Аннотация результатов, полученных в 2024 году
Проведен виртуальный биоскрининг 105 аминопроизводных 1,2- и 1,3-дизамещенных индолов на предмет их действия на метаботропные глутаматные рецепторы, функционально связанные с другими рецепторными структурами, в т.ч. лейкотриеновыми, с использованием компьютерных программ: Prediction of Activity Spectra for Substances (PASS) и Swiss Target Prediction (STP), что позволило выявить 8 веществ с лабораторными шифрами SV-1010, RRS-1, RRS-11, RRS-22, RRS-47, RRS1-3392, RRS1-3428 и RRS1-3435. Отобранные вещества были подвергнуты фармакологическому скринингу на предмет антилейкотриенового действия при внутрижелудочном (в/ж) введении на картофельном крахмальном геле (в последующем исследуемые соединения и референс-препараты вводились в/ж на приведенном носителе) с использованием флогогена зимозана (активатор 5-липоксигеназы), инъецированного субплантарно (с/п) крысам, в результате чего выявлено 2 соединения SV-1010 и RRS-1, которые были исследованы с применением искусственного интеллекта. Так, по данным хемореактомного и хемопротеомного моделирования фармакологических эффектов SV-1010 и референс-препаратов диклофенака, нимесулида и кеторолака найдены достоверные отличия в их эффектах для 820 белков протеома крысы. SV-1010 в меньшей степени, чем препараты сравнения, может ингибировать дофаминовые рецепторы D1 и D2 и, в то же время, стимулировать высвобождение дофамина в неостриатуме; в большей степени, чем референс-препараты, может блокировать транспортер ГАМК и NMDA-рецепторы Grin1/Grin2b; активировать каннабиноидные рецепторы CB2; ингибировать ферменты биосинтеза лейкотриенов, CC-рецепторы провоспалительных хемокинов и лейкотриенов. Хемопротеомное моделирование фармакологических эффектов RRS-1 в сравнении с диклофенаком, нимесулидом и кеторолаком на протеоме человека выявило достоверные отличия в эффектах взаимодействий с 1232 белками протеома, что позволило обнаружить 47 таргетных белков, которые наиболее выражено отличают эффекты RRS-1 от референс-препаратов. Кроме этого, RRS-1 способно активировать рецепторы аденозина, дофамина, каннабиноидов, ГАМК, внося вклад в противовоспалительный, антиноцицептивный и нейропротекторный эффекты; ингибировать таргетные белки (CCR1, CCR3, CCR8, рецепторы LTB4, колониестимулирующий фактор макрофагов), а также ряд киназ – таргетов противоопухолевой и противовоспалительной терапии (AURKA, AURKB, CDK4, CDK9, PLK1, SRPK2, GSK3B). Выявлено, что SV-1010 обладает рядом преимуществ перед RRS-1: средняя эффективная доза (ЭД50) при зимозановом отеке первого составляет 0,089 мг/кг, тогда как второго – не достигает уровня ЭД50; сопоставление SV-1010 и RRS-1 по дозам, равным 30% (ЭД30), показало, что и в этом случае SV-1010 несколько превосходит (тенденция) RRS-1 (ЭД30 0,03 мг/кг против ЭД30 0,04 мг/кг); SV-1010, по сравнению с RRS-1, проще в синтезе, осуществление которого возможно из более доступного сырья. Исходя из этого SV-1010 определено как вещество-лидер. При определении средней летальной дозы (ЛД50) 8 отобранных веществ в опытах на крысах установлено, что ЛД50 для SV-1010, RRS-1, RRS1-3428, RRS1-3392, RRS1-3435, RRS-47, RRS-22, RRS-11 составило 715,0, 605,0, 756,0, 798,6, 752,0, 738,6, 756,0 и 693,9 мг/кг соответственно, а ЛД50 для референс-препаратов диклофенака, индометацина и монтелукаста равны 370,0, 47,0 и 7723,42 мг/кг соответственно (Шварц Г.