Аннотация результатов, полученных в 2024 году
В 2024 году все запланированные работы выполнены в полном объеме. Продолжен набор исследуемой группы: за отчетный период в исследование включено 20 пациентов (100% от запланированного количества). Всем пациентам проведено комплексное клиническое обследование, кардиопульмональный нагрузочный тест, однофотонная эмиссионная компьютерная томография миокарда (ОФЭКТ). Произведен забор крови на этапе до проведения коронарного шунтирования (КШ), а также на третий, пятый, седьмой и десятый день после КШ. Проведены процедуры по выделению митохондриальной ДНК (мтДНК) из образцов крови. Проведен иммуноферментный анализ с определением концентрации NTproBNP (270 (170;375) пг/мл) и цитохрома С (21 (17,4; 30) нг/мл). Проведено определение полиморфизмов мтДНК: 9055GA, 3010GA, 7028CT. Все пациенты были носителями замены 9055G; 12 пациентов – 3010A, 21 пациент – 3010G; 12 пациентов – 7028С, 14 пациентов – 7028T. Осуществлено определение числа копий мтДНК в плазме крови и в лейкоцитах периферической крови. Произведена оценка дыхательной функции изолированных митохондрий (МТХ) лейкоцитов периферической крови. Было установлено снижение степени сопряжения процессов окисления и фосфорилирования в митохондриях лейкоцитов периферической крови у всех пациентов, включенных в исследование (2,3 (1,5;2,8) усл.ед.). У всех пациентов осуществлен интраоперационный забор участка миокарда из ушка правого предсердия, с последующей пробоподготовкой и электронной микроскопией. Осуществлено проспективное наблюдение за пациентами, включенными в исследование в 2023 году. За годичный период наблюдения, повторная госпитализация в связи с прогрессированием заболевания потребовалась 6 пациентам. У трех пациентов развился летальный исход. Был предложен новый количественный показатель оценки структурного состояния МТХ кардиомиоцитов ушка правого предсердия – «Общая площадь межфибриллярных митохондрий» - Sмтх, равный отношению суммарной площади MTX, расположенных между сократительными волокнами кардиомиоцита, к общей площади межфибриллярного пространства. Убедительно показана связь данного показателя с общим функциональным статусом пациентов с ХСН, характеризующимся пройденной дистанцией в тесте 6-минутной ходьбы (r=0,478, p=0,002) и величиной пикового потребления кислорода при нагрузке (r=0,478, p=0,002). Установлена связь Sмтх с характером клинического течения ХСН: при наличии у пациента эпизода острой декомпенсации ХСН (ОДСН) в течение 12 месяцев до включения в исследование, показатель Sмтх оказался существенно меньше, чем у пациентов со стабильным течением ХСН («точка отсечения» Sмтх < 32% (чувствительность 79 % и специфичность 48 %)). Была выявлена обратная корреляционная связь Sмтх с уровнем NTproBNP (r=-0,345, р=0,002), что подтверждает значимость нарушений митохондриальной структуры в развитии и прогрессировании ХСН. Изучены корреляционные связи Sмтх с косвенными признаками митохондриальной дисфункции: с концентрацией цитохрома С (r=0,3, р=0,009), числом копий мтДНК в лейкоцитах крови (r=0,385, р=0,022) и величиной дыхательного контроля в МТХ лейкоцитов крови (r=0,281, р=0,024). Таким образом, исследованные косвенные признаки митохондриальной дисфункции статистически значимо коррелируют с показателем общей площади межфибриллярных митохондрий по данным электронной микроскопии, что свидетельствует о перспективности их использования в рутинной клинической практике. На основании количественной оценки протяженности мембран МТХ рассчитывали показатель, равный соотношению длин внешней и внутренней мембран МТХ. Среднее значение длины внешней мембраны МТХ составило 12,5 ± 3,3 пикселей, внутренней мембраны - 53,5±27,6 пикселей, соотношения длины внешней мембраны к внутренней - 0,27±0,1. Данный показатель продемонстрировал статистически значимую положительную корреляционную связь (r = 0,32; р=0,05) со скоростью вымывания радиофармпрепарата из миокарда по результатам ОФЭКТ, что обладает высокой степенью научной и практической значимости. Проект был выбран в числе лучших для представления в рамках Всероссийской онлайн-конференции «Научные мосты: результаты грантополучателей РНФ». Были доложены промежуточные результаты работы, которые получили положительную оценку присутствующих экспертов и представителей Российского научного фонда (https://docs.google.com/document/u/0/d/1Jt06ubTWAIHCD4JvUfYfAbC_-phtR4fvP4UQ6ULwgFU/mobilebasic?pli=1). Опубликовано/принято к публикации три статьи в журналах, индексируемых в Web of Science/Scopus. Представлено три устных и два постерных доклада на российских конференциях с международным участием. Таким образом, запланированный объем работ на 2024 год полностью выполнен. Полученные научные результаты обладают высокой значимостью и опубликованы или приняты к публикации в ведущих российских журналах, индексируемых в международных базах данных, а также доложены на всероссийских конференциях с международным участием, в том числе Российском национальном конгрессе кардиологов.

