Аннотация результатов, полученных в 2022 году
В процессе выполнения работ использовались клинические, вискозиметрические, тепловизионные, микробиологические, гематологические, биохимические, патоморфологические и гистологические методы исследования, а также иммуноферментный анализ, метод инфракрасной спектроскопии и масс-спектрометрии. При разработке новых композиций определен оптимальный состав по содержанию каждого активного компонента, который соответствовал: 1. глицеролаты кремния в 6-мольном избытке глицерина – 3,0 %, низин – 0,3 %, глицерин – 10 %, дистиллированная вода – до 100 %; 2. глицеролаты кремния в 6-мольном избытке глицерина – 3,0 %, бисглицеролаты бора – 2,0 %, низин – 0,3 %, глицерин – 10 %, дистиллированная вода – до 100 %. Методом инфракрасной спектроскопии установлена фармацевтическая совместимость компонентов. Для оценки способности разработанных композиций сохранять химические, физические и микробиологические свойства на протяжении срока годности исследована стабильность. Основываясь на результатах исследований антимикробной активности, можно сделать вывод, что разработанные композиции обладают выраженным антимикробным действием в отношении различных штаммов микроорганизмов, в частности против широко распространенных возбудителей мастита у высокопродуктивных коров, таких как Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis. Однако, диаметр зон подавления бактериального роста культур микроорганизмов при исследовании композиции 2, содержащей в своем составе три выбранных компонента был больше, чем при применении композиции 1. При исследовании антимикробной активности к возбудителям мастита высокопродуктивных коров в Свердловской области, установлено, что композиция 2 обладает большей антимикробной активностью, в сравнении с композицией 1. Произведены первичные фармакологические испытания синтезированных композиций на основе бактериоцина - низина и гидрогелей на лабораторных животных, с оценкой острой, хронической токсичности и кожно-раздражающего действия. Подтверждена безопасность разработанных композиций на экспериментальных животных, установлен класс токсичности веществ - IV (малотоксичные вещества). В ходе исследования установлено отсутствие у композиций кожно-раздражающего действия. Отмечено, что применение композиций не оказывает негативного влияния на массу тела белых лабораторных крыс, а также массовые коэффициенты внутренних органов. При проведении гематологических исследований установлено, что показатели состава крови грызунов при применении исследуемых композиций в разных дозировках находились в пределах референтных значений и не имели статистических выбросов, что подтверждает отсутствие влияния исследуемых фармацевтических композиций на гемопоэз. Полученные данные в ходе биохимического исследования оказались неинформативны, за счет значительного диапазона референтных интервалов показателей крови у лабораторных животных и высокой зависимости от преаналитического этапа. В результате чего для оценки влияния разработанных композиций на метаболические процессы и морфофункциональное состояние внутренних органов были проведены исследования на клеточном уровне. На основании которых определено, что композиции могут быть рекомендованы для проведения клинических испытаний на продуктивных видах животных в дозе не более 500 мг/кг, при применении которой в процессе гистологического исследования органов лабораторных животных установлено, что структура их соответствовала анатомическим параметрам, изменений в архитектонике и наличия патологических процессов не установлено. Применение композиций в дозе 750 мг/кг рекомендовано с осторожностью использовать у животных с выраженными нарушениями функции печени, за счет регистрации входе гистологического исследования фиброзных изменений в печени. При дальнейших испытаниях следует воздержаться от критической дозы 1000 мг/кг, приводящей к более глубоким изменениям в органах, таким как усиление катарального воспаления кишечника, появления очагов островковой и межостровковой фазы цирроза печени, наличия воспалительной инфильтрации в почках и расширения Т-зоны в фолликулах селезенки. На основании полученных результатов для дальнейшего опытного исследования на высокопродуктивных коровах, имеющих воспалительные процессы в молочной железе, рекомендуем в схемах лечения использовать новую фармацевтическую композицию 2 в дозе не более 500 мг/кг. Таким образом, применение композиции 2 в дальнейшем позволит использовать новые схемы лечения мастита, что будет способствовать снижению применения антибиотиков, тем самым послужит методом борьбы с развитием антибиотикорезистентности. До окончания первого года реализации проекта полученные научные результаты будут озвучены на семи конференциях, принята к печати публикация в издании, индексируемом базой данных Scopus. (https://urfanic.ru/ru/press-center/news/novosti/innovatsionnye-resheniya-strategicheskikh-zadach-agropromyshlennogo-kompleksa/,https://urfanic.ru/ru/press-center/news/novosti/aktualnye-problemy-agrarnoy-nauki-prikladnye-i-issledovatelskie-aspekty/, https://www.bgsha.com/ru/news/1007881/,https://nalchik.bezformata.com/listnews/nauchno-prakticheskaya-konferentciya/114170270/,https://nalchik-gid.ru/news/nauka-i-obrazovanie/vserossiyskaya-nauchno-prakticheskaya-konferenciya-aktualnye-problemy-agrarnoy-nauki-prikladnye-i-issledovatelskie-aspekty.htm)

Аннотация результатов, полученных в 2023 году
