КАРТОЧКА ПРОЕКТА ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ И ПОИСКОВЫХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ,
ПОДДЕРЖАННОГО РОССИЙСКИМ НАУЧНЫМ ФОНДОМ

Информация подготовлена на основании данных из Информационно-аналитической системы РНФ, содержательная часть представлена в авторской редакции. Все права принадлежат авторам, использование или перепечатка материалов допустима только с предварительного согласия авторов.

 

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ


Номер проекта 24-76-10044

НазваниеРазработка российских рекомбинантных вакцин против высоко- и низкопатогенного гриппа птиц для ветеринарного применения

Руководитель Тарлавин Николай Владимирович, Кандидат ветеринарных наук

Организация финансирования, регион Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Санкт‑Петербургский государственный университет ветеринарной медицины» , г Санкт-Петербург

Конкурс №98 - Конкурс 2024 года «Проведение исследований научными группами под руководством молодых ученых» Президентской программы исследовательских проектов, реализуемых ведущими учеными, в том числе молодыми учеными

Область знания, основной код классификатора 06 - Сельскохозяйственные науки; 06-203 - Ветеринария

Ключевые слова Вакцины, птицеводство, высокопатогенный грипп птиц, низкопатогенный грипп птиц, вирус гриппа, инфекционные болезни птиц, рекомбинантные вакцины, обратная генетика, эпизоотология, биотехнология, продовольственная безопасность, защита населения от инфекционных болезней, биобезопасность.

Код ГРНТИ68.41.63


 

ИНФОРМАЦИЯ ИЗ ЗАЯВКИ


Аннотация
Проект направлен на создание актуальных рекомбинантных вакцин против высоко- и низкопатогенного гриппа птиц для ветеринарного применения. Целью проекта является подготовка высокопродуктивных рекомбинантных вакцинных кандидатов, создающих напряженный долгосрочный специфический иммунитет в отношении высокопатогенного гриппа птиц, вызываемого вирусом гриппа А подтипа H5N1 и низкопатогенного гриппа птиц, вызываемого вирусом гриппа А подтипа H9N2. В настоящее время территория Российской Федерации охвачена крупнейшей в истории панзоотией гриппа птиц, выражающейся в постоянных ежегодных вспышках высоко- и низкопатогенного гриппа на крупнейших птицеводческих холдингах и фабриках. В течение 2023 года более десятка миллионов сельскохозяйственной птицы было уничтожено, убытки составили многие сотни миллионов рублей. Необходимо отметить, что подобная ситуация разворачивается в глобальном масштабе: вирусы высокопатогенного гриппа птиц подтипа Н5 проникают на территории, где ранее не регистрировались и вызывают крупные вспышки среди домашних и промышленных птиц, а также диких птиц и млекопитающих. Такое бесконтрольное распространение вируса создает высокую угрозу для людей, поскольку отмечены многочисленные случаи заражения и гибели млекопитающих, в том числе, живущих в непосредственной близости с человеком (домашние кошки). Для реализации проекта создана команда ветеринарных врачей, вирусологов и биотехнологов, способных создать линию отечественных высокоэффективных вакцин против высоко- и низкопатогенного гриппа птиц для ветеринарного применения. Вирусные кандидаты, входящие в состав данных вакцин, будут обладать высокими ростовыми характеристиками, за счет получения реассортантных штаммов на основе штаммов-доноров, имеющих высокую урожайность. При этом, такие реассортантные штаммы будут иметь антигенно актуальные поверхностные белки – гемагглютинин и нейраминидазу. Важной особенностью проекта является подготовка вакцинных штаммов сразу для двух субстратов производства - для куриных эмбрионов, так и для культур клеток. Наличие альтернативных способов выпуска вакцины критически важно в условиях, когда куриные эмбрионы, как субстрат, будут недоступны в случае развития массовых вспышек гриппа Н5. Для создания данных вирусных кандидатов будут использованы вирусологические, биотехнологические и молекулярно-биологические методы, в том числе методы обратной генетики и секвенирования. В ходе проекта будут изучены способность кандидатных вакцинных штаммов реплицироваться в куриных эмбрионах и в культурах клеток, будут исследованы иммуногенные и протективные свойства созданных прототипных вакцин. Новизна проекта заключается в отсутствии вакцин против гриппа птиц подобного типа на российском рынке. Особенностями данного проекта является наличие гарантий заинтересованности в скорейшей коммерциализации результатов проекта со стороны ведущих производителей вакцин на территории России. Скорейший запуск данных вакцин в производство способен существенно улучшить эпизоотическую обстановку в Российской Федерации, сохранить здоровье поголовью птицы и не допустить дальнейший рост цен на птицеводческую продукцию. Отдельно необходимо отметить, что внедрение современных антигенно актуальных вакцин против гриппа птиц внесет важную роль в обеспечение биобезопасности на территории России.


