КАРТОЧКА ПРОЕКТА ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ И ПОИСКОВЫХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ,
ПОДДЕРЖАННОГО РОССИЙСКИМ НАУЧНЫМ ФОНДОМ

Информация подготовлена на основании данных из Информационно-аналитической системы РНФ, содержательная часть представлена в авторской редакции. Все права принадлежат авторам, использование или перепечатка материалов допустима только с предварительного согласия авторов.

 

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ


Номер 23-25-00487

НазваниеОптические свойства паренхимы печени и желчи как прогностические признаки печеночной недостаточности и диагностические маркеры этиологии обструктивного поражения желчевыводящих путей при механической желтухе

РуководительПотапова Елена Владимировна, Кандидат технических наук

Организация финансирования, регион федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Орловский государственный университет имени И.С. Тургенева", Орловская обл

Период выполнения при поддержке РНФ 2023 г. - 2024 г. 

Конкурс№78 - Конкурс 2022 года «Проведение фундаментальных научных исследований и поисковых научных исследований малыми отдельными научными группами».

Область знания, основной код классификатора 05 - Фундаментальные исследования для медицины, 05-602 - Физические методы медицинской диагностики. Томография

Ключевые словамалоинвазивная хирургия, печень, механическая желтуха, печеночная недостаточность, биофотоника, биомедицинская инженерия, флуоресцентная спектроскопия, спектроскопия диффузного отражения, спектроскопия комбинационного рассеяния

Код ГРНТИ76.13.33


 

ИНФОРМАЦИЯ ИЗ ЗАЯВКИ


Аннотация
Дифференциальная диагностика причин механической желтухи (МЖ) остается сложной задачей, обусловленной неотложным состоянием больного, требующим срочного врачебного вмешательства. Раннее выявление истинной причины обструкции желчевыводящих путей приводит к своевременному определению тактической позиции в ведении пациента и определяет прогноз для здоровья и жизни больного. Одним из частых осложнений МЖ, являющимся основной причиной летального исхода, является печеночная недостаточность (ПН). В связи с этим повышение качества дифференциальной диагностики МЖ и своевременное определение и прогнозирование развития ПН занимают важное место в проблеме улучшения результатов лечения больных с обструкцией желчевыводящих путей. Настоящий проект направлен на исследование паренхимы печени и желчи с помощью методов оптической диагностики. Предполагается, что изменения спектров КР желчи и перфузионно-метаболических характеристик печеночной паренхимы могут выступить в качестве прогностических признаков ПН и причины обструкции желчевыводящих путей при МЖ. Желчь как непосредственный продукт жизнедеятельности гепатоцитов является маркером их функционального состояния. Поэтому желчь, полученная при проведении декомпрессии желчевыводящих путей, может служить основой для быстрой и высокочувствительной диагностики. Рамановская сигнатура желчи отражает её биохимический состав, который в свою очередь зависит от состояния печеночной паренхимы и этиологии патологического процесса. Спектроскопия комбинационного рассеяния (КР) позволят исследовать специфику изменения биохимический состава в динамике. Наличие антеградного (перкутанного) доступа позволяет ввести в печеночную паренхиму и желчевыводящие протоки оптоволоконный зонд и оценить функциональное состояние печени. Изучение процессов тканевого и клеточного метаболизма возможно проводить на основе методов флуоресцентной спектроскопии (ФС) и спектроскопии диффузного отражения (СДО). Основной целью проекта является проведение комплексных исследований взаимосвязи причин нарушения проходимости желчевыводящих путей и степени выраженности ПН с изменением биохимического состава желчи и функционального состояния печеночной паренхимы методами оптической диагностики. В этой связи задачами фундаментального исследования являются: 1. Исследование влияния этиологии МЖ и степени ПН на спектры КР желчи in vitro. 2. Исследование влияния степени ПН на тканевую сатурацию печеночной паренхимы, а также, содержание метаболических коферментов (NADH, FAD), свободных жирных кислот, билирубина in vivo методами ФС и СДО. 3. Исследование влияния антеградной декомпрессии желчевыводящих путей на развитие ПН с оценкой биохимического состава желчи методом КР. 4. Разработка алгоритмов обработки данных на основе интеллектуальных систем. 5. Разработка методологической основы для проведения диагностической процедуры на основе методов оптической диагностики, позволяющей определять этиологию МЖ и оценивать степень ПН. В основу разработки лягут теоретические и экспериментальные данные, а также выявленные причинно-следственные связи, полученные на основе комплексного анализа биохимических показателей крови, солевого состава желчи и оптических сигналов. Проект позволит получить новые фундаментальные знания о спектрах КР желчи, которые будут положены в основу новых диагностических критериев для разработки методологической базы point-of-care технологии определения этиологии МЖ и оценки степени и прогноза прогрессирования ПН. Будут получены новые знания о связи оптических характеристик с уровнем ПН. Предполагается, что будут получены новые знания о влиянии декомпрессии желчевыводящих путей на течение ПН. Предлагаемый в проекте подход имеет первостепенное значение при определении стратегии лечения в каждом конкретном клиническом случае и играет решающую роль в переходе к персонализированной медицине.

