КАРТОЧКА ПРОЕКТА ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ И ПОИСКОВЫХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ,
ПОДДЕРЖАННОГО РОССИЙСКИМ НАУЧНЫМ ФОНДОМ

Информация подготовлена на основании данных из Информационно-аналитической системы РНФ, содержательная часть представлена в авторской редакции. Все права принадлежат авторам, использование или перепечатка материалов допустима только с предварительного согласия авторов.

 

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ


Номер 23-25-00249

НазваниеРазработка метода ранней неинвазивной экспресс-диагностики злокачественных новообразований кожи с помощью 2D сканирующей конфокальной микроспектроскопии фотолюминесценции и комбинационного рассеяния света

РуководительТимурзиева Алина Борисовна, Кандидат медицинских наук

Прежний руководитель Римская Елена Николаевна, дата замены: 12.04.2023

Организация финансирования, регион федеральное государственное бюджетное учреждение науки Физический институт им.П.Н.Лебедева Российской академии наук, г Москва

Период выполнения при поддержке РНФ 2023 г. - 2024 г. 

Конкурс№78 - Конкурс 2022 года «Проведение фундаментальных научных исследований и поисковых научных исследований малыми отдельными научными группами».

Область знания, основной код классификатора 05 - Фундаментальные исследования для медицины, 05-602 - Физические методы медицинской диагностики. Томография

Ключевые словаЗлокачественные новообразования кожи, ранняя экспресс-диагностика, неинвазивная диагностика, конфокальная микроспектроскопия фотолюминесценции и комбинационного рассеяния света

Код ГРНТИ76.13.99


 

ИНФОРМАЦИЯ ИЗ ЗАЯВКИ


Аннотация
Заболеваемость населения России злокачественными новообразованиями кожи занимает одно из лидирующих мест среди всех злокачественных опухолей. Ранняя диагностика злокачественных новообразований кожи, в том числе - меланомы, базальноклеточной карциномы, плоскоклеточной карциномы - является чрезвычайно актуальной социально-значимой проблемой, что подтверждается статистикой о заболеваемости и смертности населения в Российской Федерации и за рубежом [1,2]. На ранних стадиях патологии клинические признаки новообразования недостаточно выражены и необходима дифференциальная уточняющая диагностика, с которой без инструментальных средств способны справиться только высококвалифицированные медицинские работники. Окончательный диагноз с высокой точностью определяют только при помощи гистологических исследований хирургически удалённых тканей, что может негативно сказываться на эффективности лечения [2-4]. При этом существующие неинвазивные методы и инструментальные средства, широко применяемые в онкологии, не обеспечивают достаточной эффективности ранней диагностики [2-5]. Перспективным путем решения данной проблемы является поиск новых оптических методов ранней неинвазивной диагностики и анализа строения тканей человека. Поэтому целью настоящего проекта является разработка нового метода ранней неинвазивной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований кожи. Впервые будет исследовано использование 2D сканирующей конфокальной микроспектроскопии фотолюминесценции и комбинационного рассеяния света для высокоэффективной ранней экспресс-диагностики новообразований кожи с возбуждением в видимом – ближнем инфракрасном диапазонах (405, 532, 785, 1064 нм) [5, 6]. Данный метод - единственный из существующих неинвазивных методов диагностики, который позволяет без нарушения кожных покровов выявить характерные патоморфологические признаки злокачественных новообразований кожи, в том числе и особенности гистологических типов, что значительно облегчает дифференциальную диагностику и верификацию новообразований кожи [5-8]. А также позволяет проводить прижизненную оценку морфологии новообразований кожи и оперативно определить дальнейшую тактику ведения пациента, в том числе и оптимальную схему терапии [3-8]. В настоящем проекте будет решаться комплекс научно-технических задач: проведение исследований новообразований кожи в норме и при патологии с помощью современных сканирующих конфокальных микроскопов-спектрометров фотолюминесценции и комбинационного рассеяния света в видимом-ближнем ИК-диапазонах; разработка комплекса диагностических признаков, отражающих как поверхностные, так и глубинные особенности структуры новообразования; анализ результатов экспериментальных исследований; выработка диагностических критериев. [1] LeBoit P.E. et al. World Health Organization Classification of Tumours. Pathology and Genetics of Skin Tumours. IARC Press: Lyon, 2006. 355 p. [2] Злокачественные новообразования в России в 2019 году (заболеваемость и смертность) / Под ред. А.Д. Каприна − М.: МНИОИ им. П.А. 2020. 252 с. [3] Решетов, И.В. Опухоли органов головы и шеи: технология лечения и реабилитации пациентов: реконструкция тканей / Москва: [б. и.], 2016. - 514 с. [4] Е.Н. Римская и др. Дифференциация пигментных новообразований кожи на основе цифровой обработки оптических изображений. Оптика и спектроскопия. 2019. Т. 126, № 5. С. 584–595. [5] V.V. Tuchin (Ed.), Handbook of Optical Biomedical Diagnostics. Light-Tissue Interaction, PM262, Methods, PM263, SPIE Press, Bellingham, WA, USA, 2016–1420 p. [6] Сui S et al. Rаman Spеctroscopy and Imаging for Cancer Diagnosis // J Healthc Eng.2018. [7] Rаmírez-Elías MG, González FJ. Rаman Spectroscopy for In Vivo Medical Diagnosis // Raman Spectroscopy. London: IntechOpen. 2018; [8] Tfayli A et al. Confocal Raman microspectroscopy on excised human skin: uncertainties in depth profiling and mathematical correction applied to dermatological drug permeation. J Biophotonics. 2008. V.1(2). P.140-53.

