КАРТОЧКА ПРОЕКТА ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ И ПОИСКОВЫХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ,
ПОДДЕРЖАННОГО РОССИЙСКИМ НАУЧНЫМ ФОНДОМ
Информация подготовлена на основании данных из Информационно-аналитической системы РНФ, содержательная часть представлена в авторской редакции. Все права принадлежат авторам, использование или перепечатка материалов допустима только с предварительного согласия авторов.
ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ
Номер проекта 23-76-01072
НазваниеБиотехнологический потенциал макролактина - антимикробного метаболита Bacillus velezensis для защиты растений от фитопатогенных бактерий.
Руководитель Пошвина Дарья Владимировна, Кандидат биологических наук
Организация финансирования, регион федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Тюменский государственный университет" , Тюменская обл
Конкурс №84 - Конкурс 2023 года «Проведение инициативных исследований молодыми учеными» Президентской программы исследовательских проектов, реализуемых ведущими учеными, в том числе молодыми учеными
Область знания, основной код классификатора 06 - Сельскохозяйственные науки; 06-104 - Агробиотехнологии
Ключевые слова Bacillus velezensis, вторичные метаболиты, поликетиды, макролактин, антибиотик, фитопатогены, биопестициды
Код ГРНТИ34.27.51
ИНФОРМАЦИЯ ИЗ ЗАЯВКИ
Аннотация
Болезни растений, вызываемые различными микроорганизмами, в том числе грибами, бактериями, вирусами, нематодами и простейшими, наносят ущерб сельскохозяйственному производству и приводят к большим потерям урожая. Около 20–40 % потерь урожая сельскохозяйственных культур обусловлено патогенными инфекциями. Для снижения заболеваемости растений используются различные стратегии, включая синтетические пестициды, менее восприимчивые сорта, севооборот и другие меры борьбы, но их эффективности обычно недостаточно из-за выживания и устойчивости почвенных патогенов. Более того, чрезмерное использование синтетических пестицидов оказывает неблагоприятное воздействие на окружающую среду и живые организмы, а также нарушает функционирование экосистем и снижает устойчивость сельского хозяйства. В настоящее время исследования направлены на экологически безопасные альтернативы для борьбы с патогенами растений. Наиболее распространенным подходом к биологической борьбе является подбор микроорганизмов-антагонистов, изучение механизмов их действия и разработка препаратов для биоконтроля. Значительный интерес представляют бактерий рода Bacillus ввиду их способности продуцировать вторичные метаболиты широкого спектра биологической активности. Почти 5% генома Bacillus spp. предназначен для производства структурно разнообразных антимикробных соединений, которые продемонстрировали различный антагонизм против грибковых и бактериальных фитопатогенов. Так, изоляты Bacillus velezensis обладают способностью синтезировать одновременно несколько антимикробных веществ различной природы и спектра действия. В этом контексте, поликетиды, в частности, макролактины, продуцируемые B. velezensis, были описаны как важная группа, обладающая преимущественно антибактериальной активностью против многих патогенов. Однако, действие макролактинов на фитопатогены и нецелевые организмы остается до сих пор малоизученным. Кроме того, имеются лишь эпизодические данные о влияние макролактинов на почвенный микробиом и резистом.
В связи с вышеизложенным, особого внимания с позиций актуальности исследований заслуживает детальный фундаментальный анализ, направленный на всестороннее изучение биологический свойств антимикробного метаболита штамма Bacillus velezensis X-Bio-1 - макролактина в аспекте его возможного использования в качестве биопрепарата для защиты растений от фитопатогенных бактерий.
В рамках данного проекта будет разработан лабораторный регламент процесса получения субстанции макролактина с использованием современных микробиологических и физико-химических методов. Кроме того, с помощью метабаркодинга гена 16S рРНК и метагеномного секвенирования будет оценено воздействие макролидного антибиотика - макролактина на бактериальное сообщество, резистом и мобилом почвы.