Ожидаемые результаты
В ходе выполнения проекта планируется получение результатов, соответствующих мировому уровню исследований в области разработки инструментария на основе биомедицинской оптики для прижизненной диагностики in vivo и in vitro. Повышение качества дифференциальной диагностики МЖ и своевременное определение и прогнозирование развития ПН занимают важное место в проблеме улучшения результатов лечения больных с обструкцией желчевыводящих путей. Предполагается, что изменения биохимического состава желчи, зарегистрированные методом КР, а также изменения тканевой сатурации печеночной паренхимы, содержание метаболических коферментов (NADH, FAD), свободных жирных кислот, билирубина, зарегистрированные методами СДО и ФС могут выступить в качестве прогностических признаков ПН и причины обструкции желчевыводящих путей при МЖ. Будут проведены исследования желчи in vitro, полученной в процессе проведения антеградной декомпрессии желчевыводящих путей у пациентов с разными диагнозами и в динамике процесса декомпрессии у одного и того же больного методом КР. Будет изучено изменение тканевой сатурации печеночной паренхимы, содержание метаболических коферментов (NADH, FAD), свободных жирных кислот, билирубина в паренхиме печени с помощью тонкоигольного оптоволоконного зонда и мультимодального устройства с методами ФС и СДО в процессе проведения антеградной декомпрессии у пациентов с разной этиологической природой МЖ и степенью выраженности ПН. Будут разработаны методы классификации причин МЖ на основе анализа спектров КР желчи. Будут разработаны алгоритмы определения степени ПН на основе оптической диагностики печени и желчи, а также клинико-лабораторных данных пациентов. Будут разработаны рекомендации по прогнозированию и корректировке осложнений при минимально инвазивных хирургических вмешательствах по поводу МЖ. Новые фундаментальные знания, полученные в ходе выполнения проекта, лягут в основу разработки point-of-care технологии определения этиологии МЖ и оценки степени ПН, а, в перспективе, корректировки рекомендаций по проведению минимально инвазивных вмешательств на желчевыводящих путях. По результатам работы над проектом будет рассмотрена возможность осуществить внедрение разработанной методологии в производственную деятельность ООО «БИОФОТОНИКА», ООО НПП «ЛАЗМА», а также в медицинскую практику БУЗ Орловской области «Орловская областная клиническая больница» (в частности, в отделение рентгенохирургических методов диагностики и лечения). Полученные передовые новые знания и методики будут использованы в учебном процессе ОГУ имени И.С. Тургенева для подготовки бакалавров и магистров по направлению «Биотехнические системы и технологии» и специалистов по направлению «Лечебное дело». Проведение предложенных фундаментальных научных исследований позволит получить и развить компетенции, способные в дальнейшем обеспечить развитие высокотехнологичного конкурентоспособного медицинского оборудования в РФ. Результаты, полученные в ходе проекта, будут опубликованы в ведущих российских и международных журналах, индексируемых в Russian Science Citation Index, Web of Science и Scopus и доведены до сведения мировой научной общественности на всероссийских и международных форумах по тематике проекта.


