КАРТОЧКА ПРОЕКТА ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ И ПОИСКОВЫХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ,
ПОДДЕРЖАННОГО РОССИЙСКИМ НАУЧНЫМ ФОНДОМ

Информация подготовлена на основании данных из Информационно-аналитической системы РНФ, содержательная часть представлена в авторской редакции. Все права принадлежат авторам, использование или перепечатка материалов допустима только с предварительного согласия авторов.

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ

Номер 21-73-10046

НазваниеРазработка методов определения концентрации цитостатических препаратов в биологических жидкостях и системах контролируемого высвобождения

РуководительГорячева Ольга Алексеевна, кандидат наук (признаваемый в РФ PhD)

Организация финансирования, регион федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Саратовский национальный исследовательский государственный университет имени Н.Г. Чернышевского", Саратовская обл

Период выполнения при поддержке РНФ

07.2021 - 06.2024

Конкурс№61 - Конкурс 2021 года «Проведение исследований научными группами под руководством молодых ученых» Президентской программы исследовательских проектов, реализуемых ведущими учеными, в том числе молодыми учеными.

Область знания, основной код классификатора 03 - Химия и науки о материалах, 03-205 - Аналитическая химия

Ключевые словаЦитостатические препараты, митоксантрон, аналитическая химия, флуоресцентные квантовые точки, контролируемое высвобождение, микрокапсулы, тушение флуоресценции, биожидкости, биоанализ

