Аннотация результатов, полученных в 2025 году
На данном этапе работы были изучены метаболические эффекты диетической добавки на основе олеилэтаноламида (БАД-ОЭА) на модели алиментарно-индуцированного ожирения у мышей. Развитие ожирения сопровождалось выраженными морфологическими изменениями в тканях печени, а также повышением уровня холестерина в сыворотке крови животных. В печени наблюдалось повышение уровня провоспалительных цитокинов, развитие окислительного стресса и апоптоза гепатоцитов. Введение БАД-ОЭА нормализовало уровень холестерина, снизило экспрессию маркеров воспаления (CD68 и Iba-1), проапоптотических маркеров (Bad, Bax) и уровень провоспалительных цитокинов (IL-1β, IL-6, TNFα). Параллельно повысилась экспрессия ядерных рецепторов PPAR-μ и PPAR-γ, рецептора адипонектина 1 (AdipoR1), противовоспалительных (CD163) и антиапоптотических (Bcl-2) маркеров. Введение БАД-ОЭА вызвало индукцию ферментов липолиза печени (Acox1, Cpt1a), а также факторов метаболизма холестерина (Ldlr, Furin), одновременно снижая транскрипцию проатерогенного фактора Pcsk9. Полученные результаты предполагают комплексное действие БАД ОЭА при поражении печени, связанном с ожирением, которое включает снижение системного воспаления. К основным биохимическим механизмам, лежащим в основе развития патологий при ожирении, относятся активация провоспалительных сигнальных путей и стимуляция клеток иммунной системы. Способность агонистов PPAR-α подавлять воспаление хорошо известна. Этот эффект в основном опосредован через негативную регуляцию провоспалительных факторов транскрипции, таких как ядерный фактор-κB (NF-κB) и активаторный белок-1 (AP-1), в том числе в печени. В настоящей работе выявлена способность БАД-ОЭА подавлять экспрессию провоспалительных факторов в печени. Избыточная продукция провоспалительных сигнальных факторов в печени имеет тенденцию способствовать активации клеток Купфера и их поляризации в сторону провоспалительного фенотипа M1, что сопровождается вторичным увеличением продукции провоспалительных факторов и активных форм кислорода (ROS) и способствует развитию порочного круга. БАД-ОЭА, подавляя продукцию провоспалительных цитокинов, ингибировал воспалительную активацию клеток Купфера, что подтверждено иммуногистохимическим исследованием, а сдвиг пропорционального распределения макрофагов с CD68-позитивных на CD163-позитивные может быть обусловлен их поляризацией в сторону противовоспалительного фенотипа M2, что также характерно для агонистов PPAR-α. Активация апоптоза гепатоцитов при развитии жировой дистрофии печени обычно обусловлена развитием персистирующего воспаления с последующей стимуляцией клеток Купфера в сочетании с липотоксичностью и повышенной продукцией свободных радикалов. Применение БАД-ОЭА сопровождалось угнетением апоптоза клеток печени при ожирении, что подтверждается как морфологическим исследованием - уменьшением очагов апоптоза, так и иммуногистохимическими методами - отмечается снижение уровня проапоптотических факторов Bad и Bax в печени на фоне повышения уровня антиапоптотического фактора Bcl-2 а также рецепторов к адипонектину, что, по литературными данным, способствует подавлению апоптоз посредством взаимодействия с рецептором PPAR-α. Следовательно, в данном случае можно говорить об индуцированной БАД-ОЭА регуляции продукции адипонектина, что также способствует подавлению апоптоза гепатоцитов. Что касается регуляции липидного обмена, то основные эффекты, обнаруженные ранее для агонистов PPAR-α, включают активацию бета-окисления жирных кислот, ингибирование липогенеза de novo и снижение процессов синтеза триацилглицеридов в печени. В нашем исследовании эти эффекты БАД-ОЭА напрямую подтверждаются ПЦР-анализом ферментов бета-окисления в ткани печени и косвенно подтверждено оценкой веса печени. Активация экспрессии адипонектина, выявленная в этом исследовании, также может способствовать усилению липолитических процессов в печени. Известно, что в экспериментальных исследованиях адипонектин запускает бета-окисление и одновременно ингибирует липогенез de novo. В то же время агонисты PPAR-α увеличивают экспрессию рецепторов адипонектина. Соответственно, БАД-ОЭА, посредством активации PPAR-α, а также посредством влияния на экспрессию адипонектина, вызывает увеличение бета-окисления жирных кислот, замедляя накопление липидов в печени и, таким образом, ингибируя развитие жировой дистрофии печени. Наблюдаемое снижение уровня холестерина в сыворотке под действием БАД-ОЭА, вероятно, также обусловлено взаимодействием с PPAR-α, опосредованным снижением активности PCSK9, естественного ингибитора рецептора липопротеинов низкой плотности (LDLr). Подобное действие ранее было выявлено для широко используемых гипохолестеринемических лекарственных препаратов фибратов. Этот класс препаратов характеризуется двойным механизмом действия: связывание с соответствующими участками на промоторе гена PCSK9 и подавление транскрипции гена PCSK9; и на посттрансляционном уровне - через активацию PC5/6A и фурина, белков, осуществляющих протеолитическое расщепление белка PCSK9. Таким образом, принимая во внимание данные по уровню холестерина в сыворотке крови животных и данные ПЦР-анализа тканей печени, можно предположить, что БАД-ОЭА проявляет сходные с фибратами эффекты, что подтверждается повышением уровня экспрессии ЛПНП у животных со стандартным рационом, получавших БАД, по сравнению с контрольной группой. Также наблюдается тенденция к повышению фурина и снижению PCSK9 в группах без ожирения. В то же время отсутствие подобной динамики в случае групп с алиментарным ожирением может быть связано с поражением функциональных клеток печени и снижением продукции соответствующих белков. И, вероятно, антиапоптотический эффект БАД-ОЭА косвенно влияет на усиление экспрессии PCSK9. Тем не менее, для окончательного подтверждения наличия этого «двойного механизма» необходимы дальнейшие исследования уровней белков PCSK9 и ЛПНП в печени, а также оценка уровней PC5/6 во время терапии. Таким образом потенциал агонистов PPAR в лечения и профилактики НАЖБП очевиден из-за их функционального положения на стыке метаболизма липидов, энергетического баланса и воспаления. По результатам данного этапа работы была написана и опубликована в журнале Pathophysiology (издательство MDPI, I.F= 2,7 ) 1 экспериментальная статья