Ожидаемые результаты
НАУЧНЫЕ И ТЕХНИЧЕСКИЕ РЕЗУЛЬТАТЫ В ходе выполнения проекта будут получены следующие основные научно-технические результаты: картину распределения люминесценции по образцу и измерить спектры и кинетику люминесценции участков 1) Верифицированная база 2D карт спектров люминесценции и комбинационного рассеяния света новообразований кожи in vivo и in vitro, в норме и при патологии, при возбуждении на различных длинах волн (405, 532, 785, 1064 нм); результаты оценки состояния морфологической структуры новообразований кожи по данным этого метода; результаты выбора диагностических критериев для каждой нозологии. 2) Впервые будет определена взаимосвязь данных методом сканирующей конфокальной микроспектроскопии фотолюминесценции и комбинационного рассеяния света с данными патоморфологического исследования, на основании чего станет возможным определять гистологический тип новообразований кожи in vivo. 3) Впервые будет проведена оценка эффективности метода сканирующей конфокальной микроспектроскопии фотолюминесценции и комбинационного рассеяния света на основании показателей практической ценности диагностических критериев злокачественных новообразований кожи, объединенных в дифференциально-диагностический алгоритм (pattern analysis) для каждой нозологии. Разрабатываемый в настоящем проекте метод ранней экспресс-диагностики новообразований кожи является достаточно наукоемким и обладает существенной научной новизной. Кроме того, анализ литературных источников позволяет констатировать актуальность и научную новизну в мировом масштабе научного направления дифференциальной экспресс-диагностики новообразований кожи. Результаты выполнения настоящего проекта будут также опубликованы в высокорейтинговых отечественных и зарубежных научных изданиях в области прикладной физики, биофотоники и медицинской техники. НАУЧНАЯ ЗНАЧИМОСТЬ Высокую научную значимость будет иметь верифицированная гистологическим методом база 2D карт спектров люминесценции и комбинационного рассеяния света при возбуждении различными длинами волн новообразований кожи. Мировую научную значимость будут иметь результаты оценки взаимосвязи данного метода сканирующей конфокальной микроспектроскопии фотолюминесценции и комбинационного рассеяния света с данными патоморфологического исследования, что позволяет определять гистологический тип новообразования кожи и выбрать оптимальную схему терапии, т.к. результаты будут получены впервые. За счёт впервые разрабатываемых критериев дифференциальной диагностики злокачественных новообразований для разрабатываемого метода ранней экспресс-диагностики, полученные результаты будут иметь высокую научную значимость. Практическая значимость результатов настоящего проекта связана с решением чрезвычайно актуальной социально-значимой проблемы ранней неинвазивной экспресс-диагностики злокачественных новообразований кожи, в том числе, меланомы кожи, базальноклеточной карциномы, плоскоклеточной карциномы. Несвоевременная или неэффективная диагностика обуславливают необходимость проведения более обширных, калечащих хирургических операций, что существенно снижает качество жизни больных. С другой стороны, существенно возрастают финансовые затраты на лечение и реабилитацию больных с поздними стадиями онкологического процесса. Разрабатываемый метод ранней экспресс-диагностики в целом позволит существенно повысить эффективность ранней неинвазивной экспресс-диагностики новообразований кожи, и соответственно, повысит эффективность их лечения. Разрабатываемый метод экспресс-диагностики будет тестироваться на клинических базах ведущего медицинского учреждения Российской Федерации – Первого МГМУ им. И.М. Сеченова (Москва, Россия), что послужит успешному внедрению разрабатываемых систем в клиническую практику. Проект будет выполняться малой научной группой на базе Физического института им. П.Н. Лебедева РАН (ФИАН) (Москва, Россия) с привлечением научных партнеров, коллег из отечественных ВУЗов и институтов РАН – исследователей из Института Кластерной онкологии им. Л.Л. Левшина Первого МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский университет) (Москва, Россия) и Национального научно-исследовательского института общественного здоровья им. Н.А. Семашко (Москва, Россия). Успешному решению поставленных задач научного проекта поспособствует участие в его выполнении представителей медицинских, технических и физико-математических наук. Руководитель проекта и члены группы имеют достаточный для решения поставленных задач опыт научно-исследовательской деятельности в рассматриваемой области. Коллектив имеет опыт опубликования научных статей в высокорейтинговых изданиях Web of Science / Scopus. Результаты проекта будут соответствовать самому современному мировому уровню в рассматриваемой области знаний. РАЗВИТИЕ НАУЧНОЙ ГРУППЫ Наряду с получением научных и технических результатов выполнение проекта поспособствует развитию кадрового потенциала, материального оснащения и научных связей коллектива. A) Участие в выполнении социально-важного проекта молодых исследователей (кандидатов наук, аспирантов) позволит молодым ученым приобрести опыт проведения передовых научных исследований с использованием уникального научного оборудования, расширит кругозор молодых ученых, стимулирует их интерес к дальнейшей научной деятельности в рассматриваемой области исследований и смежных с ней дисциплинах. Б) Для успешного выполнения всех задач проекта, имеющего во многом междисциплинарных характер, коллектив исполнителей включает представителей нескольких научных организаций, специализирующихся в различных научных областях (медицина, физика, биофизика, технические науки). Выполнение проекта позволит укрепить сложившиеся научные связи и стимулирует дальнейшее сотрудничества научной группы с коллективами других научных организаций РФ (ВУЗов, институтов РАН и медицинских учреждений).


