КАРТОЧКА ПРОЕКТА,
ПОДДЕРЖАННОГО РОССИЙСКИМ НАУЧНЫМ ФОНДОМ

Информация подготовлена на основании данных из Информационно-аналитической системы РНФ, содержательная часть представлена в авторской редакции. Все права принадлежат авторам, использование или перепечатка материалов допустима только с предварительного согласия авторов.

 

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ


Номер 22-25-00723

НазваниеРазработка концепции доклинических исследований аутологичной дендритно-клеточной вакцины человека с использованием гомологичного клеточного продукта и персонализированных клеточных систем

РуководительНехаева Татьяна Леонидовна, Кандидат медицинских наук

Организация финансирования, регионфедеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. Петрова" Министерства здравоохранения Российской Федерации, г Санкт-Петербург

Годы выполнения при поддержке РНФ 2022 - 2023 

КонкурсКонкурс 2021 года «Проведение фундаментальных научных исследований и поисковых научных исследований малыми отдельными научными группами»

Область знания, основной код классификатора 05 - Фундаментальные исследования для медицины, 05-401 - Молекулярная и клеточная медицина

Ключевые словагомологичный клеточный продукт, экспериментальная онкология, аутологичная дендритно-клеточная вакцина, персонализированные клеточные системы

Код ГРНТИ76.29.49


 

ИНФОРМАЦИЯ ИЗ ЗАЯВКИ


Аннотация
Проект посвящен разработке концепции доклинических исследований (ДКИ) аутологичной дендритно-клеточной вакцины (ДКВ) человека с использованием гомологичного клеточного продукта и персонализированных клеточных систем. Существующие правила проведения ДКИ клеточных продуктов (часть 2 Правил надлежащей практики, ФЗ-180 «О биомедицинских клеточных продуктах») описывают лишь общие требования и принципы выбора моделей при проведении ДКИ клеточного продукта и не содержат конкретных методик проведения исследования, выбор и обоснование которых остается правом разработчика. В основе разработки биомедицинских клеточных продуктов (БМКП) для эффективной иммунотерапии злокачественных новообразований лежит глубокое понимание биологических процессов, протекающих при взаимодействии опухоли с клетками иммунной системы. Очевидно, что доклинические исследования БМКП также должны быть выполнены с использованием хорошо изученных экспериментальных in vitro и in vivo моделей, адекватно воспроизводящих процессы у человека и позволяющих оценить функциональную эффективность, безопасность и качество противоопухолевой вакцины на основе аутологичных дендритных клеток (ДК). В соответствии с этим, в рамках предлагаемого проекта будут проведены: обоснование и детальная разработка методов оценки качества аутологичной ДКВ, значимых для клинической эффективности при лечении злокачественных новообразований, с перечнем контролируемых показателей качества и аналитических методик контроля качества БМКП на основе зрелых ДК; разработка и апробация in vitro моделей с использованием 2D и 3D персонализированных клеточных систем, на основе опухолевых клеток и клеток иммунной системы для оценки специфической эффективности ДКВ, с изучением факторов, влияющих на противоопухолевый эффект аутологичной ДКВ; выбор, разработка и апробация in vivo гомологичной модели с научным обоснованием возможности экстраполяции полученных данных с животного на человека для изучения кинетики, миграции и специфической фармакологической активности клеточного продукта на основе зрелых ДК. Таким образом, предлагаемый проект призван научно обосновать методологический подход, позволяющий охарактеризовать эффективность и безопасность аутологичного клеточного продукта на основе зрелых ДК, что повысит качество получаемых в ходе исследований результатов и увеличит вероятность признания результатов научным сообществом и регуляторными органами. В случае успешной реализации проекта, разработанная программа и набор методов могут быть легко адаптированы для тестирования практически любого аутологичного клеточного продукта в онкологии. Коллектив исполнителей включает специалистов с обширным опытом работы в области клеточных технологий и экспериментальной онкологии.

Ожидаемые результаты
В ходе выполнения работ по проекту будут получены новые научные данные о специфической активности аутологичной дендритно-клеточной вакцицы в моделях in vitro, имитирующих взаимодействие злокачественных клеток с клетками иммунной системы в условиях, приближенных к реальному опухолевому очагу, с включением необходимых групп контролей и сравнения. Для исследований in vivo будет создан гомологичный клеточный продукт на основе ДК мыши, активированных лизатом клеток перевиваемой веретеноклеточной саркомы мышей, а также модель опухолевой патологии на основе указанной новой сингенной модели опухоли. В частности: - Будут изучены миграционные особенности ДК под влиянием элементов опухолевого микроокружения, блокирующего их подвижность in vitro. -Будет проведена оценка содержания иммуносупрессирующих факторов в периферической крови больных, которые являются одним из факторов, определяющих клиническую эффективность противоопухолевой ДК-иммунотерапии, для установления критических параметров качества вакцинных ДК. -Будет изучено модифицирующее влияние ДК вакцины на цитотоксический эффект клонов Т-лимфоцитов, специфичных к антигенам опухолевых клеток in vitro, а также исследовано содержание Т-клеток памяти с разработкой протокола иммунофенотипирования субпопуляций; подобрана панель антител и разработана схема гейтирования в популяциях Т-клеток памяти и ЦТЛ; будет проведен анализ продукции перфорина и гранзима Б исследуемых клеток-эффекторов методом проточной цитофлуориметрии и количественный анализ продукции цитокинов и эффекторных белков в 2D in vitro модели, включающей аутологичные опухолевые клетки и Т-клетки больных со злокачественными новообразованиями методом мультиплексного анализа. - При использовании трехмерной модели опухоли будет изучена интеграция эффекторных клеток в тумороид после их взаимодействия со зрелыми ДК, а также определены характеристики этих клеток. - Будет разработана схема получения гомологичного БМКП на основе ДК мыши, активированных лизатом клеток перевиваемой веретеноклеточной саркомы мышей. Для каждой партии полученного БМКП мыши будет оформлен протокол оценки качества БМКП. - Будет проведено моделирование патологического состояния (опухолевого процесса) и изучение кинетики, миграции и специфической фармакологической активности клеточного продукта на основе зрелых ДК in vivo на мышиной модели сингенной трансплантируемой веретеноклеточной саркомы. В целом, разработанная общая методология исследований и конкретные модели in vivo и in vitro будут пригодны для тестирования сходных аутологичных или аллогенных клеточных продуктов, предназначенных для использования в онкологии. В случае успеха проекта, широкое применение предлагаемого подхода будет способствовать существенному как теоретическому, так и практическому развитию направления разработки и применения дендритно-клеточных вакцин в онкологии. Планируется подготовка трех публикаций.


 

ОТЧЁТНЫЕ МАТЕРИАЛЫ