других возбудителей ОРВИ позволит проводить сочетанную иммунизацию против ОРВИ различной этиологии, при этом не требуя дополнительных затрат на производство вакцины, а также, не внося изменений в загруженный прививочный календарь. В ходе первого года реализации проекта был отобран оптимальный вакцинный штамм вируса гриппа, который будет далее использоваться в качестве вирусного вектора. Вакцинный вирус ЖГВ, подготовленный из штамма А/Anhui/1/2013 (H7N9) и содержащий мутации 123D/149D в молекуле НА, оказался наиболее пригодным для конструирования векторных вакцин, поскольку он обладает высоким сродством к α2,6-рецепторам человеческого типа, активно реплицируется в клетках млекопитающих, а также индуцирует мощный гуморальный иммунный ответ в экспериментах на мышах. Используя такой оптимальный вирусный вектор, будет возможно оценивать влияние встроенных чужеродных антигенов на репликативную активность, иммуногенность и защитную эффективность рекомбинантных вакцин в экспериментах на лабораторных животных. Изучение на мышах линии BALB/c полученных ранее первых векторных вакцин против респираторно-синцитиального вируса (RSV) показало, что встраивание в геном вакцинных штаммов ЖГВ Т-клеточных эпитопов М2-1 белка RSV приводит к формированию после иммунизации функционального, защитного Т-клеточного иммунитета, вне зависимости от того, в какой ген вируса гриппа встраиваются чужеродные антигены. Также было продемонстрировано, что векторная вакцина, содержащая нейтрализующий эпитоп RSV F(243-294) в молекуле НА1 вируса гриппа, была неспособна корректно экспрессировать чужеродный антиген на своей поверхности, и, как следствие – данная вакцина не защищала мышей от репликации RS вируса в легких. На следующем этапе работы планируется модифицировать данную конструкцию для оптимизации экспрессии чужеродного антигена. В первый год выполнения Проекта были отобраны наиболее перспективные участки консервативных белков различных респираторных вирусов, предназначенные для встраивания в геном вакцинного вируса гриппа подтипа H7N9. Так, в составе конструкции, разработанной для метапневмовирусов, присутствуют В-клеточные пространственные эпитопы, а также экспериментально установленный T-клеточный эпитоп, описанный для мышей гаплотипа H2-Kd. Эта кассета предназначена для присоединения к N-концу гемагглютинина вируса гриппа. Компьютерное моделирование указывает на то, что данная кассета не будут негативно сказываться на структуре и функции молекулы НА вируса гриппа. Для вируса парагриппа 3 типа созданы две кассеты: одна на основе белка HN, направленная на стимуляцию развития гуморального иммунного ответа, вторая на основе фрагмента нуклеокапсида, для стимуляции Т-клеточного ответа. Кассеты на основе коронавирусов, аденовирусов и риновирусов предназначены для стимуляции Т-клеточного иммунного ответа и подходят для встраивания в гены нейраминидазы и неструктурного белка вируса гриппа. Начата работа по конструированию химерных генов вируса гриппа, содержащих смоделированные кассеты для пяти вирусов (метапневмовирус, вирус парагриппа 3 типа, риновирусы, аденовирусы и коронавирусы), и сборке жизнеспособных рекомбинантных вирусов гриппа с целью создания уникальной коллекции векторных вакцин для комбинированной защиты от гриппа и ОРВИ различной этиологии.

 

Публикации

1. В.А. Матюшенко, И.Н. Исакова-Сивак, Т.С. Котомина, П.И. Прокопенко, Л.Г. Руденко ATTENUATED INFLUENZA VIRUS IS A PROMISING VIRAL VECTOR FOR MULTIVALENT VACCINE AGAINST ACUTE RESPIRATORY VIRAL INFECTIONS Proceedings of the 2nd International Meeting for Respiratory Pathogens, Singapore, March 6-8 2018, - (год публикации - 2018).

2. Д.А. Меженская, Т.С. Котомина, И.Н. Исакова-Сивак, В.А. Матюшенко, Д.А. Кореньков, А.С. Евсина, .М.-Ч. Ким, С.-М. Канг, Л.Г. Руденко Development of broadly-reactive influenza vaccine based on live attenuated influenza vaccine viral vector Proceedings of the 2nd International Meeting for Respiratory Pathogens, Singapore, March 6-8 2018, - (год публикации - 2018).

