Аннотация результатов, полученных в 2024 году
Значительная часть пациентов с инфарктом миокарда (ИМ) сталкивается с повторными неблагоприятными сердечно-сосудистыми событиями (MACE, major adverse cardiac events). В течение 2 лет после перенесенного ИМ MACE реализуются у 25% больных, а через 4 года – почти у 40% (Steen D., 2022). Для объяснения развития вторичных MACE была выдвинута концепция «остаточного воспалительного риска» (Liberale L., 2021). Крупные рандомизированные исследования (CANTOS, 2017; COLCOT, 2019 и LoDoCo2, 2020) впервые продемонстрировали эффективность противовоспалительных препаратов в профилактике MACE (Liberale L., 2021) и выделили NOD-, LRR- и pyrin domain-containing protein 3 (NLRP3) инфламмасому как эффективную терапевтическую мишень для снижения риска развития ишемической болезни сердца (ИБС) и ее осложнений. Инфламмасомы представляют собой крупные внутриклеточные многобелковые комплексы, опосредующие активацию каспазы-1, что приводит к секреции ИЛ-1β и ИЛ-18 и дальнейшей стимуляции образования ИЛ-6 и СРБ. Цель исследования: изучить характеристики локального и системного воспаления при атеротромбозе, ассоциированном с NLRP3 инфламмасомой, а также их взаимосвязи с клинико-анамнестическим портретом больных ИМ с подъемом сегмента ST (ИМспST). В ходе выполнения работ по настоящему гранту впервые описаны характеристики системного воспаления у пациентов с ИМспST (n=45). Забор плазмы крови для определения содержания белка NLRP3, ИЛ-1β, ИЛ-6 и ИЛ-18 и каспазы-1 осуществлялся из инфаркт-связанной коронарной артерии (ИСКА), периферической артерии и вены в течение первых суток ИМ до проведения чрескожного коронарного вмешательства (ЧКВ), в течение 2-4 часов после проведения ЧКВ, а также на третьи и седьмые сутки ИМ. Образцы крови центрифугировали (2700 об/мин) в течение 10 мин, полученную плазму аликвотировали и замораживали образцы при температуре -80°С. Определение указанных биомаркеров было возможно как в артериальной, так и в венозной крови. Для белка NLRP3, ИЛ-1β, ИЛ-18 получены схожие изменения плазменных концентраций в виде максимально высоких уровней в венозной крови в первые сутки с последующим снижением к третьему дню госпитализации. Уровни белка NLRP3, ИЛ-1β, ИЛ-6 и ИЛ-18 в плазме венозной крови коррелировали с таковыми в ИСКА и периферической артерии, что позволяет измерять концентрации биомаркеров в венозной плазме в рутинной кардиологической практике. Учитывая минимальные концентрации маркеров на 3-й день, забор крови должен проводиться в ранние сроки ИМ (1-й день). Оценка динамики уровней белка NLRP3 и IL-1β выявила две разнонаправленные тенденции в изменении их концентраций в течение госпитализации. Тенденция в виде исходно более высоких уровней белка NLRP3 и ИЛ-1β с постепенным снижением к седьмым суткам была связана с более интенсивным повреждением миокарда в виде продолжительной ишемии и высоким уровнем тропонина I. Локальное воспаление оценено путем определения экспрессии NLRP3, ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-18, а также CD14+, CD206+ в тромбоаспирате у пациентов с ИМспST (n=34). Материал представлял собой фрагменты тромбоаспирата из ИСКА, полученные при проведении ЧКВ. Забранный материал хранился в архиве в виде парафиновых блоков. По результатам иммуногистохимического исследования выявлена экспрессия NLRP3, ИЛ-1β, -6, -18 макрофагами и нейтрофилами, а также экспрессия CD14, CD206 макрофагами. Количество NLRP3+ макрофагов преобладало