Аннотация результатов, полученных в 2023 году
Проект направлен на разработку новых путей фармакологической коррекции хронического стресса и посттравматических стрессорных расстройств на основе ресвератрола. Предаторный стресс, то есть стресс, спровоцированный запахом хищника, является хорошо валидированной экспериментальной моделью ПТСР. Селективные ингибиторы обратного захвата серотонина (СИОЗС) считаются «препаратами первой линии» в коррекции ПТСР. Тем не менее, как в клинической практике ПТСР, так и в экспериментальных исследованиях, например, в условиях предаторного стресса, отмечены случаи резистентности к СИОЗС. Это связано с тем, что поведенческие расстройства, вызванные присутствием хищника, вызывают не просто тревожные, а тревожно-фобические расстройства. Между тем СИОЗС обладают низким фармакологическим эффектом в коррекции собственно фобий. Поэтому нами предложен новый подход, предусматривающий синергию фармакологических эффектов СИОЗС и ресвератрола для коррекции тревожно-фобических расстройств как самого хронического предаторного стресса, так и индуцированного им ПТСР. При этом мы исходили из наличия у ресвератрола способности непосредственно взаимодействовать с серотониновым транспортером. Согласно плану первого года реализации проекта выполнялись экспериментальные исследования, в которых оценивалась эффективность совместного введение ресвератрола и СИОЗС в коррекции поведенческих расстройств и повреждений внутренних органов при хроническом предаторном стрессе (ХПС). При этом выполнялась постановка ХПС путем непосредственного контакта крыс с запахом хищника. Использовались следующие СИОЗС: циталопрам (20мг/кг), флуоксетин (10мг/кг) пароксетин (10мг/кг), сертралин (10мг/кг). Ресвератрол вводился в дозах (10 мг/кг, 20 мг/кг, 50 мг/кг и 100 мг/кг). В тесте «крестообразный лабиринт» помимо показателей тревожности регистрировали случаи замирания (фризинга) и дефекаций, которые интерпретировались как поведенческие эквиваленты фобий. В плазме крови определялась концентрация ресвератрола. Проводился корреляционный анализ содержания ресвератрола в крови с поведенческими, эндокринными и метаболическими показателями стрессированных животных. В 2023 году при выполнении проекта нами было установлено, что ресвератрол усиливает фармакологическую эффективность СИОЗС в отношении вызванных ХПС поведенческих расстройств и повреждений внутренних органов. Тревожно-фобический характер поведенческих расстройств при ХПС выражался в повышении величины индекса тревожности при одновременном повышении количество случаев фризинга. Среди использованных СИОЗС только сертралин смог значимо снизить величину индекса тревожности у стрессированных животных. При этом эффективность СИОЗС убывает в следующей последовательности: пароксетин <флуоксетин <циталопрам < сертралин. Причем, у стрессированных животных СИОЗС так и не оказали статистически значимых эффектов на фризинг. В ходе исследований продемонстрирована способность ресвератрола в дозах 20 мг/кг, 50 мг/кг и 100 мг/кг усиливать корригирующие эффекты СИОЗС в отношении стрессорных тревожно-фобических расстройств. Так, для усиления поведенческих эффектов флуоксетина оптимальна доза ресвератрола 20 мг/кг и нежелательна доза 100 мг/кг. Сочетание флуоксетина с дозой ресвератрола в 100 мг/кг резко усиливает фризинг и сопровождается отеками и некротическими поражениями надпочечников. Для циталопрама представляется оптимальной доза ресвератрола 50мг/кг, в то время как для сертралина и пароксетина 100 мг/кг. В ходе исследования установлена способность ресвератрола проявлять самостоятельное корригирующее действие в отношении поведенческих