Аннотация результатов, полученных в 2024 году
Лейомиомы являются доброкачественными опухолями, возникновение которых, в большинстве случаев, не угрожает жизни пациентки. Тем не менее, распространенность лейомиоматоза – им страдает до 50% женщин детородного возраста и до 70% женщин в менопаузе – придает борьбе с этим заболеванием высокую социальную значимость. Узлы лейомиомы существенно снижают качество жизни пациентки: вызывают боли, постоянные кровотечения, вызывают обструкцию внутренних органов. Но особенно опасным наличие миом становится в период беременности. Они механически препятствуют зачатию и росту плодного пузыря. Под действием прогестерона, концентрация которого сильно возрастает в период беременности, их рост в этот время резко ускоряется. В результате узлы лейомиом вызывают деформацию матки и формируют спайки с соседними органами, нарушающие растяжение органа во время вынашивания и его сокращения во время родов. Именно во время беременности и родов лейомиомы часто создают непредвиденные проблемы вплоть до жизнеугрожающих состояний (разрыв матки), которые могут потребовать прерывания беременности или преждевременного кесарева сечения. При определенных типах наследственности рецидивирующее возникновение новых узлов лейомиом делает успешное окончание беременности практически невозможным. Таким образом, создание эффективного средства профилактики лейомиом является необходимым условием деторождения для 5% потенциальных матерей. Исполнителями проекта была высказана гипотеза о возможности создания профилактической вакцины для снижения интенсивности рецидивирования лейомиоматоза у женщин детородного возраста. Гипотеза основана на результатах статистического исследования, показавшего сниженный риск возникновения лейомиом у женщин, имеющих 5 и более детей. Мы предположили, что этот эффект обусловлен иммунизацией матерей антигенами плода, который усиливается при многократной реиммунизации, которой подвергаются многодетные матери. Гипотеза была частично проверена путем анализа опубликованных данных протеомных и транскриптомных исследований узлов лейомиом, которые позволили выявить 6 онкомаркеров, характерных для лейомиом, которые представляют собой эмбриональные белки, полностью отсутствующие во взрослом организме. В рамках проекта эти шесть антигенов Satb2, Pcp4, Wif1, Mmp11, Mmp16 и Adam12 кроличьего происхождения были наработаны в E. coli и использованы для иммунизации кроликов. Было показано, что против всех шести антигенов могут быть получены высокие титры антител, что, однако, не приводит к возникновению у иммунизированных животных патологий аутоиммунной этиологии. Таким образом, получены доказательства того, что все белки-кандидаты не подвержены действию системы индукции толерантности к аутоантигенам, и они могут рассматриваться в качестве кандидатов для испытания в качестве вакцинных субстанций. Одновременно были проведены эксперименты по непосредственному выявлению в сыворотках крови много рожавших женщин антител к белкам-онкомаркерам лейомиом. Для этого был использован метод иммуноблоттинга с использованием материала узлов лейомиом, предварительно разделенных с помощью двумерного электрофореза. В качестве сывороток сравнения использовались сыворотки пациенток с узлами лейомом Med12+ и Med12- типов, а также сыворотки мужчин, которые не имеют вероятности контакта с материалом узлов лейомом. Были выявлены белки-кандидаты с молекулярными массами 71, 60, 53, 48, 46 и 45 кДа, которые на правлены на идентификацию с помощью масс-спектрометрии MALDI-TOF. Исследования методом MALDI-TOF после обработки белков трипсином позволили сформировать следующий перечень белков-кандидатов, которые могут рассматриваться в качестве высокоспецифичных онкомаркеров лейомиом: Название GenBank Acc # MW Описание FUBP2 Q92945 73,114 Far upstream element-binding protein 2 Эмбриональный фактор транскрипции, есть только в недифференцированных клетках LPP Q93052 65,746 Lipoma-preferred partner Транскрипционный фактор, ген содержит точку перестройки генома, активирующуюся в доброкачественных липомах DPYL3 Q14195 61,963 Dihydropyrimidinase-related protein 3 Фактор роста аксонов, фосфопротеин, экспрессируется в сердце и скелетных мышцах, головном мозге, поджелудочной железе, почках, печени и плаценте PALLD Q8WX93 150,56 Palladin Гомолог коннектина, экспрессируется в яичка, яичниках и ободочной кишке FINC P02751 272,32 Fibronectin ACTH P63267 41,876 Actin, gamma-enteric smooth muscle XRCC6 P12956 69,842 X-ray repair cross-complementing protein 6 ДНК-связывающий белок (возможно, хеликаза)), аутоантиген комплекса р70/р80, против которого образуются антитела при СКВ, болезни Гревса и других аутоиммунных заболеваниях EF2 P13639 95,337 Translation elongation factor 2 PRELP P51888 43,809 Prolargin Белок опухолевой капсулы, продуцируется опухолевыми фибробластами, участвует в аномальном ремоделировании ЦНС DDX1 Q92499 82,431 ATP-dependent RNA helicase DESM P17661 53,535 Desmin Белок мышчных промежуточных филаментов, входит в Z-диски, отвечает со соединение дисков с плазматической мембраной PP1R7 Q15435 41,564 Protein phosphatase 1 regulatory subunit 7 Фосфопротеин, регулятор транскрипции, экспрессируется во всех тканях человека K1C18 P05783 48,057 Keratin, type I cytoskeletal 18 LUM P51884 38,429 Lumican Малый интерстициальный протеогликан, входит в ЕСМ миокардаа, аорты, скелетных мышц, межпозвоночных дисков ITIH1 P19827 101,39 Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H1 LMNA P02545 74,139 Prelamin-A/C Белок ядерной мембраны, имеет домен, связывающий промежуточные филаменты TES Q9UGI8 47,996 Testin Онкосупрессор, работающий путем подавления транскрипции генов-мишеней в результате метилирования CpG-островков