Код ГРНТИ31.19.00

ИНФОРМАЦИЯ ИЗ ЗАЯВКИ

Аннотация
Проект направлен на решение фундаментальной научной проблемы связанной с развитием подходов к определению концентрации цитостатических препаратов в биологических объектах для обоснованного применения систем контролируемого пролонгированного высвобождения цитостатиков при химиотерапии злокачественных новообразований. По данным Международного агентства по изучению рака (International Agency for Research on Cancer, press-release 292, December 15, 2020) в 2020 году в 185 странах число новых случаев заболевания рака возросло до 19,3 миллионов, 10 миллионов человек скончались в результате болезни. По статистике рак может быть диагностирован в течение жизни у каждого пятого жителя планеты, каждый восьмой мужчина и каждая одиннадцатая женщина умрут от этого заболевания. По данным Всемироной организации здравоохранения (World Health Organization, Russian Federation Cancer Country Profile 2020) в 2019 году в Российской федерации было зарегистрировано 543045 новых случаев заболевания и 314611 смертей в результате протекания болезни. По прогнозам, к 2040 году число ежегодных новых случаев онкологических заболеваний может возрасти на 47 процентов и достигнуть 28,4 млн. Цитостатическая химиотерапия злокачественных новообразований основана на применении цитостатических препаратов, тормозящих размножение и вызывающих апоптоз клеток, не способных делиться вследствие воздействия препарата - цитостатика. Ввиду высокой токсичности цитостатических препаратов, для достижения лечебного эффекта необходимо максимально точное поддержание терапевтического диапазона их концентраций. Для этого важна разработка как систем мониторинга концентрации цитостатиков в биожидкостях, так и обоснованное использование систем их контролируемого высвобождения, позволяющих снизить общую дозу и частоту введения препарата, а так же обеспечить его накопление в определенном органе за счет использования адресности доставки. В связи с этим, развитие подходов к определению концентрации цитостатических препаратов в биожидкостях и кинетики их пролонгированного высвобождения является актуальной задачей. Отсутствие надежных аналитических методов препятствует контролю концентрации цитостатиков на клеточном уровне. Так же отсутствие надежных методов определения локальной концентрации цитостатиков тормозит разработку и внедрение в медицинскую практику систем контролируемого пролонгированного высвобождения. Тяжело оценивать эффективность терапии не зная кинетики релиза препарата. Особенно остро данная проблема касается цитостатика митоксантрона, являющегося производным антрахинона, который, внедряясь между слоями пар оснований ДНК, нарушает ее матричную активность и ингибирует фермент топоизомеразу II. Особенность митоксантрона состоит в склонности его молекулы к ди- и три-мерообразованию, высокой чувствительностью всех процессов к рН, ионной силе, концентрации, присутствию компонентов биожидкостей, что делает практически невозможным определение его концентрации в биожидкостях, либо системах пролонгированного высвобождения. Отсутствие такой возможности в настоящее время сдерживает развитие систем пролонгированного высвобождения одного из востребованных цитостатиков, применяемого для лечения многих видов онкологических заболеваний. В перспективе данный подход предполагается распространить на другие цитостатические препараты. Проект носит комплексный междисциплинарный характер и предполагает использование методов нанотехнологий, неорганического синтеза, физической и аналитической химии, оптики и биофотоники. Проект направлен на разработку методик определения митоксантрона, которая будет использована для определения свободного митоксантрона в биожидкостях человека на основе изменения интенсивности и кинетики затухания флуоресценции полупроводниковых квантовых точек. Так же данная система ляжет в основу мониторинга остаточной концентрации митоксантрона локально в средствах прологнированного высвобождения. Это позволит разработать метод контроля скорости релиза митоксантрона из средств пролонгорованного высвобождения. Отсутствие такой возможности в настоящее время сдерживает развитие систем пролонгированного высвобождения одного из востребованных цитостатиков, применяемого для лечения многих видов рака. Конкретной научной задачей в рамках проекта является разработка подхода к определению концентрации цитостатиков в сложных матрицах (биожидкостях и локально в системах пролонгированного высвобождения) на основе тушения флуоресценции полупроводниковых квантовых точек (КТ). Связываясь с поверхностью КТ, митоксантрон (как и другие цитостатики – производные антрахинона) выступает акцептором, приводя к тушению флуоресценции КТ. Тщательное изучение влияния состава и архитектуры КТ на их флуоресцентные характеристики и кинетические закономерности тушения позволит выбрать оптимальные КТ; охарактеризовать взаимодействие не только цитостатик - КТ, но и взаимодействие митоксантрона с компонентами биожидкостей и систем контролируемого пролонгированного высвобождения (схема в приложенном файле). Среди используемых в настоящее время в химиотерапии злокачественных образований цитостатических препаратов в качестве модели выбран именно митоксантрон, потому что ввиду особенностей строения его молекулы отсутствуют надежные методы определения его концентрации. Полученные результаты будут впоследствии расширены на родственные препараты. Для достижения поставленной задачи будут проведены следующие исследования: 1. Наработка оптимальных полупроводниковых КТ для наиболее эффективного тушения в присутствии митоксантрона. Несколько типов КТ будут получены, модифицированы и использованы для анализа. 2. Изучение кинетики тушения флуоресценции КТ в присутствии митоксантрона на основе зависимости (1) интенсивности флуоресценции КТ и (2) кинетики ее затухания (времени жизни) от концентрации митроксантрона. Установление механизма тушения флуоресценции КТ митоксантроном. 3. Характеризация взаимодействия митоксантрона с компонентами биожидкостей и систем пролонгированного высвобождения на основе изменения тушения митоксантроном флуоресценции КТ в их присутствии. 4. Мониторинг кинетики пролонгированного высвобождения митоксантрона из различных систем регулирования релиза на основе остаточной концентрации митоксантрона (мониторинг интенсивности флуоресценции КТ в присутствии остаточных концентраций митоксантрона во времени). 5. Использование систем пролонгированного высвобождения митоксантрона (содержащих КТ-митоксантрон) в биологичесих объектах.