 

ОТЧЁТНЫЕ МАТЕРИАЛЫ


Аннотация результатов, полученных в 2023 году
За отчетный период получены следующие результаты: 1. Разработаны способы обработки сигналов флуоресцентной спектроскопии и спектроскопии комбинационного рассеяния, алгоритм разделения сигналов флуоресцентной спектроскопии и комбинационного рассеяния. Обработка сигнала флуоресцентной спектроскопии включала последовательные этапы сглаживания полученных спектров, их нормирование и нелинейную процедуру деконволюции на основе алгоритма Левенберга-Марквардта для вычисления комбинаций гауссовых кривых, отражающих вклад отдельных флуорофоров в общий сигнал, полученный от ткани печени. Для вычитания флуоресцентного фона и выделения пиков комбинационного рассеяния производилось построение спектра флуоресценции методом полиноминальной аппроксимации полученных данных. Сглаживание исходных спектров без подавления пиков комбинационного рассеяния проводилось фильтрацией методом Савицкого-Голея. 2. Сформирован научно обоснованный набор параметров, определяемых методами флуоресцентной спектроскопии и спектроскопии комбинационного рассеяния для определения функционального состояния печени. Деконволюция спектров общей флуоресценции производилась на ансамбль флуоресцентных спектров следующих выделенных компонент: фибриллярные белки (коллаген и эластин); NAD(P)H; жирные кислоты; витамин А; билирубин (два пика на длинах волн 520 и 570 нм); флавины; липофусцин; протопорфирин IX; производные порфирина. Для оценки выделительной функции печени в спектрах комбинационного рассеяния желчи анализировались пики, характерные для билирубина: 1254 см-1 и 1615 см-1. 3. Создан пакет программ для обработки экспериментальных сигналов. 4. Набраны первые клинические данные в процессе комплексных клинических исследований желчи in vitro и печени in vivo. Исследование проводилось на базе отделения рентгенохирургических методов диагностики и лечения Орловской областной клинической больницы (г. Орел, Россия). В исследовании приняли участие пациенты с диагнозом «механическая желтуха». Измерения спектров флуоресцентной спектроскопии проводились во время первичной антеградной декомпрессии желчевыводящих путей под ультразвуковым и рентгеновским контролем. Забор образцов желчи для исследования методом спектроскопии комбинационного рассеяния при выполнении антеградной декомпрессии желчевыводящей системы по пункционной игле и в динамике – по дренажному катетеру из общего желчного протока. 5. Выявлены диагностические и прогностические маркеры развития печеночной недостаточности у больных с механической желтухой на основе предварительных результатов исследования печеночной паренхимы методом флуоресцентной спектроскопии и желчи методом спектроскопии комбинационного рассеяния. Полученные результаты методом флуоресцентной спектроскопии отражают изменения, связанные со сдвигами в содержании основных флуорофоров, характеризующих дисфункцию гепатоцитов, вызванную накоплением билирубина и желчных кислот и последующим нарушением утилизации кислорода. Вклад NAD(P)H, флавинов и билирубина, а также витамина А может быть использован для дальнейших исследований в качестве перспективных диагностических и прогностических маркеров течения печеночной недостаточности. Оценку восстановления выделительной функции печени у пациентов с синдромом механической желтухи можно производить по амплитуде линий комбинационного рассеяния билирубина. 6. Получены следующие результаты интеллектуальной деятельности: опубликовано 13 работ, в том числе 2 публикации из баз данных Scopus и Web of Science (1 из которых в журнале уровня Q1). О результатах проекта доложено на следующих конференциях: 1. XII Конгресс молодых ученых, Санкт-Петербург, Россия (3-6 апреля 2023). 2. Семинар «Современные тренды в биофотонике – 2023», Нижний Новгород, Россия (3-5 июля 2023). 3. Научно-практическая конференция с международным участием «Лазерная медицина в России: прошлое, настоящее, будущее», посвященная 100 - летию Олега Ксенофонтовича Скобелкина, Москва, Россия (16 июня 2023). 4. Международная конференция «Laser application in life sciences (LALS 2023)», Мугла, Турция (15-17 октября 2023). 5. XV Съезд хирургов России, Москва, Россия (24-26 октября 2023). 6. Всероссийская конференция «Современные методы исследования в клеточной биологии и медицине», Орел, Россия (16-17 ноября 2023). Все заявленные в проекте работы выполнены в полном объеме: проведены запланированные исследования, выполнены показатели по публикационной активности и обнародованию результатов на конференциях. Сведения о данном проекте (объявления, новости, опубликованные статьи, постеры, фотографии экспериментальных исследований и т.д.) публикуются на сайте научно-технологического центра биомедицинской фотоники ФГБОУ ВО «Орловский государственный университет имени И.С. Тургенева», а также в соответствующих аккаунтах в социальных сетях по адресам: http://www.bmecenter.ru https://www.youtube.com/user/BmeCenterOrel http://t.me/bpbme Ссылки на информационные ресурсы в сети Интернет, посвященные проекту: 1. Публикация в журнале Lasers in Surgery and Medicine (Q1, IF 2.703) (https://www.bmecenter.ru/ru/node/763). 2. Сотрудники ОГУ имени И.С. Тургенева приняли участие в молодежной конференции «Современные тренды в хирургии» (https://oreluniver.ru/media/news/show/1/18380). 3. Участие в конференции «Лазерная медицина в России: прошлое, настоящее, будущее» (https://oreluniver.ru/media/news/show/1/19385). 4. Участие в международной конференции «Laser application in life sciences (LALS 2023)» (15-17 октября 2023 г., г. Мугла, Турция) (https://bmecenter.ru/ru/node/787). 5. Ученые ОГУ имени И. С. Тургенева выступили на семинаре «Современные тренды в биофотонике 2023» в Нижнем Новгороде (https://oreluniver.ru/media/news/show/1/19488). 6. В Орле улучшают диагностику печеночной недостаточности (https://t.me/minobrnaukiofficial/6812).