3. Степанова Е.А., Котомина Т.С., Матюшенко В.А., Смолоногина Т.А., Шаповалова В.С., Руденко Л.Г., Исакова-Сивак И.Н. AMINO ACID SUBSTITUTIONS N123D AND N149D IN HEMAGGLUTININ MOLECULE ENHANCE IMMUNOGENICITY OF H7N9 LIVE ATTENUATED INFLUENZA VACCINE STRAIN IN EXPERIMENT Bulletin of Experimental Biology and Medicine, - (год публикации - 2018).

4. Степанова Е.А., Меженская Д.А. Поиск иммуногенных эпитопов метапневмовируса человека для конструирования векторной вакцины на основе вируса гриппа H7N9 Материалы конференции "XXI Международная медико-биологическая конференция молодых исследователей «Фундаментальная наука и клиническая медицина — человек и его здоровье»", Санкт-Петербург 14 апреля 2018, - (год публикации - 2018).


Аннотация результатов, полученных в 2018 году
Настоящий проект направлен на конструирование рекомбинантных векторных вакцин против широкого круга возбудителей острых респираторных заболеваний человека, используя в качестве векторной системы доставки вакцинные штаммы для живой гриппозной вакцины (ЖГВ). В ходе второго года реализации проекта был подробно изучен профиль иммунного ответа полученных ранее векторных вакцин против респираторно-синцитиального вируса (RSV) при заражении мышей натуральной RS инфекцией. Было показано, что векторные вакцины, несущие CD8 Т-клеточные эпитопы RSV, полностью безопасны для лабораторных животных: в отличие от формалин-инактивированной вакцины они не вызывали вакцин-индуцированную легочную патологию при последующем заражении RSV. В отчетном периоде проведена замена гибкого линкера между нейтрализующим эпитопом RSV F(243-294) и НА1 субъединицей в химерном гене гемагглютинина с AAAPGAA на GGGGSGGGGS, в результате чего удалось детектировать вставку нейтрализующего эпитопа в сконструированной векторной вакцине методом Western Blot со специфическим антителом Паливизумаб. Установлено, что модификация конструкции не повлияла на генетическую стабильность RSV вставки в составе векторной вакцины, а также на основные вирусологические и иммунологические характеристики свойства векторной вакцины в системах in vitro и in vivo. На следующем этапе планируется исследовать противовирусную активность, иммуногенность и безопасность данной векторной вакцины в отношении RSV. В отчетный период сконструирована панель рекомбинантных векторных вакцин на основе аттенуированного вируса гриппа, направленных на индукцию либо антительного иммунного ответа к целевым антигенам, либо Т-клеточного иммунного ответа к целевым эпитопам возбудителей ОРВИ. К первой группе относятся вакцинные вирусы против респираторно-синцитиального вируса (RSV) и метапневмовируса человека (hMPV). Ко второй группе относится панель рекомбинантных вирусов гриппа, содержащих вставки иммуногенных фрагментов аденовируса, коронавируса и риновируса, закодированные либо в гене нейраминидазы (NA), либо в гене неструктурного белка NS1 вируса гриппа. Всестороннее изучение сконструированных химерных вирусов гриппа, несущих целевые антигены различных респираторных вирусов, показало, что вирусы активно реплицировались в системе in vitro (развивающиеся куриные эмбрионы, культура клеток MDCK), при этом сохраняя наиболее важный признак аттенуированных вирусов гриппа – температурочувствительный фенотип. Как следствие, векторные вакцины были неспособны активно размножаться в нижних отделах респираторного тракта мышей, указывая на аттенуированный фенотип всех вирусов. Все векторные вакцины сохраняли высокую степень иммуногенности в отношении вируса гриппа, зачастую превосходя по этому показателю классический вакцинный штамм ЖГВ, использованный в качестве вирусного вектора. Наиболее важным результатом данного раздела работы является доказанная способность векторных вакцин индуцировать функциональный Т-клеточный иммунный ответ к эпитопам респираторных вирусов, закодированных в геноме химерных вакцинных штаммов. На следующем этапе будут проводиться исследования по оценке защитного потенциала формируемого иммунного ответа к В- и Т-клеточным эпитопам возбудителей ОРВИ в отношении данных вирусов.

 

Публикации

1. Исакова-Сивак И.Н., Матюшенко В.А., Котомина Т.С., Евсина А.С., Меженская Д.А., Прокопенко П.И., Руденко Л.Г. CTL in vivo assay to assess CD8 T-cell responses to foreign CTL epitopes inserted in LAIV viral vector Proceedings of The 1st ISIRV International Influenza Vaccine Meeting - Immunulogical Assays and Correlates of Protection for Next Generation Influenza Vaccines, 31 March - 02 April 2019, Siena, Italy, Poster #4 (год публикации - 2019).