Ожидаемые результаты
Проект носит масштабный, комплексный и междисциплинарный характер, охватывает и фундаментальные исследования процессов (установление механизмов и закономерностей сорбции и тушения), и прикладные аспекты (синтез и гидрофилизация КТ, оптимизация условий регистрации сигналов интенсивности флуоресценции и кинетики ее затухания, создания аналитических методик определения митоксантрона в биожидкостях и средств пролонгированного высвобождения цитостатических препаратов для химиотерапии злокачественных новообразований). Его выполнение внесет существенный вклад в различные области современной науки: Высокотехнологичная и персонализированная медицина – инструмент для оценки скорости релиза цитостатических препаратов (на примере митоксантрона) из систем пролонгированного высвобождения и определение концентрации несвязанного препарата, а так же кинетики его связывания с компонентами биожидкостей. Масштабность и комплексность проекта с точки зрения повышения эффективности здравоохранения связаны с решением актуальной и не решенной на настоящий момент задачи определения концентрации цитостатических препаратов в сложных матрицах, а так же возможности отслеживать во времени локально в системах контролируемого пролонгированного высвобождения. Нанотехнологии – установление влияния архитектуры полупроводниковых коллоидных КТ на (1) кинетику затухания и интенсивность флуоресценции и (2) эффективность тушения флуоресценции КТ митоксантроном. Оптика и спектроскопия – изучение механизма процесса тушения флуоресценции КТ митоксантроном. Наиболее распространенным и изученным процессом тушения флуоресценции КТ является Ферстеровский резонансный перенос энергии. Ему посвящено большое количество работ, как ведущих мировых научных школ, так и наших. В случае тушения флуоресценции КТ митоксантроном существуют работы, указывающие, что это фотоиндуцированный перенос электрона от КТ к митоксантрону, который менее изучен и при этом подвержен влиянию большого количества факторов. Аналитическая химия - создание методик определения концентрации митоксантрона и других цитостатических препаратов (доксорубуцин, пиксантрон) в биожидкостях, локально в системах пролонгированной доставки и in vitro в клетках. Общественная значимость проекта состоит в существенном вкладе в создание высокоэффективных средств химиотерапии, которые облегчают страдания людей, помогают им сохранить жизнь и восстановить здоровье и работоспособность. Тщательный контроль распределения цитостатических препаратов, мониторинг их концентрации в различных клетках и биожидкостях организма, обоснованное использование средств адресной доставки с возможностью контроля попадания цитостатика в клетку являются важным звеном таких исследований. Впервые появится возможность оценить количество цитостатика в клетках, приводящее к их гибели. При успешном выполнении проекта удастся выделить системы контролируемой доставки цитостатика в клетку, вызывающие смерть раковых клеток при минимальном воздействии на здоровые. Решение поставленных задач и получение запланированных результатов достижимы, поскольку у коллектива проекта существует достаточный научный задел по всем ключевым направлениям проекта. Авторы имеют подтвержденный успешно выполненными проектами и публикациями в журналах первого квартиля опыт получения флуоресцентных полупроводниковых КТ методами высокотемпературного и водного синтезов, модификации свойств КТ и их применения в анализе (метка для иммуноанализа, донор для переноса энергии), разработки и валидации новых форматов анализа, определения биологически активных соединений различной природы, в том числе в биожидкостях. Так же имеется опыт в разработке и применения систем адресной доставки и контролируемого пролонгированного высвобождения биологически активных соединений и лекарств, их интернализации в различные клеточные линии, проведения различных клеточных исследований. Существующие наработки по тематике проекта дают авторам преимущества в виде высокой вариабельности исследований, возможность оптимизировать каждый этап работ, оперативно следовать вновь появляющимся в процессе выполнения проекта мировым тенденциям и предвосхищать их. Авторы имеют большой опыт выполнения научных проектов, включая международные проекты. Успешное выполнение этих проектов, серьезный научный задел, разносторонний бэкграунд, а также высокая публикационная активность подтверждают получение запланированных результатов в полном объеме. Коллектив обладает необходимым оборудованием и инфраструктурой.

