КАРТОЧКА ПРОЕКТА ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ И ПОИСКОВЫХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ,
ПОДДЕРЖАННОГО РОССИЙСКИМ НАУЧНЫМ ФОНДОМ

Информация подготовлена на основании данных из Информационно-аналитической системы РНФ, содержательная часть представлена в авторской редакции. Все права принадлежат авторам, использование или перепечатка материалов допустима только с предварительного согласия авторов.

 

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ


Номер проекта 23-73-01220

НазваниеРазработка биорецепторных систем на основе проводящих полимеров и углеродных наноматериалов для создания портативных биосенсорных систем клинической диагностики и мониторинга физиологических процессов в организме

Руководитель Харькова Анна Сергеевна, Кандидат химических наук

Организация финансирования, регион федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тульский государственный университет" , Тульская обл

Конкурс №84 - Конкурс 2023 года «Проведение инициативных исследований молодыми учеными» Президентской программы исследовательских проектов, реализуемых ведущими учеными, в том числе молодыми учеными

Область знания, основной код классификатора 03 - Химия и науки о материалах; 03-205 - Аналитическая химия

Ключевые слова биосенсор, проводящие полимеры, наноматериалы, углеродные нанотрубки, печатные электроды, вольтамперометрия, биоэлектрокатализ, ферменты, клиническая диагностика

Код ГРНТИ31.19.00


 

ИНФОРМАЦИЯ ИЗ ЗАЯВКИ


Аннотация
В последние годы исследования в области биосенсоров вызывают огромный интерес в связи с их применением в клинической диагностике, фармацевтике, биомедицине и здравоохранении. Биосенсоры имеют хороший потенциал, так как просты, масштабируемы и доступны в производстве. Основной проблемой создания биосенсоров медицинского назначения является их невысокая чувствительность, не позволяющая определять низкие концентрации биомаркеров, и недостаточная селективность, осложняющая анализ таких сложных и многокомпонентных систем как кровь. Относительно невысокие характеристики разработанных к настоящему времени ферментных биосенсоров, предназначенных для клинической диагностики, являются стимулом к продолжению данных исследований в фундаментальном ключе. Таким образом, цель настоящего научного исследования: создание комплексного научно-методологического подхода к формированию амперометрических ферментных биосенсоров, созданных с использованием нанокомпозитных проводящих полимеров, и разработка на этой базе прототипа портативного комплекса для клинической диагностики и мониторинга физиологических процессов в организме. Решение проблемы создания биосенсоров для клинической диагностики (анализа глюкозы, лактата, мочевины и мочевой кислоты) будет основано на выборе подхода к формированию биологической рецепторной системы биосенсора, подхода к сопряжению ферментных систем биологического материала с электрохимическими процессами на электроде за счет использования электропроводящих гидрогелей и подхода к направленной модификации наноматериалами поверхности электрохимического датчика. Впервые, с использованием комплекса различных электрохимических методов, будет изучен механизм переноса электронов в системах на основе биосовместимых проводящих гидрогелей нанокомпозитных материалов на их основе. Для ряда проводящих систем на основе фенотиазинов и полиароматических соединений в комплексе с углеродными наноматериалами будут определены характеристики скорости переноса электронов в рассматриваемых системах. Это позволит сравнивать эффективность основных составляющих композита в биоэлектрохимических системах на основе ферментов и проследить связь электрохимических параметров и трехмерной структуры нанокомпозитных материалов с аналитическими и метрологическими характеристиками биосенсора, что в дальнейшем позволит создавать электрохимические биосенсоры с направленными свойствами. Таким образом, работа внесет вклад в разработку высокоэффективных аналитических систем на основе биосенсоров. Полученные в ходе выполнения проекта фундаментальные результаты будут использованы при разработке анализатора для клинической диагностики и мониторинга физиологических процессов, который по своим характеристикам и функциональным возможностям будет превосходить описанные зарубежные аналоги. Успешная реализация данного проекта позволит разработать подходы к созданию высокоэффективных аналитических устройств на основе миниатюрных печатных электродов. Такие анализаторы позволят повысить технологическую безопасность страны и увеличить уровень импортозамещения в области медицины и клинической диагностики. Разработанные биоаналитические системы могут быть использованы как медицинскими учреждениями, проводящими регулярные анализы крови пациентов, так и непосредственно лицами, нуждающимися в регулярном мониторинге клинически значимых метаболитов в крови.


