Аннотация результатов, полученных в 2021 году
В рамках выполнения проекта проведен патентный поиск, который продемонстрировал, что тема исследования является охраноспособной. Разработаны протокол исследования, информированное согласие пациента, информационный листок, базисная карта пациента и получено разрешение локального биоэтического комитета на проведение исследования. Проведено клинико-психопатологическое, психометрическое обследование 400 больных шизофренией, получающих терапию антипсихотическими препаратами. Отбор пациентов проводился сплошным методом. Ведущая клинико-психопатологическая симптоматика у больных шизофренией помимо клинического интервью и динамики симптомов в процессе терапии антипсихотиками оценивалась с помощью Шкалы позитивных и негативных синдромов (PANSS). Изучены основные социально-демографические и клинические характеристики пациентов: пол, возраст, возраст дебюта шизофрении, социальный статус и уровень образования, семейное положение, наследственная отягощенность по шизофрении; длительность болезни, частота госпитализаций, ведущий профиль шизофренической симптоматики, наличие отдельных поведенческих паттернов: суицидального, гетероагрессивного и аддиктивного (курение и злоупотребление алкоголем) поведения. Проведено генотипирование 500 образцов ДНК больных шизофренией, 400 образцов ДНК здоровых лиц русской популяции Сибирского региона по 17 полиморфным вариантам гена GRIN2A (rs9989388, rs7190619, rs8049651, rs7196095, rs9921541, rs7192557, rs9788936, rs7206256, rs11866328, rs4782039, rs1345423, rs11644461, rs11646587, rs8057394, rs1650420, rs2650427, rs1969060), 9 полиморфным вариантам гена GRIN2B (rs12300851, rs220599, rs7313149, rs12827536, rs10772715, rs10845838, rs1805481, rs2192970, rs2300242) на секвеноме MassARRAY® Analyzer 4 (Agena Bioscience™) с использованием наборов SEQUENOM Consumablesi PLEXGold 384; на амплификаторах StepOnePlus TM Real-Time PCR System и Applied Biosystems™ QuantStudio™ 5 Real-Time PCR System (Applied Biosystems, США) с использованием наборов TaqMan1 Validated SNP Genotyping Assay (Applied Biosystems, США). Относительными факторами риска развития шизофрении являются: GRIN2A rs1650420*GG (OR=1,672; 95% CI: 1,003 – 2,787; р = 0,025), GRIN2A rs4782039*А (OR=1,526; 95% CI: 1,066 – 2,187; р = 0,021), GRIN2B rs10845838*GG (OR=1,690; 95% CI: 1,024 – 2,791; р = 0,021); GRIN2B rs12827536*GG/G (OR=2,179; 95% CI: 1,212 – 3,918; р = 0,029 для генотипа GG и OR=1,505; 95% CI: 1,069 – 2,118; р = 0,019 для аллеля G), GRIN2B rs2300242* ТТ (OR=3,015; 95% CI: 1,660 – 5,475; р = 0,045), GRIN2B rs1805481*АА (OR=1,947; 95% CI: 1,032 – 3,675; р = 0,036). Ранний возраст начала шизофрении рассматривается как фактор риска более тяжелого течения болезни. При сравнении групп пациентов с «ранним» (до 18 лет) и «взрослым» (18 лет и старше) возрастом начала шизофрении выявлены ассоциации GRIN2A rs7206256*A (OR=1,599; 95% CI: 1,078 – 2,372; p = 0,020), GRIN2A rs1164446*GG/G (OR=2,312; 95% CI: 1,203 – 4,443; p = 0,034 для генотипов; OR=1,505; 95% CI: 1,0413 – 2,176; p = 0,030 для аллелей) и GRIN2B rs7313149*A (OR=1,667; 95% CI: 1,002 – 2,775; p = 0,048) с «ранним» возрастом начала шизофрении. Полученные данные опубликованы в журнале Life (Q1 Web of Science, Scopus) в статье «Study of early onset schizophrenia: associations of