ОТЧЁТНЫЕ МАТЕРИАЛЫ

Аннотация результатов, полученных в 2021 году
В первый год выполнения проекта основные результаты связаны с наработкой полупроводниковых люминесцентных квантовых точек (КТ) для определения концентрации цитостатических препаратовс целью последущего использования для обоснованного применения систем контролируемого высвобождения. Разработаны подходы к синтезу полупроводниковых люминесцентных квантовых точек, проведена их всесторонняя характеризация и оптимизация условий тушения флуоресценции этих КТ в водных растворах цитостатическим препаратом митоксантроном. Отработаны и оптимизированы следующие варианты квантовых точек: (1) синтезированные водным синтезом по методике «one-pot» безкадмиевые квантовые точки состава AgInS2/ZnS различного состава и (2) полученные высокотемпературным синтезом в органическом растворителе кадмиевые квантовые точки строения ядро/оболочка, включая аллоидные (сплавные) квантовые точки различного состава. КТ состава AgInS2/ZnS были получены в течение одного часа при максимальной температуре нагревания 96 ⁰С. Были рассмотрены различные соотношения компонентов Ag In S, используемые во время синтеза. Выделены отдельные (от 8 до 11) фракций КТ. КТ полученные в диапазоне от 1:4:10 до 1:7:10 обладали максимальными квантовыми выходами для данного типа ядер, однако коллоидная стабильность характерна только для соотношения 1:7:10 для КТ стабилизированных тиогликолевой кислотой. При изменении количества серы наивысший квантовый выход был получен для КТ состава 1:7:9 для 4 фракции и составлял 49 % при 8 фракциях в диапазоне длин волн от 558 до 630 нм. Размер КТ с учётом гидродинамической оболочки составил от ~1,5 до ~10 нм. Максимальный квантовый выход флуоресценции некадмиевых составил 46%. Высокотемпературным синтезом в октадецене были получены КТ двух типов: структура ядро с оболочками более широкозонного полупроводника CdSe/CdS/ZnS и CdSe/CdS и аллоидные КТ CdZnSeS и CdZnSeS/ZnS как упрощение методики синтеза. КТ CdSe/CdS/ZnS и CdSe/CdS/ZnS обладали квантовыми выходами 83 и 71% и после силанизации силоксанами 70 и 52%. После гидрофилизации тиогликолевой кислотой квантовый выход незначительно увеличился для CdSe/CdS до 88%. Для КТ CdSe/CdS/ZnS гидрофильную оболочку из тиогликолевой кислоты получить не удалось. Для КТ CdZnSeS квантовый выход составил 43% и 40% после модификации ZnS, однако гидрофилизация тиогликолевой кислотой позволило повысить квантовый выход до 75% в водном растворе в связи с чем было решено использовать для изучения тушения КТ данную структуру. Тушение флуоресценции КТ митоксантроном оценивали на основе значения констант скорости тушения Штерна-Фольмера. Показано, что значения констант зависят от состава и структуры КТ и гидрофилизирующей оболочки. Для КТ CdZnSeS и CdZnSeS/ZnS константа Штерна-Фольмера составила 2.89E+07 M-1 и 1.69E+07 M-1, соответственно. Для некадмиевых КТ - примерно на порядок меньшечто говорит об большей эффективности тушения флуоресценции кадмиевых КТ. На основе изучения тушения КТ митоксантроном во времяразрешенном режиме показано, что кинетика затухания кадмиевых КТ зависит от концентрации тушителя (константа Штерна-Фольмера близка к таковой, определенной в режиме стационарных измерений). Для КТ состава AgInS2/ZnS показано, что выраженной зависимости времени затухания от концентрации митоксантрона нет, что может указывать на статический характер тушения. Расчёт констант связывания митоксантрона с поверхностью КТ AgInS2/ZnS 1:7:9 показал, что значения несколько снижаются с номером фракции (и снижением размера КТ), оставаясь nE+06 M-1. Рассчитанное число эквивалентных сайтов связывания значительно не изменяется (не учитывая 1 фракцию) и равно примерно 1. Показано, что аналоги митоксантрона - доксорубицин и пиксантрон не обладают столь ярко выраженным эффектом тушения флуоресценции для КТ. Таким образом, синтезированы и охарактеризованы КТ, которые могут быть чувствительным элементом при определении митоксантрона, охарактеризовано тушение КТ митоксантроном в модельных растворах. Подготовлены материалы для обзора по определению минтоксантрона в различных средах и инкапсулируемых формах для Trends in Аnalytical Сhemistry и собран материал по синтезу и тушению КТ митоксантроном для Applied Materials аnd Interfaces. Вышли две статьи в издании, реферируемом в международных базах данных. Сделаны 5 устных и 2 стендовых доклада на международной и один на всероссийской конференциях.

Публикации

1. Горячева О.А. Bioconjugation techniques for quantum dots and gold nanoparticles for immunochemical assay Proc. SPIE 12194, Computational Biophysics and Nanobiophotonics, Proc. SPIE 12194, Computational Biophysics and Nanobiophotonics, 1219419 (год публикации - 2022) https://doi.org/10.1117/12.2626244

2. Мошков А.С., Мещерякова С.А., Строкин П.Д., Дрозд Д.Д., Горячева И.Ю., Горячева О.А. Hydrophilization parameters influencing the properties of shelled alloyed QDs Proc. SPIE 12194, Computational Biophysics and Nanobiophotonics, Proc. SPIE 12194, Computational Biophysics and Nanobiophotonics, 121941A (год публикации - 2022) https://doi.org/10.1117/12.2626340