над количеством NLRP3+ нейтрофилов в 3 раза (p= 0,002). Количество NLRP3+ макрофагов в смешанных тромбах преобладало над таковым в белых тромбах (p=0,012). У пациентов, поступивших в более ранние сроки, в тромбоаспирате отмечалось большее количество NLRP3+ макрофагов и общего числа NLRP3+ клеток (p=0,008 и p=0,01, соответственно). У больных, которым был проведен тромболизис на догоспитальном этапе, отмечалось меньшее содержание общего числа NLRP3+ клеток в тромбоаспирате (p=0,04), чем у больных, подвергнутых первичному ЧКВ. CD14+ макрофаги выявлены у 32 (94,18%) пациентов. CD206+ макрофаги выявлены у 30 (88,26%) пациентов. Количество CD14+ макрофагов преобладало над количеством CD206+ макрофагов в 4 раза (p= 0,0001). Отмечены сильные отрицательные корреляции между степенью выраженности липидного ядра и эрозии бляшки с уровнем ИЛ-1β в ИСКА, а также с уровнем белка NLRP3 и ИЛ-18 в венозной крови. Степень разрыва бляшки положительно коррелировала с концентрациями ИЛ-6 как в ИСКА, так и в венозной крови. Уровни белка NLPR3 были значимо выше у больных острым ИМ в сравнении с группой больных хронической ИБС и наличием показаний к реваскуляризации миокарда (n=12): 2,4 нг/мл (2,2; 2,5) против 0,8 нг/мл (0,7; 0,9) в контрольной группе, р = 0,000. Уровни каспазы-1, ИЛ-1β и ИЛ-18 в обеих группах до ЧКВ достоверно не отличались. Вероятно, что NLRP3 инфламмасома достаточно специфично регулирует воспалительные реакции у больных с острыми формами ИБС. При этом уровни каспазы-1, ИЛ-1β и ИЛ-18, изначально повышены в условиях хронической ИБС, что обусловлено разнообразными механизмами, инициирующими синтез данных молекул в организме, и их повышение при ИМ менее специфично. На основании анализа системных уровней биомаркеров и клинико-лабораторно-инструментальных характеристик пациентов между уровнями ИЛ-1β и ИЛ-6 отмечены умеренные прямые корреляции со значениями индекса нарушения локальной сократимости и обратные – с фракцией выброса левого желудочка, а также ударным объемом (УО). Выявлены сильные прямые корелляции между уровнями каспазы-1 в первые сутки и тропонина I на третьи сутки. Данные результаты свидетельствуют о потенциальном вкладе ИЛ-1β, ИЛ-6 и каспазы-1 в неблагоприятное ремоделирование миокарда после перенесенного острого ИМ. Значимых корреляций между системными уровнями белка NLRP3, ИЛ-18 и характеристиками миокардиального повреждения выявлено не было. При этом обратная корреляция общего количества NLRP3+клеток и NLRP3+макрофагов в тромбоаспирате с УО и конечно-диастолическим размером также является потенциальным свидетельством вклада NLRP3-опосредованного воспаления в неблагоприятное постинфарктное ремоделирование. Пациенты с неблагоприятными исходами заболевания имели более высокие уровни белка NLRP3, ИЛ-1β, ИЛ-6 и ИЛ-18 на всем протяжении индексной госпитализации. Неблагоприятные события были более характерны для пациентов с изначально более высокими уровнями белка NLRP3 и ИЛ-1β с последующим их снижением к 7-м суткам. У пациентов с благоприятным исходом в тромбоаспирате статистически значимо преобладали CD206+ макрофаги, а также ИЛ-1 и ИЛ-6. Таким образом, впервые описаны характеристики системного и локального воспаления у пациентов с острым ИМспST и их взаимосвязи с клинико-анамнестическим портретом больных. Описаны различия в уровнях маркеров у пациентов с ИМ и стабильной ИБС. В результате охарактеризован портрет больного с высоким риском наступления неблагоприятных сердечно-сосудистых событий.