 

Публикации

1. Кандурова К.Ю. Спектрофотометрические исследования оптических характеристик печени и желчи в диапазоне 350-1300 нм Фундаментальные и прикладные проблемы техники и технологии, №5 (361), 117-126 (год публикации - 2023) https://doi.org/10.33979/2073-7408-2023-361-5-117-126

2. Кандурова К.Ю., Сумин Д.С., Мамошин А.В., Потапова Е.В. Deconvolution of the fluorescence spectra measured through a needle probe to assess the functional state of the liver Lasers in Surgery and Medicine, 55: 690–701 (год публикации - 2023) https://doi.org/10.1002/lsm.23695

3. Потапова Е.В., Приземин В.Н., Сумин Д.С., Мамошин А.В. Оценка содержания билирубина в печеночной желчи пациентов с механической желтухой методом спектроскопии комбинационного рассеяния Оптика и спектроскопия, том 131, вып. 8 (год публикации - 2023) https://doi.org/10.61011/OS.2023.08.56310.5436-23

4. Кандурова К.Ю., Сумин Д.С., Мамошин А.В., Потапова Е.В. Спектральный состав флуоресценции печени у пациентов с механической желтухой Современные методы исследования в клеточной биологии и медицине: сборник трудов Всероссийской конференции, с. 41 (год публикации - 2023)

5. Кандурова К.Ю., Сумин Д.С., Мамошин А.В., Потапова Е.В. Анализ состава спектров флуоресценции для оценки функционального состояния печени пациентов с синдромом механической желтухи Сборник тезисов Всероссийской научной конференции с международным участием «Невская фотоника – 2023», с.171 (год публикации - 2023)