2. Котомина Т., Кореньков Д., Матюшенко В., Прокопенко П., Руденко Л., Исакова-Сивак И. Live attenuated influenza vaccine viral vector induces functional cytotoxic T-cell immune response against foreign CD8+ T-cell epitopes inserted into NA and NS1 genes using the 2A self-cleavage site. Human vaccines & immunotherapeutics, Vol.14, Issue 12. P.1-7 (год публикации - 2018).

3. Котомина Т.С., Исакова-Сивак И.Н., Матюшенко В.А., Ким К-Х., Ли Ю., Джанг Ю-Дж., Канг С-М., Руденко Л.Г. Recombinant live attenuated influenza vaccine viruses carrying CD8 T-cell epitopes of respiratory syncytial virus protect mice against both pathogens without inflammatory disease Antiviral Research, Volume 168, Pages 9-17 (год публикации - 2019).

4. Степанова Е.А., Исакова-Сивак И.Н. ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ РАСЧЕТ КАССЕТЫ, СОДЕРЖАЩЕЙ ИММУНОГЕННЫЕ ФРАГМЕНТЫ КОРОНАВИРУСОВ ЧЕЛОВЕКА, ДЛЯ СОЗДАНИЯ ВЕКТОРНОЙ ВАКЦИНЫ НА ОСНОВЕ ХОЛОДОАДАПТИРОВАННОГО ШТАММА ВИРУСА ГРИППА СБОРНИК ТРУДОВ Международной научно-практической конференции «МОЛЕКУЛЯРНАЯ ДИАГНОСТИКА 2018» (Минск, 27–28 сентября 2018 г.) под редакцией академика РАН В.И. Покровского, С. 155-156 (год публикации - 2018).

5. Степанова Е.А., Исакова-Сивак И.Н., Руденко Л.Г. Overview of human rhinovirus immunogenic epitopes for rational vaccine design Expert Review of Vaccines, - (год публикации - 2019).

6. Т. Котомина, И. Исакова-Сивак, Д. Кореньков, Е. Степанова, П. Прокопенко, К.-Х. Ким, Ю. Ли, С.-М. Канг, Л. Руденко Live attenuated influenza vaccine viral vector carrying CD8+ T-cell epitopes of respiratory syncytial virus is safe and protects mice against RSV Proceedings of "Influenza 2018" conference, 04-06 September 2018, Oxford UK, Page 12 (год публикации - 2018).