 

ОТЧЁТНЫЕ МАТЕРИАЛЫ


Аннотация результатов, полученных в 2023 году
Заболеваемость населения России злокачественными новообразованиями кожи занимает одно из лидирующих мест среди всех злокачественных опухолей. Ранняя диагностика злокачественных новообразований кожи является чрезвычайно актуальной социально-значимой проблемой, что подтверждается статистикой о заболеваемости и смертности населения в Российской Федерации и за рубежом. Исследования показывают, что лечение новообразований кожи наиболее эффективно на 1-й и 2-й стадии развития заболевания, когда пятилетняя выживаемость составляет более 80%, в сравнении с 3-4-й стадией, когда пятилетняя выживаемость – не более 20%. Микроспектроскопия фотолюминесценции и комбинационного рассеяния света - единственный из существующих неинвазивных методов диагностики, который позволяет без нарушения кожных покровов выявить характерные патоморфологические признаки злокачественных новообразований кожи, в том числе и особенности гистологических типов, что значительно облегчает дифференциальную диагностику и верификацию новообразований кожи. А также позволяет проводить прижизненную оценку морфологии новообразований кожи и оперативно определять дальнейшую тактику ведения пациента, в том числе и оптимальную схему терапии. Авторам настоящего проекта удалось в 2023 году разработать новый неинвазивный метод дифференциальной экспресс-диагностики злокачественных новообразований кожи при помощи 2D сканирующей конфокальной микроспектроскопии фотолюминесценции (ФЛ) и комбинационного рассеяния света (КР) в видимом-ближнем ИК-диапазонах на основе двух новых, не зависящих от длины волны спектральных критерия (отношения интенсивностей для полос 1302 см-1 и 1445 см-1, полос 1745 см-1 и 1445 см-1), которые связаны с различными вибрационными колебаниями липидов клеточных мембран, выбранных впервые в качестве биомаркеров, что подтверждается методом разрешения многомерных кривых (MCR-ALS) [https://nauka.tass.ru/nauka/19122029; https://rscf.ru/news/release/molekuly-zhirov-v-kletkakh-pomogut-diagnostirovat-rak-kozhi-s-95-tochnostyu/; https://new.ras.ru/activities/news/molekuly-zhirov-v-kletkakh-pomogut-diagnostirovat-rak-kozhi-s-tochnostyu-bolee-95-protsentov/]. А также 14 декабря 2023 года коллективу данного проекта за работу «Мультиспектральная дифференциальная диагностика злокачественных новообразований кожи in vitro на основе комбинационного рассеяния света» была вручена Премия им. Н.Г. Басова. Благодаря сочетанию диагностики с использованием микроспектроскопии фотолюминесценции и комбинационного рассеяния света всех образцов с постоперационной диагностикой иссеченных биотканей с помощью гистологических исследований («золотой стандарт» диагностики) позволило сформировать уникальную базу данных 2D карт спектров люминесценции и комбинационного рассеяния новообразований кожи (в ходе первого этапа уже имеется 10 базальноклеточных карцином, 9 плоскоклеточных карцином, 1 меланома, 7 папиллом и 35 образцов здоровой кожи (образцы тканей мужчин и женщин от 30 до 60 лет)), измеренных на различных длинах волн лазерного излучения (405, 532, 785 и 1064 нм) и с различной стадией инвазии. На основании верифицированной базы данных была получена взаимосвязь данного метода диагностики с данными патоморфологического исследования, что позволяет определять гистологический тип новообразования кожи (оптическая биопсия) и выбирать оптимальную схему терапии. А также были получены спектральные и структурные признаки, необходимые для дальнейшего автоматизированного анализа и дифференциальной диагностики злокачественных новообразований кожи (создание