Я., Сюбаев Р.Д., 2012; Власенко Е.К. и соавт., 2023). При исследовании противовоспалительной активности SV-1010 с применением ряда флогогенов, инъецированных крысам с/п в заднюю лапу, установлено, что в условиях серотонин-, гистамин-, простагландин Е2-, арахидоновая кислота- и каолин-индуцированных отеках через 1 ч после введения отмеченных флогогенов SV-1010 по ЭД50 превосходит диклофенак в 23,5; 1550,0; 74,5; 134,9 и 122,2 раза, а по терапевтическому индексу (ТИ) – в 45,5; 2994,7; 143,9; 260,6 и 236,1 раза соответственно. При каррагенин-индуцированном отеке через 1 ч после введения флогогена (на этот период времени отек связан с повышением уровня кининов) SV-1010 по ЭД50 превосходит диклофенак в 17,9 раза, а индометацин – в 32,8 раза, по ТИ диклофенак – в 34,5 раза, а индометацин – в 498,3 раза; через 3 ч после введения флогогена (на этот период времени отек связан с повышением уровня простагландинов) SV-1010 по ЭД30 (активность SV-1010 не достигала уровня 50%) превосходит диклофенак в 13,7 раза, а индометацин – в 19,7 раза, по ТИ диклофенак – в 26,6 раза, а индометацин – в 300,4 раза. В условиях зимозан-индуцированного отека через 1 ч после введения флогогена SV-1010 по ЭД50 превосходит монтелукаст в 6,4 раза, а по ТИ уступает ему в 1,7 раза. При исследовании влияния SV-1010 и референс-препарата целекоксиба в условиях липополисахарид-индуцированного отека лапы крыс, установлено, что SV-1010 (0,1 и 0,01 мг/кг) через 2, 6 и 24 ч подавляет отек лапы на 40 и 50; 46,2 и 38,5; 72,7 и 18,2% соответственно, тогда как целекоксиб (30 мг/кг) ингибирует отек в отмеченные временные интервалы на 30,0, 23,1 и 18,2%, т.е. SV-1010 проявляет наиболее выраженный противовоспалительный эффект в дозе 0,1 мг/кг, при этом по активности значительно превосходит целекоксиб. При исследовании влияния SV-1010 на ревматоидный артрит у крыс, вызванный полным адъювантом Фрейнда – ПАФ (при с/п введении в правую лапу), с профилактической и лечебной целями установлено, что исследуемое вещество в первом случае в дозах 0,1 и, более выражено, 0,01 мг/кг обладает значимым профилактическим действием; ингибирование отека правой лапы на 9 сутки составило в первой дозе 38,0%, а во второй – 40,8%, тогда как контрлатеральной лапы на 14 сутки в первой дозе – 58,3%, а во второй – 75,0%. Применение SV-1010 в дозе 0,01 мг/кг с лечебной целью (на фоне развившегося ревматоидного артрита к 14 дню в правой лапе и артрита иммунологического происхождения в левой лапе) выявило, что на 25 сутки ингибирование отека на правой лапе составило 18,5%, а на контрлатеральной лапе – 61,1%. Важно заметить, что у крыс, которым вводилось SV-1010 с лечебной целью, у 2 животных из 10 были выявлены единичные язвы (размером 0,5–1 мм; округлой формы) слизистой оболочки желудка (СОЖ), тогда как у животных с адъювантным артритом без лечения язвы (размером 1–3 мм; округлой и продолговатой формы) СОЖ наблюдались у всех 10 животных. Исследование антипиретического действия SV-1010 в опытах на крысах показало, что в контроле при подкожном введении суспензии пекарских дрожжей через 18 ч отмечалось повышение ректальной температуры животных на 1 градус. Через 2 ч после введения SV-1010 (0,1 и 1 мг/кг) отмечалось значимое снижение температуры тела крыс по сравнению с контролем на 0,4 и 0,7 °С соответственно.

