КАРТОЧКА ПРОЕКТА ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ И ПОИСКОВЫХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ,
ПОДДЕРЖАННОГО РОССИЙСКИМ НАУЧНЫМ ФОНДОМ

Информация подготовлена на основании данных из Информационно-аналитической системы РНФ, содержательная часть представлена в авторской редакции. Все права принадлежат авторам, использование или перепечатка материалов допустима только с предварительного согласия авторов.

 

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ


Номер проекта 20-76-00025

Название«Борьба в кишечнике»: факторы вирулентности бактерий Bacillus thuringiensis и защитные реакции насекомых

Руководитель Гризанова Екатерина Валерьевна, Кандидат биологических наук

Организация финансирования, регион федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Новосибирский государственный аграрный университет" , Новосибирская обл

Конкурс №49 - Конкурс 2020 года «Проведение инициативных исследований молодыми учеными» Президентской программы исследовательских проектов, реализуемых ведущими учеными, в том числе молодыми учеными

Область знания, основной код классификатора 06 - Сельскохозяйственные науки; 06-102 - Агрономия

Ключевые слова Факторы вирулентности, биолоическая защита растений, инфекционный процесс, бактерии, Bacillus thuringiensis, антибактериальная система

Код ГРНТИ68.37.13


 

ИНФОРМАЦИЯ ИЗ ЗАЯВКИ


Аннотация
Биологические препараты на основе бактерий B. thuringiensis давно и широко применяются для защиты сельскохозяйственных растений от насекомых вредителей. Формирование устойчивости насекомыми к биологическим препаратам истощает арсенал средств биологической защиты растений. При этом интерес к использованию биологических инсектицидов только возрастает (Butt et al., 2016, Brooke Borel, NATURE, 2017). Успешное внедрение бактериальных инсектицидов зависит от подбора вирулентных штаммов и разработки инструментов /стратегий, которые снижают защиту хозяина и, в свою очередь, ускоряют развитие инфекции. Понимание взаимодействия хозяев и патогенов, особенно событий, происходящих в кишечнике, имеет важное значение, поскольку это не только поможет в выборе штаммов бактерий, но также поможет в поиске агентов, ослабляющих организм насекомых. Патогенные бактерии существуют в постоянно изменяющейся среде в организме насекомого в течение инфекционного процесса. Они вынуждены адаптироваться, изменяя экспрессию генов в ответ на полученные сигналы. Бактерии B. thuringiensis являются распространенным возбудителем бактериальных болезней насекомых в природе и способны провести весь инфекционный цикл в организме насекомых. Инфекционный (биотрофный) и сапрофитный (некротрофный) период жизнедеятельности бактерий БТ, а также спорообразование находятся под контролем систем, называемых «чувство плотности сообества» (Quorum sensing), которые переключаются в течение инфекционного процесса. При заражении насекомых (стадия биотрофная или инфекционная) происходит активация плеотропного регулятора PlcR- papR, ответственного за активацию генов факторов вирулентности бактерий (протеазы, фосфолипазы, токсины и т.д.). Попадая в кишечник, бактерии сталкиваются с механическим внешним барьером, защищающим организм насекомых, перетрофической мембраной. Кроме того, в просвет кишечника могут синтезироваться антимикробные белки иммунной системы. При повреждении эпителия кишечника запускаются процессы перекисного окисления липидов, что приводит к генерации активированных кислородных метаболитов, которые токсично влияют, как на бактериальные клетки, так на ткани самого организма. Таким образом, бактерии и насекомые вступают в «борьбу в кишечнике». После гибели насекомых другой плеотропный регулятор NprR- NprХ активирует некротрофную (сапротрофную) жизненную стадию бактерий, позволяющую бактериям выжить в погибшем организме, благодаря синтезу литических ферментов и бактериоцинов. В итоге, бактериальные клетки буду образовывать споры, чтобы сохраниться в неблагоприятных условиях окружающей среды. Спорообразование находится под контролем регулятора спорообразования Spo0A-P. Данные системы контроля уровня экспрессии генов были открыты сравнительно недавно и в основном изучаются в фундаментальных работах, посвященных росту и размножению бактерий (Agaisse et al., 1999, Salamitou, et al., 2000, Buisson et al., 2019). В то время как эти новейшие открытия могут помочь ответить на вопросы, связанные с формированием устойчивости у насекомых к бактериям Bacillus thuringiensis, а также могут служить основой для совершенствования биопрепаратов на основе данных бактерий. Проект направлен на поиск потенциальных биологически активных молекул (факторов вирулентности) энтомопатогенных бактерий Bacillus thuringiensis, а также на определение ключевых фактов резистентности насекомых к данным бактериям для развития биологических методов контроля численности насекомых вредителей. Будут получены данные об активности синтеза факторов вирулентности и гидролитических ферментов бактерий B. thuringiensis непосредственно при развитии бактерий в кишечнике насекомых. Будут изучены защитные реакции в кишечнике, а также ответ иммунной системы у насекомых при заражении бактериями B. thuringiensis, и мутантными штаммами бактерий B. thuringiensis, с заблокированной системой продукции факторов вирулентности и литических ферментов. Для реализации поставленных задач будут использованы классические микробиологические и современные молекулярно-генетические, биохимические и иммунологические методы.


 

ОТЧЁТНЫЕ МАТЕРИАЛЫ


 

Публикации

1. Гризанова Е.В., Коатес К.Д, Бутт Т.М., Дубовский И.М. RNAi-mediated suppression of insect metalloprotease inhibitor (IMPI) enhances Galleria mellonella susceptibility to fungal infection Developmental & Comparative Immunology (год публикации - 2021)

2. Гризанова Е.В., Крыцына Т.И., Калмыкова Г.В., Соколова Э.С, Аликина Т.Ю, Кабилов М., Коатс К.Д., Дубовский И.М. Virulent and necrotrophic strategies of Bacillus thuringiensis in susceptible and resistant insects, Galleria mellonella Academic press, Volume 175, February 2023, 105958 (год публикации - 2023)
10.1016/j.micpath.2022.105958


 

Публикации

1. Гризанова Е.В., Коатес К.Д, Бутт Т.М., Дубовский И.М. RNAi-mediated suppression of insect metalloprotease inhibitor (IMPI) enhances Galleria mellonella susceptibility to fungal infection Developmental & Comparative Immunology (год публикации - 2021)

2. Гризанова Е.В., Крыцына Т.И., Калмыкова Г.В., Соколова Э.С, Аликина Т.Ю, Кабилов М., Коатс К.Д., Дубовский И.М. Virulent and necrotrophic strategies of Bacillus thuringiensis in susceptible and resistant insects, Galleria mellonella Academic press, Volume 175, February 2023, 105958 (год публикации - 2023)
10.1016/j.micpath.2022.105958