дифференциально-диагностического алгоритма (pattern analysis) для каждой нозологии). Были проанализированы и изучены КР/ФЛ спектры образцов здоровой кожи, доброкачественных новообразований (папилломы) и злокачественных новообразований (базальноклеточные и плоскоклеточные карциномы, меланома) на различных длинах волн для получения информации о их морфологической структуре с целью определения диагностических признаков для каждой нозологии. В результате данного анализа было показано, что наиболее существенные изменения в спектре комбинационного рассеяния света между здоровой кожей и опухолями наблюдались в диапазонах 1260–1340 см–1 и 1700–1800 см–1. Был проведен многоволновой (532, 785, 1064 нм) анализ in vitro верифицированной базы данных КР/ФЛ спектров. Данный анализ КР/ФЛ спектров позволил предложить два новых, не зависящих от длины волны спектральных критерия (отношения интенсивностей для полос 1302 см-1 и 1445 см-1, полос 1745 см-1 и 1445 см-1), что связано с различными вибрационными колебаниями липидов клеточных мембран, выбранных впервые в качестве биомаркеров, что было подтверждено методом разрешения многомерных кривых (MCR-ALS). Их соотношение интенсивностей продемонстрировало четкую дифференциацию между здоровой кожей и злокачественными опухолями кожи. MCR-ALS-анализ КР/ФЛ спектров новообразований кожи на всех длинах волн подтвердил правильный выбор спектральных полос для двух новых, независимых от длины волны спектральных критериев, указывая на решающий вклад липидов клеточных мембран (в частности, триолеина) в качестве биомаркеров. Эти критерии позволили нам дифференцировать здоровую кожу от базальноклеточной и плоскоклеточной карцином. Таким образом, длина волны 1064 нм обеспечивала точную дифференциацию in vitro между нормальной кожей и опухолями, тогда как возбуждение 532 нм и 785 нм позволяло надежно распознавать базальноклеточные карциномы и плоскоклеточные карциномы. Дальнейшее развитие предложенного метода в направлении совместного анализа многоволновых данных комбинационного рассеяния света поможет преодолеть недостатки использования каждой длины волны возбуждения отдельно и повысить уровень обнаружения злокачественных опухолей кожи. Таким образом, в результате выполнения данного проекта в 2023 году были получены важные результаты в области 1) разработки и апробации нового метода ранней неинвазивной экспресс-диагностики злокачественных новообразований кожи с помощью КР/ФЛ микроспектроскопии на различных длинах волн (405, 532, 785 и 1064 нм); 2) детально исследованы методы предобработки спектров люминесценции и комбинационного рассеяния света новообразований кожи на различных длинах волн и методы удаления фона флуоресценции; 3) создана уникальная верифицированная база данных 2D карт спектров люминесценции и комбинационного рассеяния света новообразований кожи in vitro и in vivo, при возбуждении на различных длинах волн (405, 532, 785 и 1064 нм); 4) были разработаны два новых, не зависящих от длины волны спектральных критерия (отношения интенсивностей для полос 1302 см-1 и 1445 см-1, полос 1745 см-1 и 1445 см-1), которые связаны с различными вибрационными колебаниями липидов клеточных мембран, выбранных впервые в качестве биомаркеров, что было подтверждено методом разрешения многомерных кривых (MCR-ALS); 5) разработан и будет далее разрабатываться дифференциально-диагностический алгоритм (pattern analysis) распознавания нормы и патологии для каждой нозологии. Научные результаты опубликованы в высокорейтинговых научных журналах International Journal of Molecular Sciences (MDPI, Q1) и Профилактическая медицина (Медиа Сфера, Q4).