GRIN2A and GRIN2B polymorphisms». Получены новые пилотные данные об ассоциации GRIN2A rs9788936*А с ведущей негативной симптоматикой шизофрении (OR=1,498; 95% CI: 1,034 – 2,169; р = 0,032). Анализ частоты генотипов и аллелей полиморфных вариантов GRIN2B не выявил «локусов-модификаторов» в отношении ведущей позитивной или негативной симптоматики шизофрении. Исследование полиморфных вариантов GRIN2A и GRIN2B не показало их роли в развитии шизофрении с непрерывным или эпизодическим типом течения. В группе больных шизофренией, злоупотребляющих алкоголем, чаще встречаются носители GRIN2A rs11866328*C (OR=1,72; p<0,001), GRIN2A rs9788936*А (OR=2,15; p=0,04), GRIN2B rs10845838*G (OR=1,64; p=0,04). При сравнении групп курящих и некурящих пациентов с шизофренией обнаружена ассоциация GRIN2A rs7190619*G с употреблением никотина (OR= 2,05; p=0,03). Установлено, что GRIN2A rs11866328 вносит значительный вклад (р=0,026) в формирование суицидального риска у больных шизофренией. Частотный анализ в группах больных шизофренией с гетероагрессивным поведением и без него показал статистически значимые различия в распределении аллелей полиморфизма rs7190619 гена GRIN2A (p=0,02). Пациенты с гетероагрессивным поведением в анамнезе чаще были носителями аллеля G (OR=2,49). Опубликована статья в журнале Life (Q1 Web of Science, Scopus); принята в печать статья в журнале «Сибирский психологический журнал» (Web of Science, Scopus, РИНЦ), опубликованы тезисы Всемирного конгресса по психиатрической генетике (VIRTUAL World Congress of Psychiatric Genetics (WCPG), October 11-15, 2021) в журнале European Neuropsychopharmacology (Q1 Web of Science, Scopus); опубликованы тезисы научно-практической конференции «Психотерапия и психосоциальная работа в психиатрии», Санкт-Петербург 24-25 июня 2021 года) (РИНЦ); приняты в печать 2 тезиса на 34th ECNP Congress, материалы которого опубликуются в журнале European Neuropsychopharmacology (Q1 Web of Science, Scopus) 1 января 2022 г. Полученные результаты представлены в виде стендовых докладов на конференциях различного уровня: 1. Представлены материалы на научно-практической конференции «Психотерапия и психосоциальная работа в психиатрии» (Санкт-Петербург, 24-25 июня 2021 года), опубликованы тезисы доклада «Предпочтения врачей-психиатров при выборе класса антипсихотической терапии с целью редукции позитивных симптомов» (Корнетова Е.Г., Герасимова В.И., Федоренко О.Ю.). 2. E-poster TH.85 «Association of the GRIN2B gene with schizophrenia in the Russian population of the Siberian region», авторы: E.G. Poltavskaya, O.Yu. Fedorenko, E.G. Kornetova, S.A. Ivanova на Всемирном конгрессе по психиатрической генетике (VIRTUAL World Congress of Psychiatric Genetics (WCPG), October 11-15, 2021), опубликованы тезисы доклада в журнале European Neuropsychopharmacology (Q1 Web of Science, Scopus). 3. E-poster P.0471 «Relationship between antipsychotic therapy and the severity of negative symptoms in inpatients with schizophrenia», авторы: V. Gerasimova, E. Kornetova, O. Fedorenko, S. Ivanova на 34th ECNP Congress Hybrid, Lisbon, Portugal, 2-5 October 2021. 4. E-poster P.0880 «Polymorphism of GRIN2A gene and schizophrenia in the Siberian region», авторы: E.G. Poltavskaya, O.Yu. Fedorenko, E.G. Kornetova на 34th ECNP Congress Hybrid, Lisbon, Portugal, 2-5 October 2021.