3. Горячева О.А. Определение высокотоксичных веществ методами иммунохимического анализа с использованием полупроводниковых наноструктур Методы компьютерной диагностики в биологии и медицине – 2021: Сборник статей Всероссийской школы-семинара, Методы компьютерной диагностики в биологии и медицине – 2021: Сборник статей Всероссийской школы-семинара / под ред. проф. Ан.В. Скрипаля. – Саратов: Изд-во Саратовский источник, 2021. С 103-106 (год публикации - 2021)

4. Дрозд Д.Д., Строкин П.Д., Мошков А.С., Горячева О.А., Горячева И.Ю. Квантовые точки на основе твердых растворов как люминесцентная метка для аналитических систем Методы компьютерной диагностики в биологии и медицине – 2021: Сборник статей Всероссийской школы-семинара, Методы компьютерной диагностики в биологии и медицине – 2021: Сборник статей Всероссийской школы-семинара / под ред. проф. Ан.В. Скрипаля. – Саратов: Изд-во Саратовский источник, 2021. С 53-56 (год публикации - 2021)

5. Строкин П.Д., Дрозд Д.Д., Мошков А.С., Горячева О.А., Горячева И.Ю. Модификация квантовых точек на основе твёрдых растворов тиосоединениями Методы компьютерной диагностики в биологии и медицине – 2021: Сборник статей Всероссийской школы-семинара, Методы компьютерной диагностики в биологии и медицине – 2021: Сборник статей Всероссийской школы-семинара / под ред. проф. Ан.В. Скрипаля. – Саратов: Изд-во Саратовский источник, 2021. С 78-81 (год публикации - 2021)

6. - Ученые создали "шубку" для квантовых точек РИА Новости, - (год публикации - )

7. - Ученые создали "шубку" для квантовых точек Новости Российского научного фонда, - (год публикации - )

8. - 俄罗斯科学家把量子点应用在医学和生物技术中 Sputnik, - (год публикации - )

9. - «Приоритет-2030»: продолжаются исследования учёных СГУ в улучшении химиотерапии для пациентов с онкологией Новости СГУ, - (год публикации - )

10. - Группа молодых ученых Института Химии выиграла грант Президентской программы Новости СГУ института химии, - (год публикации - )

Аннотация результатов, полученных в 2022 году
Во втором году выполнения проекты основные результаты получены в области разработки аналитической системы для определения митоксантрона в биожидкостях на основе тушения флуоресценции полупроводниковых квантовых точек различного состава: фракций тройных КТ AgInS/ZnS и сплавных КТ CdZnSeS/ZnS. Так же были получены системы доставки митоксантрона с пролонгированным высвобождением препарата на основе сфероидных микрочастиц кальция карбоната. При разработке аналитических систем для определения митоксантрона за счёт тушения флуоресценции квантовых точек было установлено, что тушение флуоресценции происходит с преобладанием статического механизма с образованием нефлуоресцентного комплекса с незначительным вкладом динамического механизма тушения. При чём одна молекула митоксантрона способна связываться с двумя квантовыми точками. Для квантовых точек состава AgInS/ZnS наиболее эффективное тушения флуоресценции квантовых точек митоксантроном наблюдается для фракции с максимумом флуоресценции в районе 606 нм. Эта фракция характеризуется максимальным перекрыванием между спектрами флуоресценции квантовых точек и спектрами поглощения митоксантрона. Пределы обнаружения митоксантрона в водном растворе составил 3 нМ или 1.4 нг/мл. Для квантовых точек состава CdZnSeS/ZnS с максимумом флуоресценции 532 нм предел обнаружения митоксантрона составил 5 нМ или 2.4 нг/мл. Аналитическая система была протестирована для квантовых точек при различных рН и в присутствии белка. Показано, что для квантовых точек состава AgInS/ZnS с покрытием из тиогликолевой кислоты присутствие высоких концентраций белка приводит к снижение интенсивности флуоресценции около 50 % в то время как интенсивность флуоресценции квантовых точек состава CdZnSeS/ZnS остаётся стабильной. Было исследовано влияние биожидкостей на эффективность тушения флуоресценции квантовых точек митоксантроном. Были протестированы квантовые точки CdZnSeS/ZnS с различными стабилизирующими лигандами на поверхности - тиогликолевая (ТГК), меркаптопропионовая (МПК) и дигидролипоевая (ДГЛК) кислоты. Было показано, что определять концентрацию митоксантрона непосредственно в крови невозможно вследствие резкого снижения флуоресцентного сигнала квантовых точек в крови для всех трёх типов покрытия. Оптимальное разбавление плазмы крови для проведения анализа составило 1/50. Поверхностные лиганды значительно влияют на чувствительность квантовой точки к присутствию митоксантрона. Так, для ТГК немонотоннное изменение интенсивности флуоресценции квантовых точек в зависимости от концентрации митоксантрона наблюдается вплоть до 500 нМ. Для квантовых точек покрытых МПК и ДГЛК пределы обнаружения в плазме крови составили 73 нМ (32.6 нг/мл) и 13 нМ (5,8 нг/мл). При тестировании аналитической системы в моче было показано, что рабочее разбавление, при котором возможна регистрация тушения флуоресценции составляет 1/10. Для КТ покрытых МПК наблюдается неравномерная зависимость тушения флуоресценции квантовых точек до концентрации митоксантрона 250 нМ. КТ покрытые ДГЛК чувствительны к концитрациям митоксантрона от 25 нМ. Были разработаны системы пролонгированного высвобождения митоксантрона на основе сферических микрочастиц карбоната кальция. Установлено, что количество препарата, загружаемого в микрочастицу, зависит от её размера. Для наночастиц размером 3.0±0.4µм в каждую микрочастицу возможно загрузить до (54±6) пг митоксантрона, а для микрочастиц 1.3±0.2 µм до 38±2 пг митоксантрона. Таким образом, размер микрочастиц карбоната кальция влияет на кинетику пролонгированного высвобождения митоксантрона. За 5 часов из частиц мирконнного размера выходит около 25% митоксантрона, в то время как для субмикронного размера количество вышедшего митоксантрона составляет только 7%.