Аннотация результатов, полученных в 2025 году
Проведены исследования противовоспалительных, анальгезирующих, гастротоксических и антиульцерогенных свойств соединения-лидера с лабораторным шифром SV-1010, а также его влияния на TRPV1 и опиоидные рецепторы. При брадикинин-индуцированном отеке лапы крыс SV-1010 (0,1 и 1 мг/кг) несколько уступает по эффекту диклофенаку (10 мг/кг), но действует в 100 и 10 раз меньших дозах. В условиях капсаицин-индуцированного отека лапы крыс SV-1010 (0,01, 0,1 и 1 мг/кг) подавляет воспаление на 30,8, 56,4 и 23,1% соответственно, в то время как кеторолак (6 мг/кг) – на 15,4%. При хроническом пролиферативном воспалении, индуцированного имплантацией под кожу спины крыс ватного шарика, SV-1010 в дозе 0,1 мг/кг как фазу экссудации, так и фазу пролиферации сопоставимо с монтелукастом (1,76 мг/кг) и уступает диклофенаку (15 мг/кг), индометацину (20 мг/кг) и нимесулиду (20 мг/мг), а в дозе 1 мг/кг – превосходит монтелукаст и сопоставимо с диклофенаком, индометацином и нимесулидом. В условиях системного воспаления, индуцированного липополисахаридом (ЛПС), у мышей SV-1010 и диклофенак не влияют на уровень лейкоцитов, но способствуют нормализации уровня моноцитов и эозинофилов. У мышей, получавших диклофенак, не обнаружено базофилов в периферической крови, тогда как у животных, у которых использовалось SV-1010, содержание базофилов не отличалось от такового в контроле. Диклофенак вызывал повышение в крови уровня лимфоцитов и снижение нейтрофилов, тогда как SV-1010 не индуцировало подобных изменений. ЛПС приводило к увеличению уровня тромбоцитов и значения тромбоцитокрита. SV-1010 способствовало уменьшению тромбоцитоза, но уступало по эффективности диклофенаку. ЛПС приводил к увеличению уровня экспрессии генов провоспалительных цитокинов TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-10, COX2, iNOS в 10,3; 6,2; 5,8; 3,4; 10,8 и 19,4 раза соответственно. Диклофенак снижал уровень TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-10 и COX2 на 90,3; 56,1; 37,5; 59,2 и 94,0% соответственно и увеличивал iNOS на 14,0%, а SV-1010 снижало уровни TNF-α (78,1%), IL-10 (69,2%) и IL-1β (67,0%), сопоставимо с таковыми диклофенака, тогда как в случае IL-6 (79,7%) и iNOS (97,3%) SV-1010 оказалось эффективнее РП. SV-1010 практически не ингибировало уровень экспрессии генов COX2 (16,1%). SV-1010 у крыс с адъювантным артритом оказывает корригирующее действие на большинство анализируемых показателей редокс-гомеостаза (параметры биохемилюминесценции, концентрацию диеновых конъюгатов, восстановленного глутатиона и цитрата, активность аконитатгидратазы и каталазы) в сыворотке крови и сердце. По сравнению с диклофенаком SV-1010 способствует более значимым изменениям данных параметров. Патоморфологические исследования при адъювантном артрите у крыс показали, что SV-1010 (0,1 мг/кг) в отличие от диклофенака (12,5 мг/кг) оказывает менее значимое влияние на морфологическую структуру миокарда: несущественное разделение кардиомиоцитов с меньшим количеством признаков гиалиновой дегенерации и инфильтрации иммунокомпетентными клетками. При применении SV-1010 (0,1 и 0,5 мг/кг) и сингуляра (1,75 мг/кг) в условиях эозинофильной бронхиальной астмы у мышей-самок линии BALB/c не происходило изменения удельной сопротивляемости бронхов в сравнении с контрольными животными, уменьшались клеточность бронхоальвеолярного лаважа и уровень IgE в сыворотке крови. Наиболее выраженный эффект наблюдался в группе животных, получавших SV-1010 (0,5 мг/кг). SV-1010 при