Аннотация результатов, полученных в 2023 году
Анализ NTA и трансмиссионная электронная микроскопия выполнены в образцах внеклеточных везикул (ВВ) больных раком прямой кишки (РПК) (T3-4N0-1M0) до начала терморадиохимиотерапии (ТРХТ). Электронная микроскопия в препаратах везикул выявила четко структурированные чашеобразные частицы с низкой электронной плотностью и сохраненными мембранами, причем их морфология не отличалась от таковой у экзосом, выделенных от больных другими видами рака. В образцах также присутствовали частицы, называемые «не-везикулами» (липопротеины низкой или очень низкой плотности). В препаратах практически не было везикул крупнее 100 нм. Препараты циркулирующих ВВ больных РПК имели средний размер 94 нм с модой 70 нм и стандартным отклонением 56 нм. Средняя концентрация ВВ в образцах составила 30,8 ± 3,9 × 109 частиц/мл крови, что соответствует данным литературы. Выделенные ВВ также экспрессировали тетраспанины СD81, СD63 и гликопротеин CD24. У больных с РПК уровень белка в изолированных экзосомах статистически значимо не изменялся на этапах проведения ТРХТ и до начала лечения составил 50,5±12 мкг/мл, однако по данным анализа ANOVA для повторяющихся измерений были выявлены различия в уровне белка экзосом между больными РПК с метаболическим синдромом и без метаболических нарушений. У больных без нарушений на этапах лечения уровень белка в выделенных везикулах был достоверно выше. Создана коллекция циркулирующих ВВ больных РПК, получивших терморадиохимиотерапию (ТРХТ). Больным РПК на первом этапе проводилась дистанционная гамма-терапия на аппарате Theratron Equinox 1,25 в стандартном режиме фракционирования, разовая очаговая доза (РОД) 2,0 Гр, 5 фракций в неделю до СОД 54 Гр. Одновременно с началом лучевой терапии проводилась радиомодификация капецитабином. Химиолучевое лечение проводилось на фоне локальной гипертермии (аппарат Celsius TCS, всего 10 сеансов). Оценка эффективности лечения, в соответствии с рекомендациями ВОЗ, проводилась проводиться через 6-8 недель после окончания курса ТРХТ. В интервале между завершением кура ТРХТ и контрольным обследованием проведены 3 курса консолидирующей химиотерапии по схеме XELOX. По данному способу в 2023 году пролечены 20 больных с местнораспространенным средне- и нижнеампулярным РПК (9 мужчин и 11 женщин). Эффективность лечения оценивалась по критериям RECIST 1.1 и ESGAR с определением степени лечебного патоморфоза. Больные были распределены на 2 группы – 1 группа с полной регрессией 13 человек, 2 группа – с частичной регрессией и стабилизацией – 7 человек. Кроме того, в исследовании были выделены подгруппы больных с метаболическими нарушениями ( имеющие метаболический синдром или метаболически здоровое ожирение) и подгруппа больных без метаболических нарушений. Состав везикул анализировался в динамике ТРХТ в 4-х точках. Выявлены 5 субпопуляций CD9-позитивных и FABP4- позитивных экзосом, ассоциированных с эффективностью ТРХТ у больных РПК (СD9+MMP2+9+TIMP1+; СD9+MMP9+2-TIMP1+; СD9+HSP60+; СD9+MMP2+9-TIMP1+; FABP4+MMP2+9-TIMP1+; FABP4+MMP9+) (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC10143749). В перспективе необходимо построение прогностических моделей для этих больных с учетом данных по везикулярным маркерам. Проведено сравнение экспрессии MMPs и HSPs на внеклеточных везикулах на этапах ТРХТ отдельно на CD9-позитивных и FABP4-позитивных (адипоцитарных) везикулах без разделения на группы больных с различным непосредственным эффектом терапии. Адипоцитарные везикулы, детектируемые с помощью проточной цитометрии с использованием метода непрямой детекции с сорбцией на латексных частицах у больных РПК на этапах ТРХТ экспрессируют достоверно больше HSPs по сравнению с СD9-позитивными везикулами. В целом, адипоцитарные везикулы у больных РПК экспрессируют достоверно больше MMP2 по сравнению с СD9-позитивными везикулами, однако на этих везикулах практически отсутствуют трипл-позитивная популяция (MMP2+MMP9+TIMP1+) и популяция с сочетанной экспрессией обоих желатиназ. Кроме того, адипоцитарные везикулы у больных РПК на этапах ТРХТ экспрессируют достоверно меньше MMP9 по сравнению с СD9-позитивными везикулами. Курс ТРХТ получили 6 больных РПК без метаболических нарушений, причем у 5 из них была зарегистрирована частичная регрессия. У этих больных изучены популяции только CD9+ циркулирующих экзосом в динамике на этапах терапии, исследование состава адипоцитарных везикул на этапах лечения было нецелесообразным поскольку больные не имели метаболических нарушений. За исключением субпопуляций экзосом с сочетанной экспрессий HSP60 и HSP27 в динамике лечения не выявлено достоверных изменений состава CD9+ везикул. Однако сам факт того, что у только у 20% от всех пролеченных больных РПК без метаболических нарушений выявлена полная регрессия свидетельствует, на наш взгляд, о необходимости дальнейшего изучения состава ВВ у этой категории больных. В целом, полученные результаты свидетельствуют о важной роли циркулирующих ВВ, так CD9-позитивных, так и FABP4-позитивных (адипоцитарного происхождения) в реализации эффективности терморадиотерапии в лечении злокачественных новообразований (https://voprosyonkologii.ru/index.php/journal/article/view/3-23-molecular-mechanisms/1624).