Новизна проекта заключается в: 1) реализации комплексного методического подхода в изучении биологических свойств макролактина, включающего современные микробиологические, физико-химические и молекулярно-генетические методы исследования; 2) получении новых уникальных знаний о влиянии макролактина на структуру почвенного микробиома и резистома; 3) возможности использования полученных результатов в качестве основы для дальнейшей разработки биотехнологии использования бактериальных препаратов в качестве биопестицидов, что является актуальной научной задачей, решение которой будет способствовать снижению пестицидной нагрузки на агробиоценозы и улучшению экологической обстановки.
ОТЧЁТНЫЕ МАТЕРИАЛЫ
Аннотация результатов, полученных в 2025 году
В контексте развития биологического контроля болезней растений макролактины рассматриваются как перспективные соединения, обладающие выраженными антимикробными свойствами и эффективно подавляющие рост многих бактериальных фитопатогенов. При разработке потенциальных антибактериальных биопрепаратов для защиты растений важно учитывать возможное негативное воздействие этих веществ на почвенный микробиом, который играет ключевую роль в устойчивом сельском хозяйстве, обеспечивая здоровье почвы, продуктивность растений и стабильность экосистемы. Макролактин A (McA), продуцируемый штаммом Bacillus velezensis X-BIO-1, обладает выраженной антибактериальной активностью в отношении широкого спектра патогенных бактерий, в том числе фитопатогена Pectobacterium carotovorum. Однако влияние McA на структуру почвенного микробиома и селекцию генов антибиотикорезистентности (ARGs) у почвенных бактерий остается недостаточно изученным. Известна лишь одна работа (Yuan J. et al., 2016), в которой изучалось воздействие макролактина А на микробиом почвы с помощью метабаркодингового секвенирования гена 16S рРНК. В настоящем исследовании метод высокопроизводительного shotgun-секвенирования был использован для анализа различий в структуре сообщества почвенных бактерий, а также распространенности и разнообразия генов устойчивости к антибиотикам (ARGs) в почвенных пробах, обработанных McA, по сравнению с контрольными (не обработанными McA) образцами. Таксономический анализ показал, что воздействие высоких (10 мг/кг почвы) и низких (1 мг/кг почвы) концентраций McA приводит к изменениям в популяциях почвенных бактерий. Добавление McA привело к значимому увеличению относительной численности доминирующих родов бактерий, принадлежащих к филуму Pseudomonadota (классы Alphaproteobacteria и Betaproteobacteria). В частности, отмечено увеличение относительной численности родов Bradyrhizobium и Mesorhizobium, что свидетельствует о благоприятном воздействии McA на эти почвенные бактерии. Виды Bradyrhizobium и Mesorhizobium являются важными компонентами почвенного сообщества, выполняющими широкий спектр биохимических функций, включая симбиотическую фиксацию азота, денитрификацию и деградацию ароматических соединений (Serbent et al., 2019; Huang et al., 2017). Большинство геномов, реконструированных из исследуемых почвенных метагеномов, обработанных McA, также относились к филуму Pseudomonadota (классы Alphaproteobacteria и Gammaproteobacteria). Alphaproteobacteria, были представлены родами, участвующими в фиксации азота в почве, такими как Pseudolabrys и Methylovirgula (Li Z. et al., 2022). Результаты профилирования ARGs показали, что как низкие, так и высокие дозы McA влияли на представительство ARGs в сообществе. В то же время низкая доза McA изменяла обилие большего числа ARGs (7 генов) по сравнению с высокой дозой (3 гена). В целом, действие McA последовательно изменяло распространенность генов, связанных с резистентностью к эльфамицинам, гликопептидам, фторхинолонам, рифампицинам и макролидам. Корреляционный анализ выявил 185 взаимосвязей между 52 генами антибиотикорезистентности (ARGs) и 34 бактериальными родами. Среди этих бактерий Streptomyces, Baekduia и Capillimicrobium предположительно несли наиболее разнообразные ARGs. Путем сборки и аннотации бактериальных геномов ( MAGs) мы определили истинных носителей ARGs. Анализ MAGs выявил широкое распространение ARGs. Преобладающим ARG оказался ген adeF, кодирующий компонент системы эффлюкса, который был найден более чем в половине MAGs и обеспечивает устойчивость к тетрациклинам и фторхинолонам. Также обнаружены гены, отвечающие за устойчивость к гликопептидам (vanTG, vanYB, vanYG, vanWI). MAG_1.5_Gammaproteobacteria sp. продемонстрировал устойчивость к конкретным классам антибиотиков, содержа гены qacG (устойчивость к дезинфектантам) и rsmA (устойчивость к диаминопиримидинам, фениколам и фторхинолонам). Кроме того, профилирование метаболического потенциала почвенного микробиома при низкой дозе McA выявило увеличение распространенности генов, связанных с сигнализацией, хемотаксисом и эффлюксом лекарственных препаратов. Полученные данные в совокупности значительно расширяют понимание функциональной роли макролактина А в экологии Bacillus velezensis и одновременно предоставляют оценку экологических рисков, связанных с использованием биопрепаратов, содержащих метаболиты или живые клетки бактерий этого вида.