Публикации

1. Горячева О.А., Кокорина А.А., Подколодная Ю.А., Мишра П.К., Горячева И.Ю. Express test for NT-proBNP competitive detection based on lateral flow immunoassay using silanized fluorescent quantum dots Talanta Open, Т. 7. – С. 100186. (год публикации - 2023) https://doi.org/10.1016/j.talo.2023.100186

2. Д.В. Цюпка, Е.А. Мордовина, Т.С. Пономарёва, Д.Д. Дрозд, И.Ю. Горячева, О.А. Горячева Luminescence behavior of colloid quantum dots in the presence anthracycline antibiotic mitoxantrone: surface interaction and luminescence quenching, size and composition dependence, potential for clinical study Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects, 671, 131648 (год публикации - 2023) https://doi.org/10.1016/j.colsurfa.2023.131648

3. Е. А. Мордовина, В. А. Берденкова, А. А. Бакал, Д. В. Цюпка, А. А. Кокорина, Ю. А. Подколодная, О. А. Горячева, И. Ю. Горячева Fluorescent nanosized PAMAM dendrimers: one-step formation of a bright blue fluorophore on terminal groups and its optical properties Известия Саратовского университета. НОВАЯ СЕРИЯ. СЕРИЯ ФИЗИКА, - (год публикации - 2023)

4. Горячева О.А., Дрозд Д.Д., Понамарёва Т.С. Quantum dots for control the concentrations of anthracycline antibiotics IEEE, 21955495, c. 1 (год публикации - 2022) https://doi.org/10.1109/ICLO54117.2022.9839905

5. Горячева О.А., Дрозд Д.Д., Понамарёва Т.С. Quantum dots for control the concentrations of anthracycline antibiotics Institute of Electrical and Electronics Engineers, IEEE, 2022. – С. 01-01 (год публикации - 2022) https://doi.org/10.1109/ICLO54117.2022.9839905

6. Мещерякова С.А., Дрозд Д.Д., Горячева О.А., Горячева И.Ю. Повышение чувствительности аналитических систем методом разрешенной во времени спектрометрии МЕТОДЫ КОМПЬЮТЕРНОЙ ДИАГНОСТИКИ В БИОЛОГИИ И МЕДИЦИНЕ - 2022 сборник статей Всероссийской школы-семинара. Саратовский национальный исследовательский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского. Саратов, 2022, с.24-26 (год публикации - 2022)

7. - Ученые разработали экспресс-тест для определения сердечной недостаточности по капле крови ТАСС, - (год публикации - )