Аннотация результатов, полученных в 2019 году
В ходе выполнения исследования в предыдущие отчетные периоды был получен набор рекомбинантных вакцинных вирусов гриппа, несущих отобранные иммуногенные эпитопы других респираторных вирусов. Условно сконструированные вакцины можно разделить на две группы вирусов: 1. рекомбинантные вакцинные штаммы вируса гриппа, несущие на N-конце субъединицы НА1 молекулы гемагглютинина В-клеточные эпитопы других респираторных вирусов. Такие структурные фрагменты были разработаны для трех вирусов – 1) респираторно-синцитиальный вирус (RSV), 2) метапневмовирус, 3) вирус парагриппа 3 типа (PIV3). 2. рекомбинантные вирусы гриппа, несущие Т-клеточные эпитопы других вирусов, закодированные в генах нейраминидазы (полноразмерная NA) и неструктурного белка NS1 (укорочен до 126 а.к.). Такие химерные штаммы были разработаны для четырех групп респираторных вирусов – 1) RSV, 2) аденовирусы, 3) коронавирусы (сезонные), 4) риновирусы. В течение третьего года выполнения проекта проводили детальное изучение иммуногенных и протективных свойств сконструированных вакцин, как в отношении вируса гриппа, так и в отношении патогена, чьи иммуногенные участки были встроены в химерный вакцинный вирус. Что касается противогриппозного иммунитета, все без исключения вакцинные варианты сохраняли способность вызывать образование высоких показателей гуморального и Т-клеточного иммунитета к гриппу и полностью защищали животных от последующей челлендж-инфекции. Для первой группы вакцин со вставками В-клеточных кассет в молекулу гемагглютинина вируса гриппа была показана в целом слабая иммуногенность в отношении антигенов-вставок, что не обеспечивало существенной защиты животных от соответствующего респираторного вируса. Таким образом, по этой группе химерных вирусов можно заключить, что стратегия встраивания небольших В-клеточных эпитопов с N-конца молекулы гемагглютинина вируса гриппа не является оптимальной для разработки поливалентных векторных вакцин. Предполагается, что такие конструкции можно оптимизировать путем включения в химерную молекулу гемагглютинина более протяженных участков респираторных вирусов, несущих большее число В-клеточных эпитопов. Для второй группы химерных вирусов со вставками Т-клеточных эпитопов в экспериментах на животных были получены гораздо более многообещающие результаты. Так, на примере рекомбинантных вирусов гриппа, несущих консервативные иммунодоминантные Т-клеточные эпитопы RSV, была наглядно продемонстрирована способность вакцин при интраназальной вакцинации мышей вызывать индукцию высоких уровней RSV эпитоп-специфических CD8 Т-клеток. Эти Т-клетки обладали выраженной цитотоксической активностью в отношении эпитопа RSV и, как следствие, защищали иммунизированных мышей от заражения естественной RSV инфекцией, при этом не вызывая развития бронхолегочной патологии, свойственной формалин-инактивированной RSV вакцине. Кроме того, более детальное изучение Т-клеточного иммунитета, формируемого у иммунизированных мышей после двукратного введения рекомбинантных вирусов показало, что такие вакцины вызывают образование резидентных Т-клеток памяти (tissue-resident memory T cells, TRM), при этом включение иммунодоминантного CD8 Т-клеточного эпитопа RSV в состав векторной вакцины не только способствовало выработке RSV-специфичных резидентных Т-клеток памяти в легких, но и подстегивала соответствующую популяцию TRM клеток, специфичных вирусу гриппа. Также в нашем исследовании была продемонстрирована перспективность рекомбинантных вакцин, содержащих консервативные участки аденовирусов человека. В этой работе мы использовали стратегию инкорпорирования в иммуногенную кассету, содержащую консервативные человеческие эпитопы AdV, дополнительного иммунодоминантного ЦТЛ-эпитопа аденовируса, описанного для мышей линии C57BL/6. Именно для этой модели животных также была ранее разработана модель вирусной пневмонии при заражении аденовирусом 5 серотипа. Таким образом, используя эту модель, нам удалось доказать выраженную иммуногенность и защитную эффективность сконструированных рекомбинантных вакцин LAIV-AdV в отношении аденовирусной инфекции. Вакцины также вызывали образование функционального ЦТЛ-иммунного ответа, амплитуда которого коррелировала со степенью защиты от развития патологических изменений в тканях легких мышей после челленджа AdV5. Таким образом, была доказана способность векторных вакцин корректно доставлять чужеродные антигены в клетки-мишени и правильно их презентировать иммунной системе. Хотя Т-клеточный иммунитет не способен нейтрализовать вирусную инфекцию, его активация способствовала ускоренной элиминации вируса и защите легких от развития вирус-индуцированной пневмонии. В настоящем исследовании также были сконструированы комбинированные вакцинные кандидаты, несущие эпитопы трех различных вирусов ОРВИ. Учитывая также гриппозный вектор, такие вакцины потенциально могут обеспечить защиту против четырех различных инфекций.

 

Публикации

1. - Новую вакцину против гриппа и пневмонии успешно испытали на мышах Индикатор.ру, 5 июня, 15:23 (год публикации - ).

2. - В России разработали уникальную вакцину от гриппа и бронхиолита Вести, 05.06 14:45 (год публикации - ).

3. - Ученые успешно испытали новую вакцину от опасных вирусов Газета.ру, 05.06.2019 | 09:27 (год публикации - ).

4. - Петербургские ученые создали универсальную вакцину от гриппа и пневмонии 78.ru, 5 июня, 12:47 (год публикации - ).

5. - Ученые создали вакцину, одинаково эффективную в защите от гриппа и пневмонии ТАСС, 7 июня 2019 г. (год публикации - ).

6. Евсина А.С., Матюшенко В.А., Прокопенко П.И., Меженская Д.А., Котомина Т.С., Копейкин П.М., Руденко Л.Г., Исакова-Сивак И.Н. Development of a bivalent vaccine against influenza and human adenovirus infections Abstract book of the international conference "Options for the Control of Influenza X", Singapore 28.08.2019-01.09.2019, Page 136, Abstract №10846. (год публикации - 2019).