 

ОТЧЁТНЫЕ МАТЕРИАЛЫ


 

Аннотация результатов, полученных в 2025 году
В результате анализа структуры «фермент – полиазур – углеродные нанотрубки» методами СЭМ, СЭМ-ЭДС и ЛКСМ установлено, что площадь покрытия матрицей составляет 89,77%, толщина – 62,9 мкм. Глюкозоксидаза распределена равномерно. Фермент, полиазур и нанотрубки образуют трехмерную структуру, где наноматериал служит каркасом. Анализ изображений СЭМ-ЭДС подтверждает наличие всех элементов, соответствующих системе. Методом циклической вольтамперометрии найдены константы скорости взаимодействия для системы «Полиазур – глюкозооксидаза»: 18±1 л/(моль∙с), с углеродными нанотрубками – 88±3 л/(моль∙с). Наименьшее влияние температуры выявлено для иммобилизованной уреазы (ответ биосенсора стабилен в диапазоне 20-60 ℃), для остальных иммобилизованных ферментов необходимо термостатирование ячейки. Найдены оптимальные диапазоны рН для иммобилизованных ферментов, которые, в целом, соответствуют рН физиологических жидкостей, за исключением системы «уриказа, полиазур, углеродные нанотрубки», pH которой сильно смещен в щелочную область. Аналитический сигнал ферментных электродов устойчив к изменению концентрации хлорида натрия по сравнению с литературными данными: при концентрации хлорида натрия 500 мМ в ячейке отклик биосенсора на лактат (при использовании фермента лактатдегидрогеназы) снижается на 4 %, на мочевину – на 4%, мочевую кислоту – на 4 %. Линейный диапазон системы «Глюкозооксидаза - полиазур – углеродные нанотрубки» (1,2-12,2 мМ) подходит для определения глюкозы в крови, «Лактатоксидаза - полиазур – углеродные нанотрубки» (1,2 – 3,0 мМ) – для лактата в поте, «Уриказа- полиазур – углеродные нанотрубки» (1,5 – 2,4 мМ) – для мочевой кислоты, а «Уреаза - полиазур – углеродные нанотрубки» (0,6 – 26 мМ) – для мочевины в крови и моче. Методом "введено-найдено" апробированы системы на основе "лактатокидаза - полиазур - углеродные нанотрубки" для анализа искусственного пота, системы "уреаза - полиазур - углеродные нанотрубки" и "уриказа - полиазур - углеродные нанотрубки" для анализа искусственной мочи. По результатам простого теста Стьюдента выявлено, что среднее выборочно значение и истинная концентрация лактата и мочевины отличаются незначимо. Статистически значимым является различие между "введенным" и "найденным" значением концентрации мочевой кислоты. Система на основе "уреазы - полиазура - углеродные нанотрубки" применялась для анализа проб биологических жидкостей. Результаты определения мочевины в образце с рН = 7,0 коррелируют с результатами референтного метода.

 

Публикации

1. Харькова А., Кузнецова Л., Перчиков Р., Герцен М., Мельников П., Зайцев Н., Чжан Дж., Арляпов В. Bionanocomposite Four-Channel Biosensor for Rapid and Convenient Monitoring of Glucose, Lactate, Ethanol and Starch GELS, Gels 2025, 11(5), 355 (год публикации - 2025)
10.3390/gels11050355

2. Харькова А.С., Медведева А.С., Кузнецова Л.С., Герцен М.М., Колесов В.В., Арляпов В.А., Решетилов А.М. A “2-in-1” Bioanalytical System Based on Nanocomposite Conductive Polymers for Early Detection of Surface Water Pollution Журнал Polymers (Q1, импакт-фактор 4,7, издательство Multidisciplinary Digital Publishing Institute (MDPI)), Polymers 2024, 16(10), 1431; https://doi.org/10.3390/polym16101431 (год публикации - 2024)
10.3390/polym16101431

3. Харькова А., Кузнецова Л., Иванова К., Герцен М., Арляпов В. Recent Advances in Amperometric Biosensors for Medical Applications: a Mini-review Журнал Current Topics In Medicinal Chemistry, bздательство Bentham Science, Current Topics in Medicinal Chemistry, Volume 25, Issue 7, 2025 (год публикации - 2024)
10.2174/0115680266323004241015122441