Аннотация результатов, полученных в 2025 году
В 2025 году в исследование было включено 20 пациентов, что соответствует плану работы. Всем пациентам проведен полный комплекс запланированного лабораторно-инструментального обследования, продолжено создание биобанка крови и ее производных, митохондриальной ДНК. Всего за три года работы в исследуемую когорту включено 60 пациентов. Получено более 500 микрофотографий КМЦ при увеличении 5000 и 15000 раз. Таким образом, настоящее исследование является одним из крупнейших в мире по изучению ультраструктуры митохондрий кардиомиоциотов (КМЦ) при хронической сердечной недостаточности (ХСН). Клинические, лабораторные, инструментальные данные, результаты проспективного наблюдения и показатели ультраструктуры митохондрий внесены в базу данных Excel. Получено свидетельство о регистрации базы данных (№ 2025625399, от 22.11.2025 Бюл. № 12). Коллективом авторов за время выполнения проекта разработано 3 новых показателя для количественного описания ультраструктуры митохондрий КМЦ, убедительно доказана их клиническая значимость. В частности, для предложенного ранее в рамках выполнения данного проекта показателя Общей площади межфибриллярных митохондрий в текущем году подтверждено наличие статистически значимых ассоциаций с клиническими проявлениями ХСН при увеличении численности когорты исследования. Так, данный параметр коррелировал с толерантностью к физической нагрузке по данным теста с шестиминутной ходьбой (ТШХ) (r=0,483, p = 0,002) и кардиопульмонального нагрузочного тестирования (r=0, 0,593, p = 0, 0,033), пиковым потреблением кислорода при нагрузке (r=0, 0,395, p = 0, 0,012) и уровнем NT-proBNP (r=0, –0,472, p = 0,017). В отчетный период продолжен анализ внутренней структуры митохондрий, рассчитываемый как отношение длины внешней мембраны митохондрий, к длине внутренней мембраны. Согласно проведенному анализу, медиана данного параметра в исследуемой группе составила 31 (25;37) %. Продемонстрирована его связь с величиной фракции выброса (ФВ) левого желудочка (r=–0,593, p = 0,033). Впервые в мире предложен суммарный расчетный показатель, отражающий как количество и плотность расположения митохондрий между миофибриллами, так и внутреннюю структуру данных органелл, рассчитанный как отношение показателя «Общая площадь межфибриллярных митохондрий» к показателю «Отношение длины внешней мембраны к длине внутренней мембраны». Медианные значения суммарного показателя составили - 1,4 (0,95; 2). Его клиническая значимость была подтверждена наличием статистически значимых различий у пациентов с наличием и отсутствием фибрилляции предсердий (ФП): 1,75 (1,28; 2,39) – в группе пациентов без ФП и 0,96 (0,89; 1,54) – при наличии ФП (р=0,021). За отчетный период проанализированы ассоциации полиморфизмов мтДНК (C7028T, G3010A и G9055A) с тяжестью течения ХСН. Выявлено, что среди пациентов с умеренно сниженной ФВ аллель 7028T встречался в 2 раза чаще, чем среди пациентов с низкой ФВ (78,9% против 34,9%, p = 0,002). При низкой ФВ среди пациентов с дилатацией правого предсердия частота аллеля 7028С составила 8 (44,4%), аллеля 7028T – 10 (55,6%); без дилатации – 20 (80,0%) и 5 (20,0%) (p = 0,024). Частота аллеля 3010A была меньше среди пациентов с потребностью в диуретической терапии, чем среди лиц, не принимавших диуретики (8,6% против 30,8%, p = 0,005). Проанализирована динамика числа копий митохондриальной ДНК в крови в периоперационном периоде аортокоронарного шунтирования (АКШ) и изучены ассоциации данного показателя с клиническим течением ХСН. Согласно полученным результатам, медиана числа копий мтДНК в плазме крови составила 4,7 (3,2; 7,57) млн копий на 1 мл до АКШ. На 3 день после операции число копий мтДНК в плазме составило 2,7 (2,24; 5,93) млн копий на 1 мл, на 5 день — 9,7 (3,3; 13,1) млн копий на 1 мл, на 7-й день — 11,3 (7,27; 19,85) млн копий на 1 мл, и на 10 день — 11,8 (11,45; 18,01) млн копий на 1 мл. У пациентов с развитием послеоперационных осложнений регистрировалось значительное увеличение числа копий мтДНК в плазме на 129,9% (17,23; 231,4) на 10 день после АКШ. Тогда как в группе пациентов без развития осложнений значение данного параметра оставалось стабильным (динамика — 11,36% (-47,48; 57,70) (p=0,04)). Относительно другого косвенного маркера митохондриальной дисфункции - цитохрома С, также получены новые научные данные, свидетельствующие об ассоциации его повышенных концентраций с уменьшением дистанции ТШХ (р=0,048), более низкими показателями качества жизни (р=0,046) и ФВ левого желудочка (р=0,029). В рамках реализации проекта в 2025 году опубликовано 2 статьи (одна в журнале Q2 - JOURNAL OF GERIATRIC CARDIOLOGY), принято к публикации – 3 статьи в журналах, индексируемых в международных базах данных WoS/Scopus, что соответствует заявленному плану работы на 2025 год. Представлено 6 устных докладов на международных и российских конференциях. Исполнитель проекта Сыромятникова Е.Е. под руководством Гарганеевой А.А. удостоена 2 места в конкурсе молодых ученых Российского национального конгресса кардиологов с докладом «Митохондрии и сердечная недостаточность: исследование ассоциации количественных параметров ультраструктуры митохондрий кардиомиоцитов с тяжестью клинических проявлений сердечной недостаточности», что подтверждает актуальность и высокую научную значимость данного исследования. Таким образом, запланированный объем работ на 2025 год полностью выполнен. Полученные научные результаты обладают высокой и практической значимостью, позволяют сформулировать новые научные гипотезы и раскрывают перспективы практического внедрения маркеров митохондриальной дисфункции в клиническую практику.