Аннотация результатов, полученных в 2022 году
В рамках выполнения проекта проведено клинико-психопатологическое, нейропсихологическое, психометрическое обследование 150 больных шизофренией с выделением ведущей симптоматики и когнитивных нарушений. Ведущая клинико-психопатологическая симптоматика у больных шизофренией помимо клинического интервью и динамики симптомов в процессе терапии антипсихотиками оценивалась с помощью PANSS. Изучены основные социально-демографические и клинические характеристики пациентов: пол, возраст, возраст дебюта шизофрении, социальный статус и уровень образования, семейное положение, наследственная отягощенность по шизофрении; длительность болезни, частота госпитализаций, ведущий профиль шизофренической симптоматики, наличие отдельных поведенческих паттернов: суицидального, гетероагрессивного и аддиктивного поведения. Проведено нейропсихологическое обследование больных шизофренией с использованием шкалы «Краткая оценка когнитивных функций у пациентов с шизофренией» (BACS). С помощью кластерного анализа методом K-средних выделены три кластера нейрокогнитивного дефицита, отличающихся между собой клинической выраженностью: 1) легкий, 2) умеренно выраженный, 3) выраженный. У всех пациентов проводилась комплексная оценка побочных эффектов антипсихотической терапии. Основные двигательные нарушения, такие как тардивная дискинезия и акатизия регистрировались с помощью шкалы патологических непроизвольных движений AIMS и шкалы акатизии Барнса (BARS, BAS) соответственно. Пролактин и глутамат в сыворотке крови измеряли иммуноферментным методом. Гиперпролактинемия диагностировалась при уровне пролактина выше 25 нг/мл у женщин и 20 нг/мл – у мужчин. Сформирована группа контроля из 420 здоровых добровольцев, стандартизированных по полу и возрасту по отношению к основной группе. Прогенотипировано 900 образцов ДНК больных шизофренией, 420 образцов ДНК здоровых лиц русской популяции Сибирского региона по вариантам генов GRIK4, SLC1A2, SLC17A7, GRM3, GRM7, GRM8. Прогенотипировано 400 образцов ДНК больных шизофренией, обследованных в 2021-2022 гг. по вариантам генов GRIN2A, GRIN2B. Генотипирование проводили на секвеноме MassARRAY® Analyzer 4 (Agena Bioscience™) с использованием наборов SEQUENOM Consumablesi PLEXGold 384. Уровень значимости р<0,05. Выявлены относительные факторы риска развития шизофрении: GRIN2A rs7190619*GG, GRIN2A rs7190619*G, SLC1A2 rs12361171*АА, SLC1A2 rs12361171*А, GRM3 rs2299225*G, GRM7 rs1396409*G. У больных шизофренией носителей GRIN2A rs9788936*СС выявлена высокая концентрация глутамата в сыворотке крови по сравнению с носителями генотипов ТС и ТТ. Пациенты носители GRIN2B rs1805481*СА отличались более высокой концентрацией глутамата по сравнению с носителями генотипа СС. В группе с ранним дебютом заболевания до 18 лет обнаружена статистически более высокая частота GRM3 rs2299225*ТТ/Т, GRM7 rs12491620*СС/С. Эти варианты можно рассматривать как относительные факторы риска раннего начала и более неблагоприятного течения шизофрении. Стабильная негативная симптоматика и непрерывный характер течения заболевания связаны с более высокой степенью прогрессирования шизофрении. Относительными факторами риска развития ведущей негативной симптоматики у больных шизофренией является носительство GRIN2A rs7206256*АА, SLC1A2 rs10742338*С, SLC1A2 rs7936950*С. Показана ассоциация непрерывного характера течения шизофрении с GRIN2A rs11644461*С, GRIN2A rs8057394*G, GRIN2B rs7313149*С, SLC1A2 rs1042113*СТ/С и, SLC1A2 rs12294045*СТ. Проведено сравнение распределений частот аллелей и генотипов исследуемых генов между больными шизофренией в зависимости от сопутствующих поведенческих паттернов. Выявлена ассоциация GRM7 rs779746*Т со злоупотреблением алкоголем. Обнаружена ассоциация SLC1A2 rs1042113*Т, SLC1A2 rs10742338*Т и rs7936950*С, GRM8 rs2299472*С со злоупотреблением табака. Полиморфные варианты SLC1A2 rs3812778*А и GRM7 rs12491620*С