Аннотация результатов, полученных в 2024 году
В рамках осуществления командировок был проведён сбор паразитологического и малакологического материала на юге Амурской области и в Приморском крае. Собрано не менее 1000 видов паразитов и не менее 300 первых промежуточных хозяев. Для части собранных образцов моллюсков и трематод получены и проанализированы первичные нуклеотидные последовательности. Несмотря на то, что китайская двуустка входит в список эпидемиологически наиболее важных зоонозных паразитов и является эндемиков юга Дальнего Востока России первые данные о генетической изменчивости этого паразита появились только в работах Татоновой с соавторами в 2012-2014 гг (Tatonova et al., 2012, 2013, 2014). В 2021 году Кинкар с соавторами (Kinkar et al., 2021) опубликовали работу посвященную генетической изменчивости C. sinensis на территории Восточной и Юго-Восточной Азии, в которой была изучена выборка паразита, состоящая из 183 образцов (149 образцов были собраны на юге Китая, 22 – на севере этой же страны и 12 образцов на территории Приморского края). В настоящей работе продолжено исследование и расширена выборка для Clonorchis sinensis, получены молекулярные данные для паразита из 7 локалитетов на территории России (Приморский и Хабаровского края, Амурская область) и Вьетнама. Анализ популяционной структуры C. sinensis проведен с использованием двух полноразмерных нуклеотидных последовательностей генов cox1 и cytb мтДНК. Гаплотипическая сеть, построенная на основе полученных нами последовательностей и данных NCBI , показала, что существует обмен гаплотипов возбудителя клонорхоза между территориями Вьетнама, Южной Кореи и Китая. При этом миграционные маршруты C. sinensis, циркулирующего в России, ограничены только территорией Китая. Распределение разных генетических вариантов в регионе совпадает с современным водоразделом, а наличие общих между Китаем и Россией гаплотипов обусловлено непосредственной связью части жизненных стадий паразита с бассейном реки Амур. В противоположность этому при анализе популяционной структуры другого представителя описторхид (Metorchis ussuriensis) из 8 локалитетов на территории юга Дальнего Востока России (Приморский и Хабаровского края, Амурская область) не выявлена архитектура популяции. Для анализа использованы полноразмерные нуклеотидные последовательности гена сох1 мтДНК. Стоит отметить, что только между двумя выборками, находящимися на расстоянии почти 1500 км выявлен статически значимый уровень индекса фиксации. Также полученные данные показали, что центр формирования вида находился в районе реки Уссури. Основным фактором, снижающим генетическую структуру для данного вида, является наличие мобильного хозяина – рыбоядных птиц, которые могут мигрировать в разных направлениях на исследуемой территории и нивелируют наличие разрыва между бассейнами рек Амур и Раздольная, которые были разделены в среднем плейстоцене. Помимо этого, в настоящем исследовании мы уточнили границы распространения Metorchis ussuriensis. Помимо ранее выявленной выборки в оз. Магдыковое в ПК, вид также циркулирует на территории Среднего Амура (Клешенское, Долгое, Безымянное, Бира). Восточная граница распространения вида – оз. Мылки (Нижний Амур). На данный момент южной границей ареала можно считать приток р. Раздольная (р. Комаровка). В настоящей работе были впервые использованы метацеркарии рода Metagonimus в изучаемом регионе. Мы проанализировали частичные нуклеотидные последовательности гена 28S рРНК, включая 31 новую последовательность. На основе полученных данных для видов M. suifunensis и M. pusillus были расширены ареалы и оценен уровень их распространенности. Как и ранее, наиболее распространенным видом оказался M. suifunensis. Также в ходе анализа мы получили две не идентифицированные до вида особи, которые, вероятно, могут считаться новыми криптическими видами, для описания которых требуется постановка жизненного цикла и описание морфологических особенностей взрослых особей. До настоящего исследования на территории юга Дальнего Востока России описаны два вида рода Metagonimus, M. suifunensis и M. pusillus. По данным прошлых исследований, распространённым видом в исследуемом регионе является M. suifunensis, обитающий в Хабаровском крае (р. Одыр, р. Анюй), Еврейской автономной обрасти (р. Бира), Приморском крае (Комиссаровка, Комаровка, Сорочевка, Одарка, Илистая, Арсеньевка), Амурской обрасти (р. Белая), а известным ареалом для M. pusillus считается р. Большая Уссурка. В настоящем исследовании для этих паразитов были найдены новые локалитеты: для M. suifunensis – р. Цыпа в Хабаровском крае, для M. pusillus – р. Илистая в Приморском крае и р. Бира в Еврейской Автономной области. Образцы, не идентифицированные нами до вида, Metagonimus sp. 1, из реки Илистая в Приморском крае, и Metagonimus sp. 2, из реки Одыр в Большехехцирском заповеднике в Хабаровском краеявляются новыми криптическими видами, поскольку дистанции между выявленными последовательностями находятся в диапазоне межвидовых отличий (Pornruseetairatn et al., 2016; Shumenko et al., 2017; Tatonova et al., 2018). Но для того, чтобы достоверно определить видовую принадлежность этих представителей, требуются также данные по маркерам мтДНК и по морфологии различных стадий жизненного цикла. Вероятно, эти данные позволили бы обнаружить большее количество видов рода Metagonimus. Тем не менее, полученные результаты позволили уточнить видовой состав рода Metagonimus на территории юга Дальнего Востока России. На основе анализа молекулярно-генетических данных определено, что представители рода «Parajuga» являются видом Koreoleptoxis amurensis. Данные моллюски указаны как первые промежуточные хозяева эпидемиологически значимых трематод (например, Metagonimus suifunensis). Для этого вида получены нуклеотидные последовательности гена сох1 мтДНК для образцов, собранных на территории Приморского и Хабаровского краев, Амурской области, а также Еврейской автономной области. Построенная гаплотипическая сеть имеет простую звездообразную структуру, в которой большинство образцов вошли в анцестральный гаплотип. Тем не менее, стоит отметить отсутствие общих гаплотипов второго и следующего порядка для всех изученных локалитетов. Также выявлено несколько образцов в Приморском и Хабаровском краях, которые имеют существенные генетические отличия от всех изученных моллюсков, но эти отличия находятся на внутривидовом уровне.