В процессе выполнения работ использовали клинический, вискозиметрический, тепловизионный, ультразвуковой, микробиологический, гематологический, иммунологический, биохимический методы исследования, а также метод масс-спектрометрии и полимеразной цепной реакции. Проведено экспериментальное исследование с целью изучения эффективности разработанной фармацевтической композиции (глицеролаты кремния в 6-мольном избытке глицерина – 3,0 %, бисглицеролаты бора – 2,0 %, низин – 0,3 %, глицерин – 10 %, дистиллированная вода – до 100 %) в схеме лечения мастита у высокопродуктивных коров. Клиническими исследованиями в двух сельскохозяйственных организациях определена терапевтическая эффективность разработанной фармацевтической композиции при субклиническом и клиническом мастите, которая составила 93,3%-100,0% и 91,7% соответственно. При проведении микробиологического исследования установлено, что выделенные из секрета молочной железы возбудители мастита, такие как: S.aureus, БКГП, E.faecium, Streptococcus spp., A.viridans, S.epidermidis, C.pseudotuberculosis, S.haemolyticus, S. dysgalactiae обладают чувствительностью к композиции на основе бактериоцина-низина. По окончанию опытного периода регистрировали увеличение количества проб с отсутствием микрофлоры до 85,0-90,0%, в остальных образцах микробиота секрета молочной железы коров была представлена монокультурами микроорганизмов: S.aureus, БГКП и ассоциациями: S. aureus+БГКП+Mucor, S. aureus+БГКП. При этом выделенные изоляты S.aureus и БГКП не являлись этиологически значимыми в диагностическом титре (КОЕ/мл 10^2 и 10^1 соответственно). Установлено положительное влияние разработанной фармацевтической композиции на основе бактериоцина-низина на показатель соматических клеток в молоке коров. Так на 14-й день после курса лечения показатель соматических клеток в молоке коров опытной группы составил 159 тыс/мл. Дисперсионный анализ показателя лактоферрин позволил обнаружить высокие индивидуальные особенности животных, а также различия между показателями на разных сроках эксперимента, так через 14 дней с начала курса лечения среднее значение лактоферрина в опытной группе снизилось до уровня 0,38 мг/мл, что характерно для молока, полученного из молочной железы коров с отсутствием воспалительных процессов. При анализе показателей молока (жир, белок, сухое вещество, сухой обезжиренный молочный остаток, плотность, лактоза) установлена высокая внутригрупповая однородность, что проявлялось отсутствием статистически значимых индивидуальных различий, небольшим увеличением всех показателей к 14 суткам эксперимента, с тенденцией к более существенному увеличению в группе, получавших экспериментальное лечение, что является результатом отсутствия негативного влияния разработанной композиции на данные показатели. Гематологическими исследованиями установлено отсутствие негативного влияния разработанной фармацевтической композиции на основе бактериоцина-низина на состав крови и качественные характеристики кроветворения коров. Иммуногематологические исследование позволили определить общую иммунобиологическую реактивность организма, с целью оценки иммунной защиты молочной железы. В ходе дисперсионного анализа по всем исследуемым иммуногематологическим показателям (эритроциты, гемоглобин, гематокрит, тромбоциты, лейкоциты, лимфоциты, СОЭ, ЦИК, Т-лимфоциты относит., Т-лимфоциты абсолют., В-лимфоциты относит., В-лимфоциты абсолют., индекс Т/В, фагоцитарная активность, фагоцитарный индекс) статистически значимым являлся фактор «Индивид внутри Группы». Различие групп в динамике (взаимодействие факторов «Группа × Срок») было статистически значимым для показателей: эритроциты, тромбоциты, лимфоциты, СОЭ, Т-лимфоциты, В-лимфоциты, фагоцитарная активность, фагоцитарный индекс), однако значения данных показателей у животных опытной группы находились в пределах физиологических норм для высокопродуктивных коров. Биохимические исследования сыворотки крови животных позволили определить отсутствие негативного эффекта после применения разработанной фармацевтической композиции на функциональные параметры органов высокопродуктивных коров. Установлено, что среднее значение всех биохимических показателей сыворотки крови после применения фармацевтической композиции находились в пределах физиологических значений для высокопродуктивных коров опытной и контрольной групп. При более детальном анализе установлена высокая индивидуальная вариабельность биохимических показателей: в дисперсионном анализе наблюдалась высокая статистическая значимость эффекта «Индивид внутри Группы». Различия по срокам были значимы для показателей: мочевина, фосфор и ГлДГ; также имелась тенденция к различию сроков для показателей: кальций, АСТ и общий билирубин. Тепловизионный метод исследования позволил установить, что у животных на фоне применения разработанной фармацевтической композиции происходит снижение среднего значения локальной температуры молочной железы при клинической и субклинической форме мастита с 40,2 0С до 37,0 0С и с 38,1 0С до 36,7 0С соответственно. При ультразвуковом методе исследования по окончанию эксперимента молочная железа коров имела гипоэхогенную гомогенную структуру, отмечено значительное сужение молочных ходов с уменьшением вплоть до отсутствия частиц взвеси. Экономический эффект на один рубль затрат, рассчитанный по предотвращенному ущербу за счет сокращения дней с пониженной продуктивностью и сниженным качеством молока, составляет 3,3 рубля. Полученные в ходе реализации проекта научные результаты озвучены на шести конференциях, опубликовано три статьи и одна принята к печати, в журналах индексируемых в библиографической базе данных RSCI. По материалам конференции опубликована одна статья (РИНЦ). Принята к печати одна статья, в журнале индексируемом в библиографической базе данных Scopus. По полученным результатам подана заявка на патент «Способ лечения субклинического мастита у коров».