предрасполагали к совершению суицидальных попыток. Получены новые данные об ассоциации изучаемых полиморфных вариантов генов с нейрокогнитивными нарушениями при шизофрении. На основании кластеризации когнитивных нарушений пациенты были объединены в 3 группы в зависимости от варианта нейрокогнитивного дефицита. Анализ по трем генотипам выявил значимые ассоциации в двух кластерах (легкий и умеренно выраженный против выраженного нейрокогнитивного дефицита) для GRIN2B, GRIN2A и GRM8. Из трех вариантов GRIN2B (rs10772715, rs12827536, rs220599) только один rs12827536 оставался значимым при анализе рецессивной /доминантной модели, как и GRIN2A rs9788936. Результаты для GRM8 rs2237748, rs2299472 оставались значимыми (р=0,001) после анализа рецессивной/доминантной модели. После применения коррекции на частоту ложных открытий (FDR), только GRM8 rs2237748*CC и rs2299472*CC оставались значимо ассоциированными с более высокой частотой нейрокогнитивных нарушений. При анализе результатов для GRM8 отдельно у мужчин и женщин, эффект оставался значимым в каждой группе для rs2299472 и rs2237748. Дальнейшее исследование связи с отдельными когнитивными доменами для GRM8 показало, что ассоциации достигают значимых значений только для rs2299472 с кодированием символов и тестом «Башня Лондона». Эти когнитивные функции связаны с вниманием и исполнительной функцией мышления в проблемно-решающем поведении соответственно. GRIN2A rs9788936 был значимо связан с кодированием символов и слухоречевой памятью, тогда как GRIN2B rs12827536 был значимо связан только с моторными навыками, оценивающим реципрокную координацию движений. В результате ассоциативного анализа получены значимые результаты между общей тардивной дискинезией и GRIN2A rs8057394*GC, GRIN2B rs10772715*GА, GRIN2B rs7313149*ТС, SLC1A2 rs1042113*СС/С, SLC1A2 rs10768121*А, SLC1A2 rs12361171*Т, SLC1A2 rs3812778*АА/А, GRM3 rs1468412*TT/T, GRM3 rs2237562*ТС/СС/С. Установлена значимая ассоциация между тороколюмбальной тардивной дискинезией и GRIN2A rs7192557*А. Применение логистической регрессии и поправки Бонферрони на множественное сравнение позволило обнаружить гаплотип риска развития тардивной дискинезии, состоящий из аллелей CAT вариантов SLC1A2 rs1042113 rs10768121 и rs12361171. Относительными факторами риска развития антипсихотик-индуцированной гиперпролактинемии являются GRIN2A rs9788936*TT/T, GRM7 rs12491620*G. Опубликована статья в журнале «Diagnostics» (Web of Science, Scopus, Q2); статья в журнале «Бюллетень Сибирской медицины» (Web of Science, Scopus, RSCI); принята в печать статья в журнал «Молекулярная биология» (Web of Science, Scopus, RSCI); опубликованы две статьи в журнале «Медицинская генетика» (RSCI); две статьи в журнале «Психиатрия» (Scopus); статья в журнале «Актуальные вопросы психиатрии и наркологии»; опубликованы два тезиса 34th ECNP Congress в журнале «European Neuropsychopharmacology» (Q1 Web of Science, Scopus); тезисы в сборнике тезисов Всероссийского конгресса с международным участием «Психоневрология: Век XIX – Век XXI», г. Санкт-Петербург; статья в сборнике материалов конгресса молодых ученых «Актуальные вопросы фундаментальной и клинической медицины», г. Томск. Полученные результаты представлены на Всероссийском конгрессе с международным участием «Психоневрология: Век XIX – Век XXI», Санкт-Петербург; 7-й Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Психическое здоровье человека и общества. Актуальные междисциплинарные проблемы и возможные пути решения», Москва; 5-я Костромской Всероссийской школе молодых ученых и специалистов в области психического здоровья «Биологическая парадигма клиники психических расстройств», Кострома; Конгрессе молодых ученых «Актуальные вопросы фундаментальной и клинической медицины», г. Томск; Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Психиатрическая генетика: современные возможности и перспективы трансляции в клиническую практику», г. Санкт-Петербург.