7. Исакова-Сивак И.Н., Матюшенко В.А., Степанова Е.А., Матушкина А.С., Котомина Т.С., Меженская Д.А., Прокопенко П.И., Кудрявцев И.В., Копейкин П.М., Сивак К.В., Руденко Л.Г. Recombinant Live Attenuated Influenza Vaccine Viruses Carrying Conserved T-cell Epitopes of Human Adenoviruses Induce Functional Cytotoxic T-Cell Responses and Protect Mice against Both Infections Vaccines, 8(2), 196 (год публикации - 2020).

8. Котомина Т.С., Исакова-Сивак И.Н., Матюшенко В.А., Прокопенко П.И., Донина С.А., Руденко Л.Г., Ким К.-Х., Ли Ю., Джанг Ю-Дж., Канг С.-М. Recombinant Live Attenuated Influenza Vaccine Viruses Carrying CD8 T-Cell Epitopes Of Respiratory Syncytial Virus Protect Mice Against Both Infections Without Inflammatory Disease Abstract book of the international conference "Options for the Control of Influenza X", Singapore 28.08.2019-01.09.2019, Page 352; abstract №10410 (год публикации - 2019).

9. Котомина Т.С., Исакова-Сивак И.Н., Степанова Е.А., Меженская Д.А., Матюшенко В.А., Прокопенко П.И., Сивак К.В., Киселева И.В., Руденко Л.Г. Neutralizing epitope of fusion protein of respiratory syncytial virus embedded in the HA molecule of LAIV virus is not sufficient to prevent RS virus pulmonary replication but ameliorates lung pathology following RSV infection in mice The Open Microbiology Journal, - (год публикации - 2020).

10. Котомина Т.С., Матюшенко В.А., Кудрявцев И.В., Меженская Д.А., Прокопенко П.И., Матушкина А.С., Руденко Л.Г., Исакова-Сивак И.Н. ФОРМИРОВАНИЕ РЕЗИДЕНТНЫХ Т-КЛЕТОК ПАМЯТИ У МЫШЕЙ ПРИ ВАКЦИНАЦИИ РЕКОМБИНАНТНОЙ ВЕКТОРНОЙ ВАКЦИНОЙ ДЛЯ КОМБИНИРОВАННОЙ ЗАЩИТЫ ПРОТИВ ГРИППА И РЕСПИРАТОРНО-СИНЦИТИАЛЬНОГО ВИРУСА ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ В СОВРЕМЕННОМ МИРЕ: ЭПИДЕМИОЛОГИЯ, ДИАГНОСТИКА, ЛЕЧЕНИЕ И ПРОФИЛАКТИКА, ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ В СОВРЕМЕННОМ МИРЕ: ЭПИДЕМИОЛОГИЯ, ДИАГНОСТИКА, ЛЕЧЕНИЕ И ПРОФИЛАКТИКА Сборник трудов XII Ежегодного Всероссийского интернет-конгресса по инфекционным болезням с международным участием. Под ред. В.И. Покровского. Москва, 2020. C.110. (год публикации - 2020).

11. Матюшенко В.А., Котомина Т.С., Кудрявцев И.В., Меженская Д.А., Прокопенко П.И., Матушкина А.С., Сивак К.В., Мужикян А.А., Руденко Л.Г., Исакова-Сивак И.Н. Conserved T-cell epitopes of respiratory syncytial virus (RSV) delivered by recombinant live attenuated influenza vaccine viruses efficiently induce RSV-specific lung-localized memory T cells and augment influenza-specific resident memory T-cell responses Antiviral Research, - (год публикации - 2020).

12. Прокопенко П.И., Степанова Е.А., Матюшенко В.А., Евсина А.С. Конструирование векторной вакцины против аденовируса Материалы XXI межвузовской студенческой научной конференции "Студент-Исследователь-Учитель". 2019 г., - (год публикации - 2020).

13. Степанова Е.А., Матюшенко В.А., Руденко Л.Г., Исакова-Сивак И.Н. Prospects of and Barriers to the Development of Epitope-Based Vaccines against Human Metapneumovirus Pathogens, - (год публикации - 2020).

14. Степанова Е.А., Меженская Д.А., Матюшенко В.А., Котомина Т.С., Евсина А.С., Руденко Л.Г., Исакова-Сивак И.Н. Development of a Bivalent Live Viral Vectored Vaccine against Influenza and Human Metapneumovirus Infections Abstract book of the international conference "Options for the Control of Influenza X", Singapore 28.08.2019-01.09.2019., Page 135, Poster №10530. (год публикации - 2019).