 

Публикации

1. Римская Е.Н., Шелыгина С.Н., Тимурзиева А.Б., Сараева И.Н., Переведенцева Е.В., Мельник Н.Н., Кудрин К.Г., Решетов Д.Н., Кудряшов С.И. Multispectral Raman Differentiation of Malignant Skin Neoplasms In Vitro: Search for Specific Biomarkers and Optimal Wavelengths International Journal of Molecular Sciences, 24, 19, 14748 (год публикации - 2023) https://doi.org/10.3390/ijms241914748

2. Тимурзиева А.Б., Римская Е.Н., Кудрин К.Г., Шелыгина С.Н., Дуванский В.А., Рябов М.В. Ранняя неинвазивная экспресс-диагностика базально-клеточной карциномы кожи головы и шеи для повышения качества организации онкологической помощи Профилактическая медицина, 26, 11, 29‑33 (год публикации - 2023) https://doi.org/10.17116/profmed20232611129

3. - В России создали точную систему диагностики рака кожи с помощью лазера Информационное телеграфное агентство России (ИТАР-ТАСС), - (год публикации - )

4. - Молекулы жиров в клетках помогут диагностировать рак кожи с 95%-точностью Пресс-служба РНФ, - (год публикации - )

5. - В России разработали метод диагностики рака кожи при помощи лазеров Аргументы и Факты, - (год публикации - )

6. - МОЛЕКУЛЫ ЖИРОВ В КЛЕТКАХ ПОМОГУТ ДИАГНОСТИРОВАТЬ РАК КОЖИ Информация взята с портала «Научная Россия» (https://scientificrussia.ru/) НАУЧНАЯ РОССИЯ, - (год публикации - )

7. - Молекулы жиров в клетках помогут диагностировать рак кожи с точностью более 95 процентов Российская Академия Наук, - (год публикации - )

8. - Молекулы жиров в клетках помогут диагностировать рак кожи DAYLYHOTNEWS.ru, - (год публикации - )

9. - Разработан подход для выявления рака кожи на ранних стадиях с точностью не менее 95% Здравоохра­не­ние России, - (год публикации - )