Аннотация результатов, полученных в 2023 году
В рамках выполнения проекта проведено клинико-психопатологическое, нейропсихологическое, психометрическое обследование 50 больных шизофренией с выделением ведущей симптоматики и когнитивных нарушений. Ведущая клинико-психопатологическая симптоматика у больных шизофренией помимо клинического интервью и динамики симптомов в процессе терапии антипсихотиками оценивалась с помощью PANSS. Изучены основные социально-демографические и клинические характеристики пациентов. Проведено нейропсихологическое обследование больных шизофренией с использованием шкалы «Краткая оценка когнитивных функций у пациентов с шизофренией» (BACS). С помощью кластерного анализа методом K-средних выделены три кластера нейрокогнитивного дефицита, отличающихся между собой клинической выраженностью: 1) легкий, 2) умеренно выраженный, 3) выраженный. У всех пациентов проводилась комплексная оценка побочных эффектов антипсихотической терапии. Двигательные нарушения тардивную дискинезию и акатизию регистрировали с помощью шкалы патологических непроизвольных движений AIMS и шкалы акатизии Барнса (BARS, BAS). Пролактин и глутамат в сыворотке крови измеряли иммуноферментным методом. Гиперпролактинемия диагностировалась при уровне пролактина выше 25 нг/мл у женщин и 20 нг/мл – у мужчин. Для верификации метаболического синдрома (МС) проводились измерения артериального давления, окружности талии, определение биохимических показателей (уровень глюкозы, триацилглицеридов, липопротеидов высокой плотности). Общую группу больных шизофренией составили 900 человек, контрольную – 420 здоровых лиц русской популяции Сибирского региона, у которых выполнено генотипирование образцов ДНК по вариантам GRIN2A, GRIN2B, GRIK4, GRM3, GRM7, GRM8, SLC1A2, SLC17A7 на секвеноме MassARRAY® Analyzer 4 (Agena Bioscience™). Исследован уровень метилирования сайтов CpG в промоторах 11 генов: GRIA3, GRIN2A, GRIN2B, GRM2, GRM3, GRM7, GRM8, SLC17A7, SLC1A1, SLC1A2 и SLC38A7 у 37 больных шизофренией и 18 здоровых лиц методом таргетного бисульфитного массового параллельного секвенирования на приборе MiSeq (Illumina, США). На основании кластеризации когнитивных нарушений пациенты (n=250) объединены в 3 группы в зависимости от варианта нейрокогнитивного дефицита. Выявлены значимые ассоциации в двух кластерах (легкий и умеренно выраженный против выраженного нейрокогнитивного дефицита) для GRIN2B, GRIN2A и GRM8. Из трех вариантов GRIN2B (rs10772715, rs12827536, rs220599) только один rs12827536 оставался значимым при анализе рецессивной /доминантной модели, как и GRIN2A rs9788936, GRM8 rs2237748, rs2299472. После применения коррекции на частоту ложных открытий (FDR), только GRM8 rs2237748*CC и rs2299472*CC оставались значимо ассоциированными с более высокой частотой нейрокогнитивных нарушений. Дальнейшее исследование связи с отдельными когнитивными доменами для GRM8 показало, что ассоциации достигают значимых значений только для rs2299472 с кодированием символов и тестом «Башня Лондона». Эти когнитивные функции связаны с вниманием и исполнительной функцией мышления в проблемно-решающем поведении соответственно. GRIN2A rs9788936 был значимо связан с кодированием символов и слухоречевой памятью, тогда как GRIN2B rs12827536 был значимо связан только с моторными навыками, оценивающим реципрокную координацию движений. Получены новые данные об ассоциации изучаемых полиморфных вариантов генов с МС и его компонентами (концентрация глюкозы, триглицеридов, липопротеинов высокой плотности (ЛПВП) в сыворотке крови, повышенное артериальное давление (АД)) при шизофрении (n=517). Относительными факторами риска развития МС у больных шизофренией являются SLC1A2 rs12294045* СС/С; повышения концентрации глюкозы - SLC1A2 rs10768121*CA, rs11033046*AT, rs3088168*ТС, rs12294045*С, GRM3 rs2237562*СС и rs2299225*GT; повышения концентрации триглицеридов - GRIN2A rs11866328*GT, rs7206256*AG; снижения