Аннотация результатов, полученных в 2024 году
Профилактическая медицина доказала свою эффективность и экономическую целесообразность. Так, за последнее столетие вакцинация сохранила больше жизней, чем любая другая медицинская технология. В настоящее время успешно используются методы профилактики большинства инфекционных заболеваний, кроме того, активно разрабатываются методы вакцинации против онкологических и даже аутоиммунных заболеваний. В то же время развитие медицины привело к увеличению продолжительности жизни и к росту доли возраст-ассоциированных заболеваний , которые ложатся тяжелым социально-экономическим бременем. В этом контексте разработка vaccine-based подходов для профилактики или лечения возрастных заболеваний открывает широкие перспективы для продления периода активного долголетия и имеет высокий экономический потенциал. Хорошо известно, что развитие возрастных заболеваний связано с накоплением старых и не функциональных клеток (их также называют сенесцентными) в различных органах и тканях. Было показано, что удаление таких клеток приводит к восстановлению функций, омоложению и продлению жизни экспериментальных животных. Однако разработка вакцин против сенесцентных клеток осложняется их антигенной гетерогенностью и отсутствием уникального маркера. Кроме того, сенесцентные клетки – это собственные клетки организма, что может быть причиной их низкой иммуногенности. Основной целью данного проекта является изучение возможности формирования T-клеточного иммунного ответа на антигены, ассоциированные с сенесцентностью. Достижение этой цели возможно через испытание прототипов "сенолитических вакцин", которые бы вызывали детектируемый иммунный ответ в животных моделях. Несмотря на высокое антигенное разнообразие, в настоящее время не известны конкретные антигены, которые были бы уникальными для сенесцентных клеток и не обнаруживались бы в нормальных тканях. Поэтому нами было принято решение использовать различные производные сенесцентных клеток для для дальнейшего тестирования в животных моделях. В первый год выполнения проекта нами были валидированы методы получения достаточного для экспериментальной работы количества сенесцентных клеток. Проведено подтверждение сенесцентного статуса этих клеток, на высоком уровне с помощью современных методов были изучены морфологические особенности получаемых клеток, топология мембран, и особенности их лизосом и митохондрий. Также мы смогли идентифицировать накопление таких клеток в крови и дерме экспериментальных животных с возрастом дублирующими друг друга способами, что подтверждает релевантность использования наших подходов. Кроме это, проведенный нами биоинформатический анализ данных из открытых источников подтвердил накопление сенесцентных клетко в коже человека с возрастом. Наша стратегия включает отработку основных этапов валидации различных методов в мышиных моделях с дальнейшим переходом на исследования с участием нечеловекообразных приматов. Использование такой модели позволит получить данные максимально близкие к человеку. В случае одобрения продолжения проекта, в следующем году мы планируем испытать первые прототипы "сенолитических вакцин" для интенсификации иммунного ответа против стареющих клеток.

Аннотация результатов, полученных в 2025 году
В отчетном периоде 2025 года разработаны и валидированы шесть прототипов сенолитических вакцин: четыре на основе лизатов сенесцентных фибробластов, индуцированных доксорубицином, цисплатином, блеомицином и этопозидом, и две mRNA-вакцины против uPAR на платформе липидных наночастиц. Первая mRNA-конструкция (SNM) содержит MITD-домен для усиления презентации антигена через MHC-I, вторая (SN-Poly) использует Poly I:C в качестве TLR3-адъюванта. Для комплексной оценки сенесцентного состояния создан интегральный индекс (IISI), объединяющий три параметра: долю SA-β-Gal⁺-клеток, снижение митохондриального потенциала и гипертрофию лизосомального аппарата (https://vestnik.rsmu.press/archive/2025/5/5/content?lang=ru ). Кроме того методом машинного зрения по конфокальным изображениям выявлена значительная гетерогенность органелл в стареющих и сенесцентных клетках: мультимодальные распределения флуоресценции лизосомальных и митохондриальных трейсеров отражают сосуществование субпопуляций лизосом и митохондрий с различными характеристиками в пределах одной клетки. При этом наибольшее влияние на митохондриальный и лизосомальный компартменты оказывали доксорубицин и цисплатин, повышая число митохондрий со сниженным потенциалом и также повышая число укрупненных лизосом со сниженным pH (https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC12565627/). Анализ иммуногенности показал, что индукторы, особенно доксорубицин, усиливают экспрессию генов SASP (Ccl2, Il6, Mmp3) и молекул, участвующих в презентации антигенов (в первую очередь CD40). Антигенпрезентирующие клетки, нагруженные лизатами сенесцентных фибробластов после индукции доксорубицином и цисплатином, лучше других лизатов вызывали активацию T-клеток и продукцию ими IFNy. Это подтверждает не только иммуногенный потенциал сингенных сенесцентных клеток, но и способность адаптивного иммунитета и, в частности, T-клеток распознавать такие антигены и формировать иммунный ответ. В экспериментах in vivo трехкратная иммунизация мышей прототипами сенолитических вакцин вызывала экспансию клонов T-клеток, что свидетельствует о формировании антигенспецифического ответа на ассоциированные с сенесцентностью антигены. Биоинформатический анализ scRNA-seq кожи здоровых доноров (18–76 лет, n=32) выявил возрастную функциональную перестройку T-клеточного компартмента: снижение числа и цитотоксической активности CD8⁺-лимфоцитов и увеличение доли регуляторных T-клеток, что может лежать в основе приобретенной толерантности к сенесцентным антигенам, которая формируется при старении. Снижение цитотоксической активности в сочетании с усилением функций регуляторных T-клеток может создавать толерогенную среду, способствующую накоплению сенесцентных клеток (doi 10.18699/vjgb-25-118). По-видимому, это активный процесс формирования периферической толерантности к ассоциированным с сенесцентностью антигенам, при котором иммунная система теряет способность распознавать и элиминировать сенесцентные клетки. Выявленный дисбаланс в компартменте T-лимфоцитов представляет потенциальную мишень для терапевтического вмешательства, направленного на восстановление иммунного надзора и элиминацию стареющих клеток. Полученные в 2025 году результаты демонстрируют перспективность сенолитических вакцин для стимуляции иммунной системы к элиминации сенесцентных клеток и открывают новые возможности для геропротективных стратегий.