внутрижелудочном введении в дозах 0,1 и 50 мг/кг не обладает гастротоксическим действием, а в дозах 10 и 25 мг/кг оказывает гастропротекторный эффект. В дозе 25 мг/кг антиульцерогенный эффект SV-1010 сопоставим с таковым омепразола (50 мг/кг). В тесте «горячая пластина» в опытах на мышах SV-1010 по средней эффективной дозе (ЭД0,5) и терапевтическому индексу (ТИ) превосходит индометацин и диклофенак в 58,3 и 1852,7, 154,4 и 468,0 раза соответственно. На фоне введения налоксона анальгезия SV-1010 снижалась на 36,3% по сравнению с группой, в которой это соединение вводилось без налоксона, что указывает на вовлеченность опиоидергической системы в анальгезирующее действие SV-1010. В тесте «отдергивание хвоста» у крыс SV-1010 по ЭД0,5 и ТИ в 18,9 и 111,1 раза соответственно превосходит кеторолак. В условиях теста «давление на лапу» при формалин-индуцированном отеке правой лапы (ипсилатеральной – ИЛЛ) крыс SV-1010 на контрлатеральной лапе – КЛЛ (без введения формалина) по ЭД0,5 и ТИ превосходит кеторолак в 7,7 и 45,4 раза, на ИЛЛ через 1–5 мин после введения формалина – в 10,9 и 63,7 раза, на ИЛЛ через 40–50 мин после введения формалина – 7,7 и 45,3 раза соответственно. В тесте «уксусные корчи» SV-1010 по ЭД0,5 и ТИ превосходит диклофенак в 5,36 и 16,2 раза соответственно. При «формалиновом» тесте SV-1010 (0,01 мг/кг) в первой фазе воспаления уменьшает количество потряхиваний лапы крысами на 17,6%, а число облизываний лап увеличивает на 17,5%. Во второй фазе воспаления количество потряхиваний лапы уменьшилось на 33,8%, а облизывания лап – на 3,4%, что сопоставимо с диклофенаком (7 мг/кг). В дозе 0,1 мг/кг SV-1010 в первую фазу воспаления снижает количество потряхиваний и облизываний лап на 38,1 и 42,3%, а во вторую фазу – на 44,3 и 49,5% соответственно. В условиях «капсаицинового» теста у крыс SV-1010 (0,1 и 1 мг/кг) и кеторолак (6 мг/кг) снижают количество облизываний на 65,8; 54,8 и 47,9%, а время облизываний – на 61,3; 46,2 и 54,8% соответственно. На количество потряхиваний SV-1010 не оказывает значимого действия, в то время как кеторолак снижает данный показатель на 64,3%. При нейропатической боли, вызванной аксотомией седалищного нерва у крыс, в тесте «давление на лапу» SV-1010 (0,1 и 1 мг/кг) купирует механическую гиперальгезию к 14 суткам у 100% животных и сопоставимо по эффекту с прегабалином (13 мг/кг). SV-1010 не вызывает видимых побочных эффектов, тогда как прегабалин индуцирует у животных гиподинамию, сонливость и шаткость походки. SV-1010 (10 нМ) на 50% уменьшает амплитуду вызванного тока через канал TRPV1. По данным молекулярного докинга аффинность SV-1010 в отношении κ-опиоидных рецепторов в 78,6 и 6,3 раза выше, чем парциального κ-агониста буторфанола и селективного κ-агониста U-50,488 соответственно. При хемореактомном анализе для SV-1010 установлены наименьшие значения Kd для κ-рецепторов 64,8 нМ, а для δ- и μ-рецепторов Kd составили 79,9 и 243,8 нМ соответственно. Результаты хемореактомного моделирования констант активации отчасти подтвердили результаты анализа констант связывания Kd (SV-1010 может характеризоваться бо́льшим сродством к κ-рецепторам, чем к μ-рецепторам). Разработаны компьютерные программы для определения средней летальной дозы – ЛД50, а также ЛД5, ЛД16, ЛД84 и ЛД99, отражающих летальные дозы, при которых гибель животных составляет 5, 16, 84 и 99% соответственно, и противовоспалительной активности (определения средней эффективной дозы – ЭД0,5) изучаемых веществ и расчета площадей под кривыми зависимости «отёк-время».