концентрации ЛПВП - GRIN2A rs11866328*GT и GRIK4 rs1954787*CC; повышения АД - GRIN2B rs12827536*ТТ. Получены новые данные об ассоциации изучаемых полиморфных вариантов генов с акатизией у больных шизофренией (n=285). Объективная акатизия чаще встречалась у носителей GRIN2A rs11644461*CC/С, GRIN2A rs11866328* ТТ/Т, GRIN2A rs1345423*G, GRIN2A rs7206256*A, GRIN2B rs12300851*С, GRIN2B rs220599* G; общеклиническая акатизия - у носителей GRIN2A rs11866328*ТТ/Т. Получены новые данные об уровне метилирования сайтов CpG в промоторах большего количества генов (11), чем заявлено в гранте (8), а именно: GRIA3, GRIN2A, GRIN2B, GRM2, GRM3, GRM7, GRM8, SLC17A7, SLC1A1, SLC1A2 и SLC38A7 у больных шизофренией (n=37) и здоровых лиц (n=18) русской популяции Сибирского региона. Уровень метилирования гена GRM2 значимо повышен в группе с непрерывным течением шизофрении по сравнению с группой пациентов с эпизодическим течением. Уровень метилирования гена GRIA3 был значимо повышен при непрерывном типе течения шизофрении по сравнению с эпизодическим типом течения у мужчин, но не у женщин. Выявлена значимая корреляция с возрастом манифестации заболевания для уровня метилирования одного из регионов гена GRM8. Уровень метилирования генов GRIN2A и GRM2 был значимо выше при ведущей негативной симптоматике по сравнению с позитивной симптоматикой. В контрольной группе значимая корреляция с возрастом индивидов обнаружена для уровня метилирования генов GRIN2A, GRM2 и GRM3, а в группе больных шизофренией - GRM2 и SLC1A2, то есть уровень метилирования гена GRM2 значимо повышался с возрастом индивидов в обеих группах. Обнаружена значимая корреляция уровня метилирования генов GRIN2A и GRM2 с длительностью заболевания в общей группе и GRIA3 – в группе мужчин больных шизофренией. В группе с нейрокогнитивным дефицитом был значимо снижен уровень метилирования генов GRM2 и GRM3. В группе с выраженным эффектом терапии был значимо ниже уровень метилирования генов GRM2, GRM3, GRM7 и SLC1A2 и в группе мужчин - гена GRIA3. В группе с акатизией значимо снижен уровень метилирования генов GRM8 и SLC1A2 и повышен уровень метилирования гена SLC17A7 по сравнению с пациентами без акатизии. Уровень метилирования гена GRM8 был значимо выше в группе больных с метаболическим синдромом по сравнению с пациентами без него. Опубликована статья в журнале Genes (Q2 Web of Science, Scopus); статья в журнале Personalized Psychiatry and Neurology (РИНЦ); опубликованы тезисы 14-й международной школы молодых ученых «Системная биология и биоинформатика (SBB-2023)» (22–26 мая 2023, г. Новосибирск); тезисы XIX Международного междисциплинарного конгресса «Нейронаука для медицины и психологии» (4–10 июня 2023, г. Судак); 2 тезисов XVI Всероссийской школы молодых психиатров (13–17 апреля 2023, г. Суздаль); 3 тезисов V Российской конференции с международным участием «Современные проблемы биологической психиатрии и наркологии» (17–18 мая 2023, г. Томск). Разработана новая медицинская технология «Технология поддержки принятия решения для назначения антипсихотической фармакотерапии с учетом риска развития тардивной дискинезии у больных шизофренией». Разработана программа для ЭВМ «Программа поддержки принятия врачебных решений выбора антипсихотической терапии для лечения больных шизофренией с учётом риска развития тардивной дискинезии» (свидетельство RU 2023682918). Полученные результаты представлены на расширенном заседании экспертного совета Российского научного фонда по генетическим исследованиям, Москва; Всероссийском конгрессе с международным участием «Нейропсихиатрия в трансдисциплинарном пространстве: от фундаментальных исследований к клинической практике», Санкт-Петербург; V Российской конференции с международным участием «Современные проблемы биологической психиатрии и наркологии», Томск; 14-й международной школе молодых ученых «Системная биология и биоинформатика (SBB-2023)», Новосибирск.