 

ОТЧЁТНЫЕ МАТЕРИАЛЫ


Аннотация результатов, полученных в 2025 году
Первый этап проекта был посвящен получению антигенно-актуального вакцинного штамма для создания препаратов для профилактики высокопатогенного гриппа птиц подтипа H5N1. По результатам проведенного филогенетического анализа циркулирующих на территории России вирусов гриппа подтипа Н5 было установлено преобладание штаммов клайда 2.3.4.4b, подгруппа ВВ. Из указанной подгруппы был выбран материал вируса А/черноголовая чайка/Сыктывкар/19987/2023 для использования в качестве поверхностных антигенов вакцинного штамма. Методом обратной генетики был получен вакцинный штамм A/Syktyvkar/PR8/6:2/HA20 (H5N1), представляющий собой реассортант с составом генома 6:2, на основе высокорепродуктивного донора A/PR/8/34 с поверхностными антигенами H5N1. Генно-инженерным методом последовательность сайта расщепления гемагглютинина в штамме заменена на мотив, характерный для современных низкопатогенных вирусов гриппа птиц А(Н5). Низковирулентный фенотип вакцинного штамма подтвердили по отсутствию репродукции в культуре клеток MDCK в отсутствии трипсина, а также отсутствию макроскопических повреждений у инфицированных куриных эмбрионов. Таким образом команда доказала, что собранный вирус безопасен как для птицы, так и для человека, так как после внесенных мутаций вирус утратил свою вирулентность. Далее была подтверждена генетическая стабильность, антигенные свойства и высокий уровень репродукции штамма в куриных эмбрионах на протяжении 5 пассажей. Полученные результаты показали, что вирус A/Syktyvkar/PR8/6:2/HA20 (H5N1) может быть использован для создания ветеринарной вакцины против высокопатогенного гриппа птиц H5N1. Штамм был депонирован в Государственной коллекции вирусов. Далее безвредность и антигенная активность инактивированной вакцины, изготовленной на основе вируса A/Syktyvkar/PR8/6:2/HA20 (H5N1) с добавлением гидроксида алюминия в качестве адъюванта были продемонстрированы при иммунизации суточных цыплят кросса Декалб Уайт и 150-дневных кур кросса Доминант. После вакцинации не наблюдали ухудшения состояния птиц, при этом вакцина формировала стойкий иммунный ответ. В организме иммунизированных суточных цыплят кросса «Декалб Уайт» вакцина показала себя наиболее эффективно. Однократная вакцинация вызывала у птиц образование антител в титре более чем 1:32 в РТГА., что соответствует уровню надежной защиты. После ревакцинации, среднегеометрическое значение титра антител превысило 1:256, что предполагает стойкую защиту. Помимо гидроксида алюминия команда применяла масляные адъюванты. При применении масла в качестве адъюванта титр антител в крови у вакцинированной птицы превышал 1:256 в РТГА при однократном введении и 1:512 - при двукратном. Таким образом, были изучены различные кратность и объем введения изготовленной вакцины, наиболее предпочтительный метод введения (масляная вакцина - подкожно, вакцина с гидроокисью алюминия - внутримышечно).

 

Публикации

1. Тарлавин Н.В., Веретенников В.В., Джавадов Э.Д., Кудря К.С., Красков Д.А., Дегтярева А.В. Поствакцинальная дифференциация иммунного ответа, индуцированного цельновирионными, рекомбинантными и субъединичными вакцинами против высокопатогенного гриппа птиц Международный вестник ветеринарии, Международный вестник ветеринарии. – 2024. – № 4. – С. 14-19. (год публикации - 2024)
10.52419/issn2072-2419.2024.4.14

2. Тарлавин Н.В., Джавадов Э.Д., Веретенников В.В., Красков Д.А., Сергеева М.В., Кудря К.С., Заусаева А.В. Изучение антигенной активности рекомбинантной реассортантной вакцины против высокопатогенного гриппа птиц подтипа H5N1 Птица и птицепродукты, Изучение антигенной активности рекомбинантной реассортантной вакцины против высокопатогенного гриппа птиц подтипа H5N1 / Н. В. Тарлавин, Э. Д. Джавадов, В. В. Веретенников [и др.] // Птица и птицепродукты. – 2025. – № 2. – С. 53-57. – DOI 10.30975/2073-4999-2025-27-2-53-57. – EDN EKRMCM. (год публикации - 2025)
10.30975/2073-4999-2025-27-2-53-57

3. Тарлавин Н.В., Веретенников В.В, Джавадов Э.Д., Сергеева М.В., Кудря К.С., Красков Д.А., Яковлева А.С., Горбаков М.Е., Калиматова А.А., Хрипункова Д.С. Оценка безопасности и безвредности рекомбинантного кандидатного штамма для профилактики высокопатогенного гриппа птиц H5N1 Международный вестник ветеринарии (год публикации - 2025)

4. Васильева С.В., Тарлавин Н.В., Веретенников В.В., Хрипункова Д.С. Изучение влияния различных схем вакцинации цыплят против высокопатогенного гриппа подтипа H5N1 на показатели метаболизма и гуморального иммунитета Ветеринария Кубани (год публикации - 2025)

5. Сергеева М.В., Кудря К.С., Плотникова М.А., Веретенников В.В., Джавадов Э.Д., Красков Д.А., Иванова А.А., Петрова П.А., Тарлавин Н.В. Получение кандидатного вакцинного штамма вируса высокопатогенного гриппа птиц подтипа А(H5N1) методом обратной генетики Сельскохозяйственная биология (год публикации - 2025)

6. Джавадов Э.Д., Тарлавин Н.В., Веретенников В.В., Дианов А.Н., Красков Д.А. Опыт Китая в борьбе с высокопатогенным гриппом птиц и в его профилактике Птица и птицепродукты, Опыт Китая в борьбе с высокопатогенным гриппом птиц и в его профилактике / Э. Д. Джавадов, Н. В. Тарлавин, В. В. Веретенников [и др.] // Птица и птицепродукты. – 2025. – № 1. – С. 50-53. – DOI 10.30975/2073-4999-2025-27-1-50-53. – EDN THWIKZ. (год публикации - 2025)
10.30975/2073-4999-2025-27-1-50-53