расстройств и повреждений внутренних органов. Введение ресвератрола в дозе 100 мг/кг приводило к исчезновению случаев фризинга у стрессированных животных. При выполнении проекта были апробированы функциональные продукты в виде сыров, в которые были внесены содержащие ресвератрол липосомы. Концентрация ресвератрола в сыре была эквивалентна дозе 20мг/кг. На основе полученных результатов стрессированные крысы были разделены на два фенотипа. Первый фенотип представлен чувствительными к нутрицевтической поддержке ресвератролом. Второй фенотип представлен животными, для которых оказался неэффективен этот вариант нутрицевтической поддержки. Соотношение между этими фенотипами 1:1. В первом фенотипе отсутствовали проявления фризинга. При этом у этих животных в гиппокампе снижен метаболический индекс серотонина в большей степени, чем даже в ответ на СИОЗС. В ходе исследований получены результаты, характеризующие способность ресвератрола регулировать экспрессию ассоциированных с ПТСР генов. На их основании была предложена новая концепция ПТСР. Её основные положения обобщены следующими положениями: 1. Временная сенсибилизация (ВС) к различным ассоциациям (воспоминаниям), так или иначе связанным с пережитым стрессом (Time Dependent Sensitization), является «сердцевиной» патогенеза ПТСР. 2. Развитие временной сенсибилизации обусловлено сбоями в работе локальных генных сетей. Под генными сетями подразумевается группа одновременно и координированно работающих генов. Эти генные сети могут находиться как в пределах мозга, так и за его пределами. 3. В результате сбоев в работе генных сетей происходит нарушение взаимодействий между нейромедиаторами и гормонами. Последствиями этих нарушений являются тяжелые поведенческие расстройства и соматические заболевания. 4. Патогенез ПТСР связан с нарушениями межорганных взаимодействий не в меньшей степени, чем с нарушениями, возникающими в пределах различных регионов головного мозга. 5. Патогенетически обоснованная терапия ПТСР должна быть направлена на устранение сбоев в генных сетях и купированию ВС. Эта концепция была доложена и обсуждена на XXIV Съезде Всероссийского Физиологического Общества им. И.П. Павлова на симпозиуме "Физиологические и молекулярные механизмы стресса: точки роста и трансляционные аспекты" и частично опубликована в нашей статье в журнале International Journal of Molecular Sciences (doi: 10.3390/ijms241814343). Её отдельные положения получат развитие при дальнейшем выполнении этого проекта. В рамках нашей концепции ресвератрол рассматривается как корректор сбоев генных сетей организма. Публикации: 1. Цейликман В.Э., Шатилов В.А., Жуков М.С., Букша И.А., Эпиташвили А.Е., Липатов И.А., Аристов М.Р., Кошелев А.Г., Карпенко М.Н., Трактиров Д.С., Майстренко В.А., Камель М., Бюлер А.В. (Tseilikman VE, Shatilov VA, Zhukov MS, Buksha IA, Epitashvily AE, Lipatov IA, Aristov MR, Koshelev AG, Karpenko MN, Traktirov DS, Maistrenko VA, Kamel M, Buhler AV,) Limited Cheese Intake Paradigm Replaces Patterns of Behavioral Disorders in Experimental PTSD: Focus on Resveratrol Supplementation. International Journal of Molecular Sciences (2023 г.) WOS SCOPUS Q1 2. Цейликман В.Э., Федотова Ю.О., Цейликман О.Б., Новак Ю., Карпенко М.Н., Майстренко В.А., Лазуко С.С., Белева Л.Е., Камель М., Бюлер А.В., Ковалева Е.Г. (Tseilikman VE, Fedotova JO, Tseilikman OB, Novak J, Karpenko MN, Maistrenko VA, Lazuko SS, Belyeva LE, Kamel M, Buhler AV, Kovaleva EG.) Resistance to Resveratrol Treatment in Experimental PTSD Is Associated with Abnormalities in Hepatic Metabolism of Glucocorticoids. International Journal of Molecular Sciences (2023 г.) WOS SCOPUS Q1