Результаты исследования, проведенного в рамках проекта, освещались в ряде СМИ:
https://ri.ria.ru/20250205/nauka-1997453509.html
https://indicator.ru/medicine/veshestvo-iz-kletok-pochvennykh-bacill-zashitit-rasteniya-ot-vrednykh-bakterii-05-02-2025.htm
https://inscience.news/ru/article/russian-science/veshestvo-iz-kletok-pochvennyh-bacill
https://www.agroxxi.ru/zhurnal-agroxxi/novosti-nauki/kak-veschestvo-iz-kletok-pochvennyh-bacill-zaschischaet-rastenija-ot-vredonosnyh-bakterii.html
https://doctor.rambler.ru/medscience/54156935-veschestvo-iz-kletok-pochvennyh-batsill-zaschitit-rasteniya-ot-vrednyh-bakteriy/
https://innovanews.ru/info/news/zoo/novyjj-uroven-zashhity-bakterii-iz-pochvy-pomogajut-spasat-urozhajj-i-zdorove/
https://scientificrussia.ru/articles/vesestvo-iz-kletok-pocvennyh-bacill-zasitit-rastenia-ot-vrednyh-bakterij
https://forkagro.com/incubator/v/issledovanie-makrolaktina-a-novyj-mekhanizm-dejstviya-antibiotika-na-kletki-bakterij-otkrytiya-dlya-selskogo-hozyajstva
https://www.utmn.ru/news/stories/nauka-i-innovatsii/1258803/
https://tumen.bezformata.com/listnews/antibiotika/142206465/
https://glavagronom.ru/news/uchenye-tyumgu-raskryli-mehanizm-deystviya-prirodnogo-antibiotika-iz-pochvy
https://sputnik-ossetia.ru/20250206/rossiyskie-uchenye-vyyasnili-kak-antibiotik-mozhet-bezopasno-zaschitit-urozhai-ot-vrediteley-31900116.html
https://www.moskva-tyt.ru/news/20250205-rossiyskiye-uchenyye-vyyasnili-kak-bezopasno-zashchitit-27.html
https://rscf.ru/news/release/veshchestvo-iz-kletok-pochvennykh-batsill-zashchitit-rasteniya-ot-vrednykh-bakteriy/
Публикации
1.
Васильченко А.С., Лукьянов Д.А., Дилбарян Д.С., Усачев К.С., Пошвина Д.В., Талдаев А., Никандрова А.А., Имамутдинова А.Н., Гараева Н.С., Бикмуллин А.Г., Клочкова Э.А., Русанов А.Л., Ромашин Д.Д., Лузгина Н.Г., Остерман И.А., Сергиев П.В., Тесля А.В.
Macrolactin A Is an Inhibitor of Protein Biosynthesis in Bacteria
Biochimie (год публикации - 2025)
10.1016/j.biochi.2025.01.003
2.
Пошвина Д.В., Балкин А.С., Дилбарян Д.С., Васильченко А.С.
Unravelling the response of the soil microbiome to macrolactin A: A metagenomic study
Chemosphere, Volume 387, 2025, ISSN 0045-6535,
https://doi.org/10.1016/j.chemosphere.2025.144645. (год публикации - 2025)
10.1016/j.chemosphere.2025.144645