6. Кандурова К.Ю., Сумин Д.С., Палалов А.А., Серёгина Е.С., Мамошин А.В., Потапова Е.В. Исследование оптических свойств печени крыс и желчи человека в диапазоне длин волн 350–1300 нм Медицинская физика, № 2, 53-54 (год публикации - 2023)

7. Потапова Е.В., Кандурова К.Ю., Приземин В.Н., Сумин Д.С., Мамошин А.В. Методы оптической спектроскопии для анализа функционального состояния печени пациентов с синдромом механической желтухи Современные тренды в биофотонике – 2023: сборник тезисов докладов / Федер. иссл. центр Ин-т приклад. физики РАН, с. 12 (год публикации - 2023)

8. Потапова Е.В., Кандурова К.Ю., Приземин В.Н., Сумин Д.С., Мамошин А.В. Optical spectroscopy in the assessment of the functional state of the liver Book of Abstracts 17th INTERNATIONAL CONFERENCE ON LASER APPLICATIONS IN LIFE SCIENCES, p.10 (год публикации - 2023)

9. Потапова Е.В., Мамошин А.В., Дрёмин В.В., Жеребцов Е.А., Кандурова К.Ю., Шуплецов В.В., Сумин Д.С., Дунаев А.В. Устройство флуоресцентно-отражательной спектроскопии в диагностике заболеваний печени Медицинская физика, № 2, 85 (год публикации - 2023)

10. Приземин В.Н., Сумин Д.С., Мамошин А.В., Потапова Е.В Спектроскопия комбинационного рассеяния желчи в оценке функционального состояния печени при механической желтухе после антеградной декомпрессии Сборник тезисов Всероссийской научной конференции с международным участием «Невская фотоника – 2023», с. 278 (год публикации - 2023)

11. Приземин В.Н., Сумин Д.С., Мамошин А.В., Потапова Е.В. Оценка выделительной функции печени при синдроме механической желтухи на основе анализа спектров комбинационного рассеяния желчи Современные методы исследования в клеточной биологии и медицине: сборник трудов Всероссийской конференции, с. 49 (год публикации - 2023)

12. Приземин В.Н., Сумин Д.С., Потапова Е.В., Мамошин А.В. Раман спектроскопический анализ желчи пациентов с синдромом механической желтухи на фоне антеградной декомпрессии желчевыводящих путей Сборник тезисов докладов XII Конгресса молодых ученых ИТМО. Электронное издание. – СПб: Университет ИТМО, - (год публикации - 2023)

13. Сумин Д.С., Мамошин А.В., Потапова Е.В., Кандурова К.Ю., Приземин В.Н., Руднев В.О. Диагностика печеночной недостаточности у пациентов с синдромом механической желтухи XV Съезд хирургов России: сборник тезисов, c. 337-338 (год публикации - 2023)

14. - Участие во Всероссийской научной конференции с международным участием «Невская фотоника» НТЦ биомедицинской фотоники, 16.10.2023 (год публикации - )

15. - В Орле улучшают диагностику печеночной недостаточности ТГ-канал Минобрнауки России, 08.12.2023 (год публикации - )

16. - Участие в конференции «Лазерная медицина в России: прошлое, настоящее, будущее» ОГУ имени И.С. Тургенева, 21.06.2023 (год публикации - )

17. - Ученые ОГУ имени И. С. Тургенева выступили на семинаре "Современные тренды в биофотонике 2023" в Нижнем Новгороде ОГУ имени И.С. Тургенева, 07.07.2023 (год публикации - )

18. - Публикация в журнале Lasers in Surgery and Medicine (Q1, IF 2.703) НТЦ биомедицинской фотоники, 12.06.2023 (год публикации - )

19. - Сотрудники ОГУ имени И.С. Тургенева приняли участие в молодежной конференции «Современные тренды в хирургии» ОГУ имени И.С. Тургенева, 03.04.2023 (год публикации - )

20. - Участие в международной конференции “Laser application in life sciences (LALS 2023)” (15-17 октября 2023 г., г. Мугла, Турция) НТЦ биомедицинской фотоники, 23.10.2023 (год публикации - )